随着人们生活水平的提高，乳制品需求越来越大，为了扩大生产，提高产崽率，要进行良种牛的培育。下图为胚胎移植的基本程序及早期胚胎发育过程，请据图回答：
(1)用________激素处理使供，受体母牛同期发情。
(2)冲卵实质上是用特定装置将供体母牛子宫内的________冲洗出来。
(3)从A到E中，适宜于牛的胚胎移植时期有________。
(4)图中标号3为________，它将来发育为胎膜和胎盘。
(5)若一次给受体母牛移入多个胚胎，产生的多个后代基因型相同吗？为什么？
________________________________________________________________________。
(6)若对A细胞利用基因工程技术加以改造，将人的血清白蛋白基因导入，在成体的雌牛的乳汁中提取出人血清白蛋白。该基因工程操作的基本步骤是
________________________________________________________________________。
(7)对于植物来说，导入外源基因，容易引起基因污染，科学家就将外源基因导入叶绿体或线粒体内，原因是________________________________________________________________________。
牛胚胎移植的基本程序如下图，请据图回答：
(1)图中a、b、c过程分别是指__________、____________、______________。
(2)供体牛的主要职能是___________；受体母牛必须具备_____________。
(3)为了提高牛胚胎的利用率，常采取的方法是______；处理的时期是________；理由是____________________________。
(4)从哺乳动物早期胚胎或原始性腺中分离出来的细胞，称为ES或EK细胞。这类细胞的形态特征有________________________________________。
(5)你认为胚胎移植技术在生产实践中的主要意义有哪些？
_____________________________________________。
慢性病人常出现白蛋白值偏低的状况（ 比如慢性肝病、慢性肾病、肿瘤等），缺乏白蛋白人就容易出现浮肿。人体的白蛋白正常值在每100ml血液中含有3．8～4．8克，如果比正常值低很多时就需要注射人血白蛋白，所以临床上对白蛋白需求量很大。下图是利用崂山奶山羊乳腺生物反应器制备药用白蛋白的流程图：
(1)要实现①超数排卵，应在崂山奶山羊A发情周期的某一阶段用 处理，然后在恰当时期采集卵子。通过②采集的精子不能直接使成熟的卵子受精，要对精子进行获能处理，对羊的精子常用化学诱导法，即用一定浓度的 诱导精子获能。
(2)若我们已知白蛋白基因的碱基序列，一般采用 获取目的基因。要使人的白蛋白基因在奶山羊乳腺细胞中特异性表达，完整的基因表达载体要包括目的基因、 、 、标记基因等部分。
(3)过程④需将重组质粒用 方法注入受精卵的雄原核内，在显微镜下判断是否完成受精作用的标志是 。
(4)对移植前的胚胎进行性别鉴定时，宜取囊胚期的 细胞进行鉴定，一般采用SRY-PCR方法，选择出现阴性反应的 （性别）胚胎进行移植。
（5）为了使胚胎移植能成功，需要对代孕奶山羊C进行 处理，使之与供体的生理状况保持相同。
回答下列有关生物工程技术问题。
（1）在植物基因工程中，构建重组Ti质粒时，通常要用 分别切割
和 ，再用 进行连接。
（2）体内受精作用进行时防止多精入卵的机制有 和 。
（3）动物细胞体外培养时，要保证被培养的细胞处于 的环境，在营养方面通常需要在培养基中加入 等天然成分。细胞培养需在适宜的理化条件下进行，此外还需要一定的气体环境，其中C02的主要作用是 。
下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性基因，BamH Ⅰ、Hind Ⅲ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。
据图回答：
(1)图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用________限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含____________的培养基上进行。
(2)能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是________(填字母代号)。
A．启动子 B．tetR C．复制原点 D．ampR
(3)对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体。这利用了细胞的________性。
(4)为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用________(填字母代号)技术。
A．核酸分子杂交 B．基因序列分析
C．抗原—抗体杂交 D．PCR
控制哺乳动物的性别对于畜牧生产有着十分重要的意义。目前，分离精子技术是有效的性别控制方法。
根据以上信息据图回答下列相关问题。
(1)左图中过程①中___ __的精子与卵子相遇时，首先发生__ ___反应释放出有关的酶直接溶解卵丘细胞之间的物质。体外受精的受精溶液是模拟 中的液体环境。
(2)试管动物技术和母亲正常怀孕生产过程的相同点是____________________ ____，不同点在于试管动物是___ _____、胚胎移植的产物。
(3)目前在生产中应用较多的胚胎工程技术是早期胚胎培养、_____ ___和____ ____。
（4）人们利用试管动物技术成功培育了转基因动物。在基因工程操作的基本程序中，基因工程的核心是______________________，右图为逆转录病毒载体的结构图。图上的“逆转录病毒序 ”可以整合到动物细胞的染色体上（E、F、H分别为限制酶E、F、H的酶切位点）。
①在构建重组质粒时，目的基因插入该质粒，此过程需要的酶是限制酶___和DNA连接酶。
②为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加__ ___的培养基进行培养。
③获取转基因小鼠后，若已知目的基因进人细胞后插入在一条染色体DNA上，那么获得转基因纯合子小鼠的方法是______ ____。
I、人类疾病的转基因动物模型常用于致病机理的探讨及治疗药物的筛选。利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因模型大鼠的流程如下图1所示，请据图作答：
（1）卵母细胞除从活体输卵管中采集外，还可从已处死雌鼠的 中获取。
（2）图中的高血压相关基因作为 ，质粒作为 ，二者需用 切割后连接成重组载体，该过程与质粒上含有 有关。
（3）子代大鼠如果 和 ，即可分别在分子水平和个体水平上说明高血压相关基因已成功表达，然后可用其建立高血压转基因动物模型。
II、上图2是某科学家利用小鼠纤维母细胞等获得单克隆抗体的实验研究过程。请据图回答：
（1）①过程类似于植物组织培养技术中的 过程。②过程的实质是_ ______。
（2）③过程中需用到的生物诱导方法是 。
（3）④处需要筛选，其目的是 。
供体器官的短缺和排斥反应是制约器官移植的两个重要问题。如何利用现代生物科学技术解决这一难题成为热点问题。下图是治疗性克隆的过程图解。
(1)自体移植供受体为同一个体，最大的优点是 ，但移植器官种类受限。利用细胞工程技术的治疗性克隆，重组细胞培养时除了保证无菌、无毒环境，还需丰富的营养，通常会在培养液中加入 等天然成分。核移植的胚胎干细胞通常只分裂不分化，所以需在培养液中加入 诱导形成相应的组织、器官后用于移植。
(2)重组细胞发育的过程中，细胞开始分化发生在① 期，若想获得基因型完全相同的两个胚胎，采用 技术，并且要注意对② 进行均等分割。与试管婴儿不同的是该技术属于 (有性／无性)生殖。
(3)目前临床器官移植多为同种异体移植，患者需要长期服用 预防排斥反应。为了扩大器官供体的来源，人们尝试异种移植，试图利用基因工程手段 抗原决定基因，再利用克隆技术培育出没有免疫排斥反应的猪器官，从而解决供体短缺问题。获得该转基因猪的核心步骤 。
如图表示改造哺乳动物遗传特性的三种途径。根据图示回答下列问题
（1）甲、乙、丙过程共利用的技术手段有 。乙途径将外源基因导入的受体细胞最可能是 细胞，利用该细胞的 ，植入到 (填“内细胞团”、“滋养层细胞”或“透明带细胞”)中；动物2 细胞各体细胞的基因种类 (相同或不相同)。
(2)甲途径的受体细胞通常最可能为受精卵，利用该细胞的 特性。
(3)将外源基因导入到受体细胞最可能整合到细胞的 结构上，利用卵细胞含有
的物质和丰富的 物质而作为受体细胞。
（4）基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外 和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性的技术。
胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下（供体和受体之间）空间位置的置换；胚胎移植的优势是充分发挥雌性优良个体的繁殖潜能。胚胎移植过程中两次使用激素，第一次常用 ，目的是同期发情处理，作用对象是 ，第二次使用 ，目的是做超数排卵处理，作用对象是 。
第三十届奥运会在英国伦敦举行，其中的马术比赛被称为贵族的运动，英国纯血马是世界顶级马术比赛的常用马种，其数量少，生育力低。现代生物工程能有效提高优质马的生育效率。请回答：
（1）用 激素处理适龄纯血母马，使其一次性排出比自然情况下多几倍到几十倍的卵子。采集的卵母细胞人工培育至减数第二次分裂的中期，该时期在显微镜下可观察到次级卵母细胞和_____________。
（2）体外受精前要对精子进行一定的处理，使其 .
（3）为取得同卵双胎或多胎，可以在胚胎发育的 期用机械方法将胚胎分割。
（4）随着动物克隆技术的发展，人们可以将纯血马的 移入其他马的 细胞中，将其激活并发育成胚胎，植入代孕母马体内。为保证胚胎移植的成功，胚胎的供体和受体应保持 .
（5）克隆技术在带来巨大社会效益和经济效益的同时，也对人们的传统观念造成极大冲击，我国政府的态度是禁止 性克隆人。
（6）把含有某外源基因的受体细胞培育成为一匹优质马还需要用到的技术有： 。（至少写出两种）
科学家将四种遗传基因导入皮肤细胞，发现皮肤细胞可转化为具有胚胎干细胞特性的细胞即诱导多能干细胞(iPS)。回答下列问题：
(1)哺乳动物的胚胎干细胞是由早期胚胎或_______________中分离出来的一类细胞，在功能上具有发育的____________。
(2)在培养iPS的培养液中加入_______________，可以诱导iPS分化成不同的组织和器官，解决器官移植中的______________和_____________两大难题。
(3)将四种遗传基因导入皮肤细胞需要用到的工具酶有______________________。iPS的形成说明导入的四种遗传基因能够影响皮肤细胞中基因的________。皮肤细胞能够被诱导形成iPS，是因为皮肤细胞具有______________________________________
一对表现正常的夫妇，其家族中都有遗传性囊性纤维化病（常染色体隐性遗传病）患者。医生对他们进行了遗传咨询后，决定运用试管婴儿的方法实现他们的优生愿望。医生首先为女性注射 ，刺激卵泡成长，实现控制性超数排卵，然后在局部麻醉下从卵巢中吸取 ，并在显微镜下将其移到含特殊培养液的培养皿中，置于37℃培养箱中培养。再从男性体内采集精子经过 处理，其方法通常采用 和 。处理后的精子与卵子放在含有 的同一培养皿中完成 。然后将受精卵移入发育培养液中继续培养，检查 和发育能力，待发育到桑葚胚或囊胚时，分别对多个胚胎的细胞进行 ，选择出 的胚胎植入母亲 内，避免遗传病孩子出生。除上述方法外，利
用 作载体,将正常基因转入有上述遗传病患者的肺组织中，达到治疗目的的方法叫做 （体外，体内）基因治疗。
赖氨酸是人体必需氨基酸之一，可促进人体发育、增强免疫功能。下图为赖氨酸转基因克隆牛的培育流程，其中字母表示相应的操作过程。请回答：
（1）进行a操作前需要_____________，目的是___________________________________。
（2）为了获得较多的卵母细胞需要对供体注射________，卵母细胞要培养至_______期，理由是______。
（3）卵母细胞培养过程中会出现接触抑制，为使其继续增殖需要用胰蛋白酶处理，目的是__________ 。
（4）b过程的原理是_______________，d过程的实质是_____________________________。
（5）某位同学欲验证赖氨酸也是大鼠的必需氨基酸，他取一定量的不含蛋白质和氨基酸的食物，加入一定含量的赖氨酸，配成食物A；另取等量的不含蛋白质和氨基酸的食物，配成食物B来饲喂正常幼年大鼠，你认为该同学的方案可行吗?若有错误，请予以纠正。
_______________________；_______________________________________________。
自然情况下，牛的生育率很低，通过现代科技手段，可以实现良种牛的快速繁殖。请按照提示，回答下列问题：
（1）使一头良种雄性黄牛，在一年内繁殖数百头后代，最简便的方法是 。
（2）现有一头良种雌性黄牛，采用胚胎移植的方法，可使这头良种牛一年生下数十头自己的后代。其操作过程中需要用激素对该良种母牛（供体）和代孕母牛（受体）进行 处理；还要用激素使供体母牛 。胚胎收集的过程也叫做 。用于移植的胚胎应发育到 或 阶段。
（3）采用试管动物技术还可以使普通雌性黄牛产下奶牛、良种肉牛等不同品种小牛。该技术中首先要做的是体外受精和 。体外受精主要包括 、 和受精等几个主要步骤。
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