动物乳腺生物反应器是一项利用转基因动物的乳腺代替传统的生物发酵，进行大规模生产可供治疗人类疾病或用于保健的活性蛋白质的现代生物技术。目前科学家已在牛和羊等动物的乳腺生物反应器中表达出了抗凝血酶、血清白蛋白、生长激素等重要药品。大致过程如图所示：
(1)在过程③中需要用到的工具酶有 。要使人的药用蛋白基因在奶牛乳腺细胞中特异性表达，完整的基因表达载体要包括目的基因、 、标记基因等部分。
(2)要实现超数排卵，应在性成熟雌牛发情周期的某一阶段用 处理。通过①采集的精子不能直接使成熟的卵子受精，原因是 。
(3)将获得的重组细胞培养成早期胚胎后，移植到经过 处理的受体母牛子宫内。因为我们对细胞所需的营养条件还没有完全搞清楚，所以，在早期胚胎的培养基中，往往还需要添加 。
(4)若要一次获得多只完全相同的转基因牛，应采用胚胎分割移植技术。在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，应注意将 均等分割。胚胎分割移植后发育成小牛，这些小牛的基因型 (填“相同”或“不同”)。
下图为某转基因小鼠培育过程示意图，①～⑦表示相关过程。请回答：
（1）过程①注射的激素是____________，
（2）过程③用到的工具酶有_____________，过程④常用的方法是______________。基因工程的核心步骤是__________________。
（3）⑥筛选过程通常采用的检验方法是_____________。
随着人们生活水平的提高，乳制品需求越来越大，为了扩大生产，提高产崽率，要进行良种牛的培育。下图为胚胎移植的基本程序及早期胚胎发育过程，请据图回答：
(1)用 对供体进行超数排卵处理，获得更多的卵母细胞，经受精后可得到早期胚胎。
(2)冲卵实质上是用特定装置将供体母牛子宫内的_____ ___冲洗出来。
(3)图中数字标号1代表的结构名称是 。标号3为_____ ___，它将来发育为 。
(4)若想同时获得多个完全相同的子代，在胚胎移植前应进行 ，应选在 时期的胚胎进行此项操作。
(5)受体母牛必须和供体牛属于同一物种。移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是 。
毛角蛋白II型中间丝（KIFII）基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIFII基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。
(1)过程①中最常用的运载工具是__________，所需要的酶是限制酶和_____________。
(2)在过程②中，用__________处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养过程中，将成纤维细胞置于5%CO2的气体环境中，CO2的作用是________________。
(3)在过程③中，用___________处理以获得更多的卵（母）细胞。成熟卵（母）细胞在核移植前需要进行____________处理。
(4)从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是______________________。在胚胎移植前，通过____________技术可获得较多胚胎。
请回答有关下图的问题：
(1)图甲中①～⑤所示的生物工程为________________。该工程通过对__________的修饰或合成，对现有的________进行改造，或制造出一种新的蛋白质，以满足人类生产生活的需求。
(2)图甲中序号④所示过程叫做________________，该过程遵循的碱基互补配对原则不同于翻译过程的是________(请将模板碱基写在前)。
(3)如图乙，一个基因表达载体的组成，除了目的基因外，在基因尾端还必须有[2]________；图中[3]________的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。
(4)若预期蛋白质欲通过乳腺生物反应器生产，则构建基因表达载体时，图乙中序号[1]代表的是________；且在图甲中⑨过程之前，要对精子进行筛选，保留含性染色体________的精子。
(5)为获得较多的受精卵进行研究，图甲中⑥过程一般用激素对供体做________处理；为提高培育成功率，进行⑩过程之前，要对________动物做________处理。若图甲中的卵母细胞来自从屠宰场收集的卵巢，则其在⑧之前需进行体外培养到________期方能受精。
(6)用________技术处理发育到________期或囊胚期的早期胚胎，可获得同卵双胎或多胎。若是对囊胚进行处理，要注意将________均等分割。
科学家利用转基因技术将人的高血压相关基因导入大鼠受精卵，培育遗传性高血压转基因模型大鼠，以研究遗传性高血压的致病机理及筛选有效的治疗药物。请回答：
(1)获得目的基因后，常利用____________技术在体外将其大量扩增。在构建基因表达载体的过程中，它的组成除了目的基因外，还必须有启动子、终止子和________________。
(2)将人的高血压相关基因导入受精卵中的最有效方法是___________。
(3)在体外培养受精卵时，培养液中通常需加入___________等一些天然成分，还需要提供CO2以维持____________
(4)胚胎移植前应保证供体和受体的____________相同，所以要对受体鼠进行___________处理。用于胚胎移植的早期胚胎一般是___________。
以下是科学家采用不同方法培育良种牛的过程，请据图回答下列有关问题：
(1)①过程必须用到__________酶，②过程使用的是___________酶。③表示_______技术。④表示基因工程中_______________过程； 若方法c是最常用的将目的基因导入动物细胞的方法，则方法C是_________________。
(2)如果转基因牛D的牛奶中含有_____________，则说明目的基因在个体水平已表达成功。
(3)图中对良种奶牛进行处理时用到的激素是________。 A和B分别是指________技术和___________技术。
利用转基因奶牛乳腺生物反应器可生产人的生长激素，根据下图回答有关问题。
（1）基因表达载体的组成，除了目的基因外，还必须有_________、__________以及标记基因等。
（2）在体外受精前，要对精子进行__________处理，对于牛的精子常采用______。
（3）图中①过程常采用____________，图中②过程的培养液成分比较复杂，除一些无机盐和有机盐类外，还需要添加维生素、_______、氨基酸、核苷酸等成分，以及_______等物质。
（4）早期胚胎发育到____________才进行移植。
以下是科学家采用不同方法培育良种牛的过程，请据图回答下列有关问题：
(1)图中对良种奶牛进行处理时用到的激素是____________，①过程必须用到_________酶，②过程使用的是_________酶。③表示___________技术，④表示基因工程中___________过程；若方法C是最常用的将目的基因导入动物细胞的方法，则方法C是____________。
（2）图中采用的生物工程技术A和B分别是指___________和____________。
(3)为实现人血清白蛋白基因在转基因牛E的乳腺细胞中表达，应让该血清白蛋白基因和__________的启动子等调控组件结合在一起。如果转基因牛E的牛奶中含有_________， 则说明血清蛋白基因在个体水平已表达成功。
科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导性多能干细胞（iPS），继而利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠，流程如下：
（1）从黑鼠体内获得体细胞后，对其进行的初次培养称为 ，培养的细胞在贴壁成长至铺满培养皿底时停止分裂，这种现象称为 。
（2）图中2-细胞胚胎可用人工方法从灰鼠输卵管内获得，该过程称为 ；也可从灰鼠体内取出卵子，通过 后进行早期胚胎培养获得。早期胚胎培养的发育培养液中含有的成分是无机盐、 、氨基酸、核苷酸、维生素、激素以及
等。
（3）图中重组囊胚通过 技术移入白鼠子宫内继续发育，暂不移入的胚胎可使用 方法保存。
（4）小鼠胚胎干细胞（ES）可由囊胚的 分离培养获得。iPS与ES细胞同样具有发育全能性，有望在对人类iPS细胞进行定向 后用于疾病的细胞治疗。
(1)在哺乳动物的核转移实验中，一般通过 （物理方法）将受体细胞激活，使其进行细胞分裂和发育，当胚胎发育到 阶段时，将胚胎移入受体（代孕）动物体内。
(2)一般情况下，体外扩增目的基因常用的方法是 。在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的 。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用 处理。
(3)获取干扰素的传统方法是从人的白细胞中提取，但产量很低。科学家利用 酶将干扰素基因与牛乳腺蛋白基因的启动子（即RNA聚合酶 的部位）等调控组件连接在一起，采用 的方法将重组DNA导入牛的 细胞中，经胚胎早期培养一段时间后移植入母体内发育成熟，即可获得能产生干扰素的转基因牛，大大提高了干扰素的产量。
2012年诺贝尔生理学或医学奖授予两位在细胞核重编程领域有重大贡献的科学家。科学家把c–Myc等4个关键基因通过逆转录病毒载体转入小鼠的成纤维细胞，使其变成诱导多能干细胞——iPS细胞，这意味着未成熟的细胞能够发展成所有类型的细胞。
（1）基因工程中经常用的载体除了动植物病毒外还有________和_____ _。
（2）若想增强载体病毒颗粒的感染性，可利用__________技术改造病毒外壳蛋白，直接对__________进行操作。
（3）应用__________技术得到重组细胞，激活重组细胞发育成早期胚胎。使用从__________中获得的胚胎干细胞，在培养中根据需要加入 以诱导其分化得到各种组织器官，用于治疗某些疾病，这种技术称为____________________。
（4）iPS细胞的获得不使用胚胎细胞或卵细胞，也不诱导发育成个体，因此不会像生殖性克隆一样引发__________问题。
（5）iPS细胞在体外已成功地被诱导分化为神经元细胞、神经胶质细胞、心血管细胞和原始生殖细胞等，究其本质原因是基因____________________的结果。
人的血清白蛋白(HSA)在临床上需求量很大，通常从人血中提取。但由于艾滋病病人类感染性病原体造成的威胁与日俱增，使人们对血液制品顾虑重重。如果应用基因工程和克隆技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，那么利用牛的乳汁生产血清白蛋白就成为可能。其大致过程如下：
Ⅰ．采集良种供体牛的卵母细胞和精液，通过体外受精，形成奶牛受精卵；
Ⅱ．构建基因的表达载体，并将其导入奶牛受精卵，形成转基因细胞；
Ⅲ．电脉冲刺激转基因细胞促使其形成早期胚胎；
Ⅳ．将胚胎移植到受体母牛的子宫中，最终发育成转基因小牛。
请回答下列问题：
（1）一般情况下，采集良种奶牛的卵母细胞的方法是： 、 。
（2）步骤Ⅰ中，在体外受精前，需要对牛的精子进行 处理，一般采用的方法为 ，即将精子放在一定浓度的 或钙离子载体A23187 中。
（3）步骤Ⅱ中构建基因表达载体是需要将的血清白蛋白基因与 等调控组件重组在一起，从而利用利用转基因牛的乳汁生产血清白蛋白。
（4）步骤Ⅳ中，应选择性别为 的奶牛胚胎进行移植。请举出三种人工控制可筛选胚胎性别的方法： 、 、 。
科学家培育荧光鼠的设计思路可用下面的图解表示。
依据设计程序，回答下列问题：
（1）科学家在过程A中对天然质粒做的修饰改造是________ 。
（2）检测荧光小鼠细胞内是否含有基因X，在分子水平上通常用______________________作探针；判断转基因荧光鼠荧光基因的表达是否成功，在个体水平上应检测_____________ 。
（3）如果想一次繁殖多只转基因鼠，则需要在过程G中实施____________，该操作一般在胚胎发育至________期进行。
如图表示哺乳动物胚胎发育过程的几个阶段，请据图回答问题：
(1)写出各个阶段的名称：
A：________，B：________，C：________。
(2)写出图中各标号的名称：
[2]________，[4]________，[5]________，[7]________，[8]________。
(3)A时期的细胞具有发育上的______性，B时期开始出现______，C时期开始出现________。
(4)[2]将来发育成________。
(5)动物胚胎是由合子经有丝分裂形成的，仅由一个精子和卵子结合成合子的生理基础是_____________________________________________________________________。
粤公网安备 44130202000953号