【生物——选修3：现代生物科技专题】下图是将目的基因导入动物细胞，培育转基因动物的常用操作程序。根据图示过程和所学知识，将下面操作程序补充完整。
（1）构建基因表达载体：在构建基因表达载体时常要用到 两种工具酶。如果目的基因要在乳腺细胞中表达，基因表达载体构建时要将目的基因与 的启动子、标记基因和终止子等组件重组在一起，其中标记基因的作用是 。
（2）获得足够数量的受精卵：为了获得足够数量的受精卵，先利用 刺激数排卵。雌鼠经过交配，将受精卵从输卵管中取出。
（3）将目的基因导入细胞：通常采用 技术将目的基因导入受精卵。
（4）早期胚胎培养：早期胚胎培养的培养液成分一般比较复杂，除一些无机盐和有机盐外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及 等物质。当胚胎培养到适宜的阶段时，可进行胚胎移植。
（5）胚胎移植：在胚胎移植前要对接受胚胎的受体进行 处理。移植后，还要对受体雌鼠进行妊娠检查。
（6）转基因鼠的检测：经过一段时间妊娠后，产下一群小鼠，为了检测哪些是转基因鼠，可以用 作探针，进行DNA分子杂交检测。
请回答胚胎工程和基因工程方面的问题：
（1）应用胚胎工程技术可以培育出“试管牛”。试管牛的培育需经过体外受精、＿＿＿＿、＿＿＿＿＿以及在母体中发育和产出等过程。
（2）在“试管牛”的培育过程中，要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行处理，使其＿＿。另外，培养的卵母细胞需要发育至减数第二次分裂的中期，该时期在显微镜下可观察到次级卵母细胞和＿＿＿＿＿。
（3）通常奶牛每次排出一枚卵母细胞，采用激素处理可使其一次排出多枚卵母细胞，常使用的激素是＿＿
（4）利用基因工程可以获得转基因牛，从而改良奶牛的某些性状。基因工程的四个基本操作步骤是＿＿、基因表达载体的构建、＿＿＿和＿＿＿。若要获得的转基因牛分泌的乳汁中含有人干扰素，则所构建的基因表达载体必须包括：某种牛乳腺分泌蛋白基因及其启动子、＿＿＿＿、＿＿＿＿、＿＿＿＿和复制原点等。将该基因表达载体导入受体细胞所采用的方法是＿＿＿＿＿（显微注射法、农杆菌转化法），为获得能大量产生人干扰素的转基因牛，该基因表达载体应导入的受体细胞是＿＿＿＿＿（受精卵、乳腺细胞）。
当卵细胞达到（ ）时期时，才具备与精子受精的能力
| A．减数第二次分裂后期 |
| B．减数第一次分裂末期 |
| C．减数第二次分裂中期 |
| D．减数第二次分裂结束成熟 |
组织型纤溶酶原激活剂（tPA）在人体纤溶和凝血的平衡调节中发挥着关键性的作用，如图是利用奶牛乳汁生产组织型纤溶酶原激活剂（tPA）的图解，据图回答下列问题：
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（1）过程①在构建的基因表达载体中，应将tPA基因首端与 基因的启动子等调控组件结合，③过程常用的方法是 。
（2）要获得单个成纤维细胞，过程②需用 处理奶牛胎儿皮肤组织块。在单个组织细胞的培养过程中，为了防止杂菌污染，通常还要在细胞培养液中添加一定量的 。阅读如下材料：
材料甲：科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵在，得到了体型巨大的“超级小鼠”；科学家采用农杆菌转化法培育出转基因烟草。
材料乙：T4溶菌酶在温度较高时易失去活性，科学家对编码T4溶菌酶的基因进行改造，使其表达的T4溶菌酶的第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸，在该半胱氨酸与第97为的半胱氨酸之间形成了一个二硫键，提高了T4溶菌酶的耐热性。
材料丙：兔甲和兔乙是同一物种的两个雌性个体，科学家将兔甲受精卵发育成的胚胎移植到兔乙的体内，成功产出兔甲的后代，证实了同一物种的胚胎可在不同个体的体内发育。
回答下列问题：
（1）材料甲属于基因工程的范畴。将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用 法。构建基因表达载体常用的工具酶有 和 。在培育转基因植物是，常用农杆菌转化发，农杆菌的作用是 。
（2）材料乙属于 工程范畴。该工程是指以分子生物学相关理论为基础，通过基因修饰或基因合成，对 进行改造，或制造制造一种 的技术。在该实例中，引起T4溶菌酶空间结构改变的原因是组成该酶肽链的 序列发生了改变。
（3）材料丙属于胚胎工程的范畴。胚胎移植是指将获得的早期胚胎移植到 种的、生理状况相同的另一个雌性动物体内，使之继续发育成新个体的技术。在资料丙的实例中，兔甲称为 体，兔乙称为 体。
长期以来，优良种畜的繁殖速度始终是限制畜牧养殖业发展的瓶颈，近年来发展起来的细胞工程和胚胎工程技术为优良种畜的快速繁殖带来了无限生机，请据图完成下列问题：
（1）在试管牛和克隆羊的培育过程中都必须用到的生物技术有____________（答两种技术）。
（2）从哺乳动物早期胚胎或原始性腺中分离出来的细胞，称为ES或EK细胞。这类细胞的形态特征有________________________________________。
（3）克隆羊多利的性状和______________（黑面绵羊＼白面绵羊）最接近。
（4）超数排卵技术的处理措施是对供体母牛注射_____________；冲卵实质上是用特定装置，将供体母牛子宫内的________________冲洗出来。
（5）从A到E中，适宜于牛的胚胎移植时期有_______________（填字母）。
（6）动物的早期胚胎移植到同种且_____________与供体相同的动物体内，使之继续发育为新个体的技术叫做胚胎移植。用某染料鉴定胚胎细胞是否为活细胞时，发现活胚胎细胞不能被染色，其原因是活细胞膜对物质的吸收具有_____________。
下图表示应用现代生物技术制备H7N9病毒单克隆抗体的流程。回答下列问题：
（1）①过程表示______________；②过程用到的工具酶是________________。
（2）构建基因表达载体时，目的基因的首端必须含有 ，以利于目的基因的表达。③过程常用的方法是 。
（3）从分子水平上鉴定目的基因是否转录可采用_____________技术。
（4）细胞Ⅱ的特点是 。
（5）若要预防H7N9禽流感，可用图中的________________作为疫苗。
（6）传统农业中，植物秸秆往往是通过焚烧以便使其中的无机盐还田，该做法的最大缺点是会造成环境污染；而现代农业中，在充分利用能量、减少环境污染的同时，通过饲养家禽、家畜，提高农民经济收入，使保护环境和发展经济相互协调，这主要体现了生态工程的________________原理。
[生物—选修3：现代生物科技专题]
治疗性克隆的最终目的是用于干细胞治疗，而非得到克隆个体，下图所示为人类“治疗性克隆”的大概过程，请据图作答。
（1）过程A表示 ，是目前实现体细胞克隆的关键技术，正常情况下，细胞①采用 期的卵母细胞。
（2）C表示定向诱导技术，其诱导的对象是从[ ] 分离出来的胚胎干细胞。（[ ]内填数字，______填名称）
（3）使用培养基进行胚胎干细胞培养时，通常要加入 等天然成分。
（4）在培养过程中，必须用 处理，使细胞分散。
（5）在体外培养条件下， 为维持胚胎干细胞的不分化状态，通常在培养皿中铺上一层 细胞，或在培养液中添加抑制因子。
（6）按上述方法克隆的器官在移植方面的主要优点是 。
（7）若将上述技术用于白血病人的骨髓移植，且图中患者是A型血（IAi），提供卵细胞的女性是AB 型血（IAIB）的，则骨髓移植成功后患者的血型是 型。
［生物——选修3：现代生物科技专题］（15分，除注明外，每空2分）
根据所学知识回答问题：
（1）基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤，其中的核心步骤是 。
（2）若要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的 中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的 中，植物组织培养的主要原理是植物细胞具有 ，具体过程是在 和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞培养在人工配制的培养基上，给予适宜的条件，诱导其经过 产生愈伤组织，最终形成完整的植株。
（3）在哺乳动物的核移植实验中，通过一定的措施将受体细胞激活，使其进行细胞分裂和发育，当胚胎发育到 阶段时，将胚胎移入受体（代孕）动物体内。
（4）生态工程是实现循环经济最重要的手段之一，请写出它遵循的基本原理（至少答两项） 。
【生物——选修3：现代生物科技专题】下图是将目的基因导入动物细胞，培育转基因动物的常用操作程序。根据图示过程和所学知识，将下面操作程序补充完整。
（1）构建基因表达载体：在构建基因表达载体时常要用到 两种工具酶。如果目的基因要在乳腺细胞中表达，基因表达载体构建时要将目的基因与 的启动子、标记基因和终止子等组件重组在一起，其中标记基因的作用是 。
（2）获得足够数量的受精卵：为了获得足够数量的受精卵，先利用 刺激数排卵。雌鼠经过交配，将受精卵从输卵管中取出。
（3）将目的基因导入细胞：通常采用 技术将目的基因导入受精卵。
（4）早期胚胎培养：早期胚胎培养的培养液成分一般比较复杂，除一些无机盐和有机盐外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及 等物质。当胚胎培养到适宜的阶段时，可进行胚胎移植。
（5）胚胎移植：在胚胎移植前要对接受胚胎的受体进行 处理。移植后，还要对受体雌鼠进行妊娠检查。
（6）转基因鼠的检测：经过一段时间妊娠后，产下一群小鼠，为了检测哪些是转基因鼠，可以用 作探针，进行DNA分子杂交检测。
现有A和B两个肉牛品种。要获得一头克隆牛，使其细胞主要由A细胞核和B细胞质组成:
（1）获得克隆牛的基本步骤是：从_________牛体内取出体细胞，进行体外培养。然后将供体细胞注入B品种牛的___________________时期去核卵母细胞，经过某种刺激和培养后，可形成重组胚胎胚胎，将该胚胎移入代孕母牛的子宫中，通过培育可达到目的。
（2）一般来说，要想大量获得克隆牛比较难，为解决这一问题，可以用_____________激素处理B品种母牛促使其___________。如果想获得更多相同的克隆牛，可将收集到的胚胎进行______________，一般会选取 时期的胚胎，这样得到的小牛其性别相同。
为了加快优良种牛的繁殖速度，科学家采用了以下两种方法,请根据图示信息回答：
（1）试管牛和克隆牛的培育过程中均用到的胚胎工程技术有 。
（2）E牛的性别是 。
（3）产生F牛的理论依据是 ，其生殖方式属于 。
（4）要培育高产奶率的转基因牛，则目的基因的受体细胞一般是 。转基因牛乳腺细胞中含有较多的参与分泌物加工的 等细胞器。
15分（选修三）请回答有关下图的问题：
（1）图甲中①～⑤所示的生物工程为__________。
（2）如图乙，一个基因表达载体的组成，除了目的基因外，在基因尾端还必须有[2]________；图中[3]________的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。
（3）若预期蛋白质欲通过乳腺生物反应器生产，则构建基因表达载体时，图乙中序号[1]代表的是_________；且在图甲中⑨过程之前，要对精子进行筛选，保留含性染色体________的精子。
（4）为获得较多的受精卵进行研究，图甲中⑥过程一般用激素对供体做________处理；为提高培育成功率，进行⑩过程之前，要对________动物做________处理。若图甲中的卵母细胞来自从屠宰场收集的卵巢，则其在⑧之前需进行体外培养到________期方能受精。
胚胎工程的许多技术，实际是在体外条件下，对动物自然受精和早期胚胎发育条件进行的模拟操作。请根据动物受精和早期胚胎发育过程回答下列问题：
（1）在动物体内卵子的发生过程中，减数第一次分裂完成的时间是在雌性个体 ，当次级卵母细胞发育到 时期时才具备与精子受精的能力，受精的场所是 ，判断卵子是否受精的重要标志是____ 。
（2）受精过程中防止多精入卵的两道屏障是____ 和 。
（3）胚胎发育过程首先是卵裂，所得每个子细胞的体积比受精卵___ _，胚胎发育到 期会导致透明带破裂，胚胎从中伸展出来，这一过程叫做孵化。
（4）胚胎干细胞是由囊胚的____ 或 中分离出来的一类细胞，在人类疾病治疗和科学研究中有着广泛的应用。
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