十九世纪中期，法国科学家巴斯德证明食品发酵是由于微生物的作用。如今，形形色色的发酵食品在食品业中占有重要的地位。回答下列与微生物发酵、培养相关的问题：
（1）苹果酒清香、明快，风味清爽，它是由果汁发酵产生的。果汁发酵后是否有酒精产生，可用______________ 来检验。
（2）严格控制发酵条件是保证发酵正常进行的关键，这直接关系到是否能得到质量高、产量多的理想产物， 通常所指的发酵条件不包括 。
| A．温度控制 | B．溶氧控制 | C．pH控制 | D．酶的控制 |
（3）苹果酒在 的作用下，经过深层发酵可形成苹果醋；在此过程中要适时向发酵液中充气，原因是 。
（4）腐乳是用豆腐发酵制成，有多种微生物参与发酵，其中起主要作用的是 。在腐乳的制作过程中，从微生物培养的角度来看，豆腐应该属于 。
（5）在充足的碳源、氮源、无机盐和水的条件下，乳酸菌仍然不能正常生长，还需要在培养基中添加 。应用平板划线法分离乳酸菌时，从第二次划线操作起，每次总是要从上一次划线的末端开始划线，并划线数次，其原因是 。
（9分)尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌(目的菌)。培养基
成分如下表所示，实验步骤如图所示。请分析回答问题：
| KH2PO4 |
1.4 g |
| Na2HPO4 |
2.1 g |
| MgSO4·7H2O |
0.2 g |
| 葡萄糖 |
10 g |
| 尿素 |
1 g |
| 琼脂 |
15 g |
| 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL |
(1)此培养基能否用于植物组织培养？________，理由是 。
(2)培养基中加入尿素的目的是筛选________，这种培养基属于________培养基。
(3)“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的________和________，实验
需要振荡培养，原因是________________。
(4)转为固体培养时，常采用________的方法接种，获得单菌落后继续筛选。
(5) 在进行分离分解尿素的细菌的实验时，A同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有_____(填序号)。
①由于土样不同 ②由于培养基污染 ③由于操作失误 ④没有设置对照
(6) 简述土壤中可分解尿素的细菌的鉴定方法及原理：____________________________
_____________________________________________________________________。
近年来，茶饮料作为饮料新品种，以其快捷、方便、风味独特而迅速发展，请回答：
(1)红茶菌液是一种传统的活菌饮料，制作流程是制作红茶糖液—接种红茶菌种—发酵红茶菌液。红茶菌种是酵母菌、醋酸菌和乳酸菌的共同体，可以用 法分离纯化得到不同的菌种。在接种活菌之前，红茶糖液要先煮沸后冷却，煮沸和冷却的目的分别是为了 、 。
（2）很多商家在茶饮料中添加人工合成的色素、香精等添加剂，可能危害人体健康，人们更喜欢从植物中提取的天然成分，常用 法提取胡萝卜素， 法提取玫瑰精油。提取的胡萝卜素可通过 法进一步鉴定。
(3)从茶叶中分离提取某种氧化酶，可以用 法，其原理是利用蛋白质分子的大小、形状和 的不同产生不同的迁移速率来进行分离。
急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌、病毒通过消化道进入人体导致的。因此检验饮用水的细菌含量和病毒含量是有效监控疾病发生的必要措施，请回答下列与检验饮用水有关的问题：
(1)检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种方法称为__________。下面四种菌落分布图中，不可能用该方法得到的是________。
(2)用该方法统计样本菌落数时是否需要设置对照组？____ ____，为什么？ ________ _________。
(3)如分别取0.1 mL已稀释103倍的水样分别涂布到三个琼脂固体培养基的表面进行培养，培养基记录到大肠杆菌的菌落数分别为55、56、57，则每升原水样中大肠杆菌数为____________。
(4)已知大肠杆菌能发酵乳糖并产酸产气，现提供足量的已灭菌的乳糖蛋白胨培养液和具塞试管，应如何判断待检水样中是否含有大肠杆菌？ _____________________________。
(5)手足口病的病原体是柯萨奇病毒。如需检测水样中是否有柯萨奇病毒，可以通过检测柯萨奇病毒特有的DNA片段来实现。但是水样中的病毒DNA极少，这时可以通过________技术扩增病毒DNA片段，然后进行检测。采用这种技术进行DNA扩增时，一定需要用到的酶是__________。
饲养动物常用的植物饲料中含有难溶的植酸钙等物质，很难被动物吸收利用，还影响对其他营养物质的利用｡若在饲料中添加植酸酶，则能催化其水解成为可以吸收利用的磷酸盐等｡以下是科研人员从作物根部土壤中分离产植酸酶的菌株的过程示意图｡请分析作答｡
（1）培养基中除了添加 以外，应含有碳源、氮源、水、无机盐等基本营养物质｡
（2）为防止杂菌污染，要对培养基和培养皿等进行 ｡接种后须将培养皿呈 状态放置｡
（3）接种以前要进行的一系列操作，目的是在固体培养基表面形成 ｡根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的 就能大致推测出样品中的活菌数｡通常每种稀释液需涂布 个平板，取其平均值｡若将最后一个试管中的菌液每次吸取0.1mL涂布培养后获得平均值是C，则1g土壤中含有此菌的菌株数是 ｡
（4）若要对上述菌株进行纯化，通常使用的划线工具是 ;接种时，在第一区域划线后须将该工具 后再划线，在第二次划线时须从第一次划线的末端开始，这样做的目的是从上一区域获得菌种。
（5）产植酸酶的菌株会水解植酸钙，菌落的周围将形成透明的区域，根据透明区域的有无，可初步判断该菌是否产植酸酶｡实验结果显示A~E五种菌株中， 是产植酸酶最理想的菌株｡
（每空1分，共9分）有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。回答问题：
（1）在筛选该菌种的过程中，应将土壤样品稀释液接种于以 为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于 培养基。
（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行 处理之后接种，常采用的接种方法有两种，即 。
（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力 。
（4）统计菌落数目，通过统计平板上的菌落数推测活菌数，为保证结果准确，一般选择菌落数在 的平板上计数，但实际活菌数量往往比测得数量 （“多”或“少”），原因是 。若测得的平均值为50，则每克样品中的菌落数是 。（稀释度是105，涂布平板时所用稀释液的体积为0.1mL）。
胡萝卜素是一种常用的食用色素，可分别从胡萝卜或产胡萝卜素的微生物菌体中提取获得，流程如下：
(1)筛选产胡萝卜素的酵母菌R时，可选用________________或平板划线法接种。采用平板划线法接种时需先灼烧接种环，其目的是________________________________________________________。
(2)培养酵母菌R时，培养基中的蔗糖和硝酸盐可分别为酵母菌R的生长提供________________和________________。
(3)从胡萝卜中提取胡萝卜素时，干燥过程应控制好温度和________________以防止胡萝卜素的分解；萃取过程中宜采用________________方式加热以防止温度过高；萃取液浓缩前需进行过滤，其目的是________________。
(4)纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素。鉴定过程中需用胡萝卜素标准品作为__________________________________________________。
（共10分）从自然菌样中筛选较理想生产菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定。
（1）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。培养噬盐菌的菌样应从______________环境采集，培养厌氧菌的菌样应从_____________________采集。
（2）富集培养指创设仅适应于该条件的微生物旺盛生长的特定的环境条件，使待分离微生物在群落中的数量大大增加，从而达到从自然界中分离到所需的特定微生物目的的微生物培养方法。对噬盐菌富集培养的培养基应是___________________培养基；对高温淀粉酶的富集培养应选择_____________________________的培养基，并在__________条件下培养。
（3）实验室最常用的灭菌方法是
利用高温处理达到杀菌的效果。高温灭菌的原理是高温使微生物的_________________等物质发生__________。高压蒸汽灭菌法是微生物研究和教学中应用最广、效果最好的__________灭菌法。
（4）下面两图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，请分析接种的具体方法。
获得图A效果的接种方法是______________________，获得图B效果的接种方法是__________________________。
请回答下列与植物有效成分的提取及微生物相关的问题：
（1）适合玫瑰精油提取的常用方法为 法；橘皮精油的提取原料是橘皮，但橘皮易焦糊，宜采用 法提取橘皮精油。
（2）从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的是 法；一般情况下，提取胡萝卜素时，提取效率与原料颗粒的含水量成 比。
（3）欲从土壤中分离纤维素分解菌，最好选择在________环境中采集土样，所选择的培养基应以________作为唯一碳源。
（4）分离土壤中的纤维素分解菌时，经常用加入了______ __的鉴别培养基，在该培养基上，纤维素分解菌会因为产生纤维素酶使菌落周围出现____ ____。
阅读资料，完成后面的问题。
资料一：单细胞蛋白（ single cell protein，SCP）是指通过培养大量细菌、酵母、真菌或藻类，从中提取出的蛋白质或生物菌体，可直接作为一种人和动物的蛋白来源添加到人类食品和动物饲料中。
资料二：对柑橘果实加工后剩下的新鲜皮渣处理成为许多加工厂亟需解决的问题，柑橘皮渣含大量果胶、纤维素和半纤维素，并且可能作为一种发酵基质。
资料三：有科学家设想可以柑橘皮渣为原料，筛选合适的微生物和提供适宜发酵条件，生产单细胞蛋白质来作为动物饲料使用。
（1）单细胞蛋白可直接作为蛋白质来源添加到动物饲料的原因是蛋白质是细胞__ （干重，鲜重）中含量最高的物质。
（2）柑橘皮渣中的纤维素可以为微生物的培养提供 。
（3）我们分别使用四种类型的酵母进行发酵，并测定发酵前后的粗蛋白和真蛋白含量得到下表：
注：CP:粗蛋白，TP：真蛋白。
从表中来看，有3种酵母均可显著提高发酵产物的粗蛋白质和真蛋白质含量，从粗蛋白质提高程度看，以 （填单株酵母菌株编号）效果最好，但以真蛋白质来看，则以 最好。
（4）进一步研究表明，使用酵母和霉菌混合发酵的效果更好，其原因可能是混合发酵时，霉菌产生的 酶和 酶可以分解发酵原料中细胞壁成分，其分解产物除了可以保障自身生长外，还可促进酵母生长。
（5）以下为研究发酵条件的部分实验，在这三组实验中，自变量为____ ，无关变量是 。
如图表示大肠杆菌细胞中组成核糖体的蛋白质（简称RP）的合成及调控过程。RP基因操纵元是控制核糖体蛋白质合成的DNA分子片段，RBS是核糖体结合位。请回答下列问题：
（1）RP基因操纵元的基本组成单位是______________；①过程发生的场所是______________。
（2）过程②合成的RP1的多肽有一段氨基酸序列为“﹣丝氨酸﹣组氨酸﹣谷氨酸﹣”，转运丝氨酸、组氨酸和谷氨酸的tRNA上的相应碱基序列分别为AGA、GUG、CUU，则决定该氨基酸序列的基因的碱基序列为__________。
（3）核糖体主要由______________等物质构成，图中核糖体沿着mRNA的移动依次合成的有关物质是______________等（用图中所示物质表示），当细胞中缺乏rRNA时，RP1与RBS结合，导致RBS被封闭，引起的后果是______________，通过这种调节机制可以避免______________。
（4）大肠杆菌细胞中的RNA，其功能有______________ （多选）。
A．作为遗传物质 B．传递遗传信息 C．转运氨基酸 D．构成核糖体
炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病，炭疽杆菌两端截平、呈竹节状排列，菌落呈卷发状。对炭疽病疑似患者，可根据噬菌体的宿主专一性，通过实验确诊。
(1)细菌培养：采集疑似患者的样本，分离培养，获得可疑菌落。
(2)细菌鉴定：实验流程如下图所示
①对配制的液体培养基需采取 方法灭菌；实验所用液体培养基的碳源为 (填“无机碳”或“有机碳”)。在提供主要营养物质的基础上，培养基还需要满足炭疽杆菌生长对 、 以及特殊营养物质的要求。
②挑选可疑菌落制片后，用 观察，可看到呈竹节状排列的杆菌。
③接种可疑菌后，35℃培养24小时，液体培养基变浑浊，原因是 ，对照组试管中应加入 ，与实验组同时培养6小时后，若实验组液体培养基的 比对照组低，则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除。
④对排除的疑似患者及易感人群，可接种炭疽杆菌疫苗，刺激机体产生相应抗体。与产生抗体相关的细胞除T细胞、B细胞外，还有 、 。
[生物——选修1：生物技术实践]（16分，每空2分）有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题：
（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以 为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于 培养基。
（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即 和 。
（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力 。
（4）通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、 和 。无菌技术要求实验操作应在酒精灯 附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。
为了检测饮用水中是否会有某种细菌，配制如右培养基进行培养：
（1）该培养基所含有的碳源有___________。
（2）该细菌在同化作用上的代谢类型是___________型。
（3）该培养基可用来鉴别哪种细菌______________。
| A．霉菌 | B．酵母菌 | C．大肠杆菌 | D．乳酸菌 |
(4)酵母菌与醋酸杆菌在结构上的最大区别是后者 。
（5）用反应式表示出制酒过程中发生的主要化学变化及后期在温度升高、通入O2后的变化： ， ；
（6）某生物兴趣小组为了“探究培养液中酵母菌种群数量的变化”，按如下左图装置进行了实验，并使用如下图所示的血球计数板对培养液中的酵母菌进行计数。请分析回答：
a.实验的最初阶段，由于温度等条件适宜，营养物质充足，没有敌害和竞争，酵母菌的种群数量呈 增长。
b.在上图所示的计数室中，如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应当采取的措施是 。
c．微生物接种的方法最常用的是 和 。接种的目的是：使聚集在一起的微生物分散成 细胞，从而能在培养基表面形成 的菌落，以便于纯化菌种。
生物柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗，科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油（如下图）。
（1）用于生产生物柴油的植物油不易发挥，宜选用____ _、____ _方法从油料作物中提取。
（2）筛选产脂肪酶的微生物M的固体培养基的组成成分有KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、尿素、琼脂和蒸馏水，其中凝固剂是 ，氮源是 ，另外还应加入 作为碳源。
（3）测定培养液中微生物数量，可选用_____法直接计数；为降低生物柴油生产技术，可利用______技术使脂肪酶能够重复使用。
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