犬细小病毒(Canine Parvovirus,CPV)主要感染幼犬,传染性极强,死亡率极高。犬细小病毒单克隆抗体(CPV McAb)可抑制病毒对宿主细胞的侵染及病毒的复制,进而杀灭犬体内病毒。请回答下列问题:
(1)在单克隆抗体CPV McAb的制备过程中,所用到的细胞工程技术有 和 。
(2)将经免疫处理后的犬的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,获得能分泌CPV McAb的杂交瘤细胞的过程中至少要进行两次筛选,一次是通过 培养基筛选出杂交瘤细胞,另一次是通过 检测筛选出能分泌CPV McAb的杂交瘤细胞。
(3)诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合最常用的方法是 ;对杂交细胞进行培养时,需要 的环境,及营养、温度、pH和 环境适宜的条件。
(4)通过上述方法得到的单克隆抗体可快速准确地识别CPV,其原因是该抗体具有 的特点。
现有A和B两个肉牛品种，A品种牛的细胞组成可表示为A细胞核、A细胞质，B品种牛则为B细胞核、B细胞质。
（1）如果要获得一头克隆牛，使其细胞由A细胞核和B细胞质组成，基本步骤是：从A品种牛体内取出体细胞，进行体外培养。然后再从培养细胞中取出 注入B品种牛的 卵母细胞，经过某处刺激和培养后，可形成胚胎，该胚胎被称为 ，将该胚胎移入代孕母牛的 中，通过培育可达到目的。
（2）一般来说，要想大量获得这种克隆牛比较难，原因之一是卵母细胞的数量 ，为解决这一问题，可以用 激素处理B品种母牛。
（3）克隆牛的产生说明 具有全能性。克隆牛的性状主要表现 品种牛的特征。由A、B两品种杂交得到的牛与克隆牛相比，杂交牛细胞核的遗传物质来自 个亲本，细胞质来自 性亲本，克隆牛和杂交牛的遗传物质组成 （相同，不同）。
为加快优良种牛的繁殖速度，科学家采用了以下两种方法：请据图的信息回答：
（1）试管牛与克隆牛的培育过程中均用到的生物工程技术有 （至少答出两项）。
（2）用来促进B牛多排卵的激素是 分泌的促性腺激素，E牛的性别是 。
（3）产生F牛的生殖方式属于 。
（4）要培养高产奶率的转基因牛，一般将目的基因导入的受体细胞是 ；导入常用 法；如果要获得能表达出人干扰素（一种淋巴因子）的目的基因，则需要从人体的哪种细胞中获得？ 。
（共9分，每空1分）回答下列有关动物细胞培养的问题：
（1）在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的 。此时，瓶壁上形成单层细胞，这种单层培养法的出现，对细胞培养的发展起了很大的推动作用。
（2）随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，但极少数细胞克服细胞寿命的自然极限，获得 ，朝着等同于癌细胞的方向发展，该种细胞由于细胞膜上 减少，导致细胞间的黏着性 。
（3）在动物细胞体外培养过程中，一般要满足四个方面的条件：无菌、无毒的环境、营养、温度和pH和气体环境，其中在培养液中添加 ，以防培养过程中的污染；由于人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚，故在使用合成培养基时，通常需加入 等天然成分；气体环境主要是提供细胞所需的O2和CO2，其中O2的作用是 ，CO2的作用是 。
（4）动物细胞培养可用于检测某种物质的毒性大小，若用被检测物质培养的细胞与对照组相比，发生变异的细胞数目所占的百分比大，则该物质的毒性大，判断的依据是 。
（现代生物技术15 分）阅读如下资料：
资料甲：科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵中，得到了体型巨大的“超级小鼠”；科学家用农杆菌转化法培育出了转基因烟草。
资料乙：T4 溶菌酶在温度较高时容易失去活性。科学家对编码T4 溶菌酶的基因进行了改造，使其表达的T4 溶菌酶第3 位的异亮氨酸变为半胱氨酸，在该半胱氨酸与第97 位的半胱氨酸之间形成一个二硫键，提高了T4 溶菌酶的耐热性。
资料丙：植物甲、乙是染色体数目相同的两种二倍体药用植物，甲含有效成分A，乙含有效成分B。某研究小组拟培育同时含有A 和B 的新型药用植物。回答下列问题：
（1）资料甲属于基因工程范畴，将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用的方法是____________ 。构建基因表达载体常用的工具酶是____________ 和____________ 。在培养有些转基因植物时，常用农杆菌转化法，农杆菌的作用是______________________________ 。
（2）资料乙中的技术属于____________ 工程的范畴，该工程是以分子生物学相关理论为基础，通过____________或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种____________ 的技术。在该实例中，引起T4 溶菌酶空间结构改变的原因是组成该酶的肽链的____________ 序列发生了改变。
（3）资料丙属于细胞工程范畴。为了培育该新型药用植物，可取甲和乙的叶片，先用酶去除细胞壁，再用化学诱导剂诱导二者融合，形成的融合细胞进一步培养形成完整的杂种植株。这种培育技术称为_________。这种杂种植株也可通过制作人工种子的方法来大量繁殖。经植物组织培养得到的____________________等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子。
下图是利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病（基因缺陷导致胰岛B细胞不能正常合成胰岛素）的过程设计图解。请据图回答：
（1）图中①、②所示的结构分别是___________________、___________________。
（2）图中③、④所示的生物工程技术分别是 、 。
（3）过程③通常用去核卵细胞作受体细胞的原因除了它体积大、易操作，含有营养物质丰富外，还因为 。
（4）过程④通常采用的方法是
（5）过程④的完成需要用到的非酶基因操作工具为
（6）图示方法与一般的异体移植相比最大的优点是 .
下图所示为人类“治疗性克隆”的大概过程，请据图作答。
(1)过程A表示 ，是目前实现体细胞克隆的关键技术，该技术的主要操作是应用患者的体细胞作为核供体，由① 细胞提供细胞质，进行人工重组。
(2)经过程B得到的结构中，④是未分化的细胞，因而这些细胞被认为是胚胎干细胞。在体外培养条件下，胚胎干细胞具有增殖能力并保持 状态。自然状况下的胚胎干细胞是由哺乳动物的早期胚胎或 中分离出来的一类细胞。胚胎干细胞在形态上表现为体积小，细胞核大， 明显，在功能上具有 。
(3)“治疗性克隆”的结果说明高度分化的体细胞核 。相同的胚胎干细胞，“克隆”的结果各种各样，如有的是神经细胞，有的是血细胞，有的是肌肉细胞，究其本质原因是 的结果。
(4)对于“治疗性克隆”仍然存在许多争论，有一男子患有白血病，后经医生利用其出生时保留的脐带血进行治疗后康复，你认为这种做法符合伦理道德吗？为什么？
【生物—选修3：现代生物科技专题】
动物细胞培养是动物细胞工程的基础，如图所示，a,b,c 代表动物细胞工程的几项技术①②③依次表示其结果。据图回答
（1）若a是核移植技术，①的产生反映了
（2）若b是体外受精技术，则必须对精子用一定浓度的化学药物进行 处理；所用的化学药品是 或钙离子载体A23187溶液。并且b获得的受精卵 （填可或不可）直接用于胚胎移植；如果选择牛的含X染色体 的精子进行人工授精，生产②牛的目的是 。
（3）若c是胚胎分割技术，为了提高胚胎的利用率进行胚胎分割时要平均分割的是 .否则会影响 ， 一般情况下③中个体的基因型和表现型 。
（4）按照a是核移植技术，b是体外受精技术，c是胚胎分割技术，则①②③属于
无性生殖的是 。
阅读如下资料：
资料甲：科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵中，得到了体型巨大的“超级小鼠”。
资料乙：科学家通过对鼠和人控制抗体产生的基因进行拼接，实现了对鼠源杂交瘤抗体的改造，生产出对人体的不良反应减少、效果更好的鼠—人嵌合抗体，用于癌症治疗。
回答下列问题：
（1）资料甲属于基因工程的范畴。构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生黏性末端，也可能产生______末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生______ (相同、不同)黏性末端的限制酶。
（2）构建的表达载体含有牛生长激素基因及其启动子等，其中启动子的作用是_________。将基因表达载体导入小鼠受精卵内常用______法。
（3）资料乙属于基因工程和细胞工程的范畴。鼠源杂交瘤抗体就是从免疫小鼠的脾脏细胞中获取B淋巴细胞，在诱导剂的作用下与______融合，形成______细胞，并通过体内培养或体外培养生产单克隆抗体。这种抗体与普通血清抗体相比较，最主要的优点在于______，可大量制备。
（4）与植物原生质体的融合相比，动物细胞融合在诱导融合方法方面的主要区别是还常用______诱导融合。
(11分)下图是植物组织培养的简略表示。
据此回答：脱分化 再分化①——→②——→③——→④
（1）①表示 _ __，它能被培养成为④的根本原因是 。
（2）②表示 ，它与①相比分化程度 ，全能性 。
（3）若想制作人工种子，应该选用（填编号） 。
（4）若①是花药，则④是_________________，继续对其使用 处理可获得 正常植株，该过程称为________________________________。
（5）若利用此项技术制造治疗烫伤、割伤的药物——紫草素，培养将进行到（填编号） 。
下图是利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病（基因缺陷导致胰岛B细胞不能正常合成胰岛索）的过程设计图解，请回答：
(1)此种治疗方法应属于____治疗。
(2)图中③、④所示的生物工程技术分别是____和____。上图呈现的过程还应用了____、____（至步答两种）生物工程技术手段。
(3)图中①、②所示的结构分别是____、____。
(4)过程③通常用去卵细胞作受体细胞的原因除了它体积大、易操作外，还因为_______；过程④通常用②做受体细胞的原因是________;过程④的完成需要用到的基因操作工具有____。
(5)图示方法与一般的异体移植相比最大的优点是____。
(6)除图中所用的方法外，治疗遗传性糖尿病的方法还有____。
图1和图2分别表示两种获取胚胎干细胞的途径。图1表示的是科学家把4个与胚胎发育相关的特异性基因导入成年小鼠细胞，培养出了诱导多潜能干细胞，称为iPS细胞，类似于胚胎干细胞样细胞，再将iPS细胞转入小鼠乙体内培养，结果如图所示。图2表示研究人员利用小鼠（2N="40)" 获取单倍体胚胎干细胞的一种方法，哺乳动物单倍体胚胎干细胞技术是遗传学研究的新手段。请分析并回答下列问题：
（1）图1过程中，通常选择传代培养 代以内的成纤维细胞导入特异性基因；成纤维细胞转变为iPS细胞，类似于植物组织培养中的 过程。
（2）克隆培养iPS细胞时，需要加入一定量的 ，以防止杂菌污染。早期研究发现在 iPS 细胞诱导培养的过程中会出现大量不具备干细胞功能的细胞，若用维生素C处理，能显著提高iPS细胞的诱导成功率，推测其原因是 。
（3）研究人员将iPS细胞团注射入缺乏T细胞的小鼠体内，细胞团能继续生长。由此可推测图1中iPS细胞团逐渐退化的原因是 。
（4）图2中，研究人员需要对实验小鼠丙注射促性腺激素使其 ，从而获得更多的卵母细胞，再利用SrC12溶液处理、激活卵母细胞，并在体外培养至［④］ 期，再利用流式细胞仪筛选出单倍体细胞。
（5）研究发现，单倍体胚胎干细胞也能分化，形成不同功能的细胞、组织和器官，该技术培育的单倍体动物可成为研究 （填“显性”或“隐性”）基因功能的理想细胞模型。
下图是单克隆抗体制备过程示意图，请据图分析回答问题：
（1）图中A过程之前需进行的操作是 。
（2）图中B过程常用 、聚乙二醇或电激等诱导完成。
（3）用于大规模培养的“细胞X”的名称是 细胞，其特点是既能 ，又能产生 。
（4）根据物理性质分类，图中体外培养所用的培养基类型为 。若为合成培养基，为满足营养需要，往往还需要加入 。
（5）图示表明，制备单克隆抗体是动物细胞工程中 技术的重要应用。
（6）单克隆抗体的用途有 等。
为治疗某种遗传性糖尿病，研究人员完成如下工作。
（1）图1中①是取自患者体细胞的________，过程②表示________技术。
（2）图1中过程③表示________技术，此过程需要用到的工具是________________。
（3）为检测胰岛样细胞是否具有胰岛B细胞的正常生理功能，研究人员分别控制甲、乙两组培养液中__________的浓度，将胰岛样细胞先后放在甲、乙两组培养液中，保温相同时间后检测胰岛素的分泌量。若诱导成功，则图2中甲组应为______________情况下测得的胰岛素分泌量，理由是_______________。
（选修三模块）人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原。疫苗生产和抗体制备的流程如下图：
（1）过程①代表的是 ，过程③构建A基因重组载体时，启动子和终止子是重新构建的，其应该能被受体细胞的 所识别，以便于其转录。
（2）在将X进行扩大培养之前，至少需要经过两次筛选，方法分别是用 和 。
（3）以实验操作过程中用到的技术有 （至少写三个）。
（4）在给小鼠皮下注射A蛋白时，要重复注射几次的目的是 。
（5）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的 来制备疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可以从疑似患者体内分离出病毒与已知病毒进行核酸序列比较，或用图中的 与分离出的病毒进行特异性检测。
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