[生物——选修1：生物技术实践]
（1）微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和____，平板划线前要对接种环进行灼烧，原因是为了__________。
（2）用培养基培养微生物时，培养基中应有__________、__________ 、__________ 和 等营养，同时还必须满足微生物生长对__________ 、__________ 、__________ 的要求。
（3）用唯一碳源培养基分离微生物的主要操作步骤为①原料称量、溶解②__________③分装、包扎④灭菌⑤倒平板⑥ __________⑦培养。
（4）将月季的花粉细胞通过无菌操作接入对应的培养基中，在一定条件下诱导形成幼苗，最适合进行培养的花药时期为__________，选择花药时，一般要通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期，最常用的方法为__________。
（5）PCR技术中的引物是__________，DNA的解旋不依靠解旋酶，而是通过温度控制来实现的。一个循环包括__________ 三步。
水华可因蓝藻爆发所致。科研人员尝试利用某种细菌限制蓝藻数量，相关实验的示意图如下。图中①～⑥表示实验步骤。
请回答问题
（1）从细胞结构的特点与复杂程度上看，蓝藻属于细胞；从生态系统的营养结构上看，蓝藻属于细胞。蓝藻的停放类型通常是。
（2）引发水华的蓝藻可产生蓝藻毒素。蓝藻毒素（是、不是）蓝藻生长、繁殖所必需的物质。蓝藻毒素对人是一种致癌因子，可使原癌基因，导致正常细胞发生癌变。
（3）图中②、⑤通常使用的是①、④中已培养至期的蓝藻和溶藻细菌。
（4）图中⑤实验组在每个培养皿中，如果做三个重复实验，可采取的做法是：。
（5）蓝藻通常呈蓝绿色，观察实验结果，发现培养皿中出现褪色空斑，说明蓝藻。
工业生产中会产生一些有机废水，某细菌X在生物处理废水中能发挥很大作用，现要要对其进行筛选。
| 培养液 |
NaNO3 |
牛肉膏 |
K2HPO4 |
MgSO4·7H2O |
KCl |
NiSO4 |
| A |
- |
- |
1g/L |
1g/L |
0.5g/L |
0.01g/L |
| B |
3g/L |
3g/L |
1g/L |
1g/L |
0.5g/L |
0.01g/L |
| C |
3g/L |
- |
1g/L |
1g/L |
0.5g/L |
0.01g/L |
（1）应选用上表中的 （填图中字母）培养液，解释不选用其他培养液的原因：a ，b 。
（2）接种前培养基必须进行 灭菌，为确定培养基灭菌是否彻底，可设置 的空白培养基为对照组；若要制作平板，常在培养液中加入 作为凝固剂，培养时，需将平板 放置。
（3）为获得单个菌落，某同学将细菌X接种到正确的培养基中，经培养后，其中一个平板的菌落分布如右图所示，该同学的接种方法是 ，所用的接种工具是 ，该同学可能的操作失误是 。
（4）对细菌X计数时，可吸取菌液１ml稀释1000倍，然后吸取稀释后的菌液0.2ml，接种于平板上培养，一段时间后观察到三个平板上的菌落数为61、62、63，则该菌液中的细菌X数量约为 个/ml。
不同微生物有各自的代谢特点，人们常据此分离鉴别微生物的种类。实验室有两个菌种：胱氨酸依赖型细菌(无胱氨酸不能生长)，甲基营养细菌(只能利用甲醇、甲烷作碳源)，
但试管上标签脱落。某同学的鉴别思路是配制3个培养基，只接种其中的任一菌种，根据生长状况将其鉴别出来，另一种自然鉴别出来。请根据这一思路完成实验方案。
实验步骤：
第一步：在两个菌种的试管上分别标记A、B；
第二步：配制不含胱氨酸和甲基营养物的培养基，分别倒入3个培养皿中，标上l、2、3，___________________________________________________________________________。
第三步：___________________________________________________________________。
结果分析：_________________________________________________________________。
和其他微生物的培养一样，第二步和第三步中都应注意_______操作，否则将导致实验失败。
有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。回答问题：
（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以 ___ 为唯一碳源的固体培养基土，从功能上讲，该培养基属于 ____ 培养基。
（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即 _____________ 和 __________ _____ 。
（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的
大小，分解圈大说明该菌株的降解能力 ______________ 。
（4）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、 _____ 和
_____ 。无菌技术要求试验操作应在酒精灯 ____ 附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。
有些微生物能合成纤维素酶，通过对这些微生物的研究和应用，使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等。纤维素酶可以通过微生物发酵来生产，为了提高酶的产量，请你设计一个实验，利用诱变育种的方法，获得产生纤维素酶较多的菌株。
(1)写出实验步骤：
①将培养好的生产菌株分成两组______________________________________________.
②制备含有___________的固体培养基。
③_________________________________________________________________________.
④__________________________________________________________________________.
(2)预期实验结果结论：
①__________________________________________________________________________.
②__________________________________________________________________________.
③__________________________________________________________________________.
(3)若获得纯净的高产菌株，需进行_____________ 或___________________操作。
分）请回答制作果酒和果醋的有关问题。
（1）果酒和果醋的制作依次利用了 和 两种微生物，两者在结构上最主要区别是 ；从代谢类型上看，两者的相同之处是 。
（2）在设计发酵装置时，排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连，其原因是 。
（3）果酒发酵时间一般为10~12d，但也可能因为 等外界条件而发生改变，可定期取发酵液与、 试剂反应检查发酵情况，如发酵液中含有酒精则溶液呈现 。
（4）果酒进一步发酵能获得果醋，酒变醋的原理是 。
（5）在变醋的酒的表面可以观察到菌膜，其形成原因是 。
(8分)【生物一生物技术实践】
培养基是微生物生长、分离、鉴别的营养基础，在微生物研究领域发挥着重要作用。请回答下列问题。
(1)分析培养基的配方：KH2P04、Na2HP04、MgS04·7H20、葡萄糖、尿素、琼脂。在该培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是——和.
(2)鉴别培养基可以鉴定出分解尿素的细菌，方法是在以——为唯一氮源的培养基中加入——指示剂。
(3)在液体培养基中加入一定量凝固剂，使其成为固体状态即为固体培养基。实验室中常用——作凝固剂。
(4)接种微生物常用的方法是——和——，接种前培养基要进行——操作。
阅读资料，完成后面的问题。
资料一：单细胞蛋白（ single cell protein，SCP）是指通过培养大量细菌、酵母、真菌或藻类，从中提取出的蛋白质或生物菌体，可直接作为一种人和动物的蛋白来源添加到人类食品和动物饲料中。
资料二：对柑橘果实加工后剩下的新鲜皮渣处理成为许多加工厂亟需解决的问题，柑橘皮渣含大量果胶、纤维素和半纤维素，并且可能作为一种发酵基质。
资料三：有科学家设想可以柑橘皮渣为原料，筛选合适的微生物和提供适宜发酵条件，生产单细胞蛋白质来作为动物饲料使用。
（1）单细胞蛋白可直接作为蛋白质来源添加到动物饲料的原因是蛋白质是细胞__ （干重，鲜重）中含量最高的物质。
（2）柑橘皮渣中的纤维素可以为微生物的培养提供 。
（3）我们分别使用四种类型的酵母进行发酵，并测定发酵前后的粗蛋白和真蛋白含量得到下表：
注：CP:粗蛋白，TP：真蛋白。
从表中来看，有3种酵母均可显著提高发酵产物的粗蛋白质和真蛋白质含量，从粗蛋白质提高程度看，以 （填单株酵母菌株编号）效果最好，但以真蛋白质来看，则以 最好。
（4）进一步研究表明，使用酵母和霉菌混合发酵的效果更好，其原因可能是混合发酵时，霉菌产生的 酶和 酶可以分解发酵原料中细胞壁成分，其分解产物除了可以保障自身生长外，还可促进酵母生长。
（5）以下为研究发酵条件的部分实验，在这三组实验中，自变量为____ ，无关变量是 。
如图表示大肠杆菌细胞中组成核糖体的蛋白质（简称RP）的合成及调控过程。RP基因操纵元是控制核糖体蛋白质合成的DNA分子片段，RBS是核糖体结合位。请回答下列问题：
（1）RP基因操纵元的基本组成单位是______________；①过程发生的场所是______________。
（2）过程②合成的RP1的多肽有一段氨基酸序列为“﹣丝氨酸﹣组氨酸﹣谷氨酸﹣”，转运丝氨酸、组氨酸和谷氨酸的tRNA上的相应碱基序列分别为AGA、GUG、CUU，则决定该氨基酸序列的基因的碱基序列为__________。
（3）核糖体主要由______________等物质构成，图中核糖体沿着mRNA的移动依次合成的有关物质是______________等（用图中所示物质表示），当细胞中缺乏rRNA时，RP1与RBS结合，导致RBS被封闭，引起的后果是______________，通过这种调节机制可以避免______________。
（4）大肠杆菌细胞中的RNA，其功能有______________ （多选）。
A．作为遗传物质 B．传递遗传信息 C．转运氨基酸 D．构成核糖体
炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病，炭疽杆菌两端截平、呈竹节状排列，菌落呈卷发状。对炭疽病疑似患者，可根据噬菌体的宿主专一性，通过实验确诊。
(1)细菌培养：采集疑似患者的样本，分离培养，获得可疑菌落。
(2)细菌鉴定：实验流程如下图所示
①对配制的液体培养基需采取 方法灭菌；实验所用液体培养基的碳源为 (填“无机碳”或“有机碳”)。在提供主要营养物质的基础上，培养基还需要满足炭疽杆菌生长对 、 以及特殊营养物质的要求。
②挑选可疑菌落制片后，用 观察，可看到呈竹节状排列的杆菌。
③接种可疑菌后，35℃培养24小时，液体培养基变浑浊，原因是 ，对照组试管中应加入 ，与实验组同时培养6小时后，若实验组液体培养基的 比对照组低，则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除。
④对排除的疑似患者及易感人群，可接种炭疽杆菌疫苗，刺激机体产生相应抗体。与产生抗体相关的细胞除T细胞、B细胞外，还有 、 。
[生物——选修1：生物技术实践]（16分，每空2分）有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题：
（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以 为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于 培养基。
（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即 和 。
（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力 。
（4）通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、 和 。无菌技术要求实验操作应在酒精灯 附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。
为了检测饮用水中是否会有某种细菌，配制如右培养基进行培养：
（1）该培养基所含有的碳源有___________。
（2）该细菌在同化作用上的代谢类型是___________型。
（3）该培养基可用来鉴别哪种细菌______________。
| A．霉菌 | B．酵母菌 | C．大肠杆菌 | D．乳酸菌 |
(4)酵母菌与醋酸杆菌在结构上的最大区别是后者 。
（5）用反应式表示出制酒过程中发生的主要化学变化及后期在温度升高、通入O2后的变化： ， ；
（6）某生物兴趣小组为了“探究培养液中酵母菌种群数量的变化”，按如下左图装置进行了实验，并使用如下图所示的血球计数板对培养液中的酵母菌进行计数。请分析回答：
a.实验的最初阶段，由于温度等条件适宜，营养物质充足，没有敌害和竞争，酵母菌的种群数量呈 增长。
b.在上图所示的计数室中，如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应当采取的措施是 。
c．微生物接种的方法最常用的是 和 。接种的目的是：使聚集在一起的微生物分散成 细胞，从而能在培养基表面形成 的菌落，以便于纯化菌种。
生物柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗，科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油（如下图）。
（1）用于生产生物柴油的植物油不易发挥，宜选用____ _、____ _方法从油料作物中提取。
（2）筛选产脂肪酶的微生物M的固体培养基的组成成分有KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、尿素、琼脂和蒸馏水，其中凝固剂是 ，氮源是 ，另外还应加入 作为碳源。
（3）测定培养液中微生物数量，可选用_____法直接计数；为降低生物柴油生产技术，可利用______技术使脂肪酶能够重复使用。
果粒生产在中国尚属起步阶段。果粒除了可直接食用外还可作为配料加入酸奶、冰淇淋、果冻等食品中。果粒的硬度、形状直接影响着最终产品的质量。如酸奶果粒必须符合以下质量标准：①果粒含量高；②相同的果粒分布和正确的黏稠度。但大部分果粒经高温处理或机械泵出后成型果粒量少，且果粒硬度不够，这势必会影响下一步的生产。果胶酯酶作为一种新型加工助剂，可将果粒的组织结构损坏减到最小，最大限度地提高成型果粒的含量。根据以上内容完成下列问题：
(1)工业上用针尾曲霉生产果胶酯酶属 工程。
(2)果胶酶作为一种果粒加工助剂，它能将果胶分解成可溶性的 ，由于酶的__________特性可知组成果粒的另一部分 不会被分解。
(3)在果粒制作时按2 mL酶/kg水果的量加入酶制剂，加热至40～45 ℃缓慢搅拌处理10～15分钟。最后加热到90～92 ℃再冷却罐装。在此过程中按“2 mL酶/kg水果”的量加入酶的意义在于：________________________________________________________________；在40～45 ℃温度下搅拌处理的原因是 ；最后升温到90～92 ℃再冷却装罐的目的是 。
(4)果粒产品与果汁产品在成分上的主要区别在于 。
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