农作物秸秆在生产实践中具有多种用途。在特定微生物产生的纤维素酶的催化下，秸秆中的纤维素可被分解为葡萄糖，经发酵后形成乙醇，再加工即可制成燃料乙醇，减少了人类生活对石油资源的依赖。请分析回答：
（1）欲从土壤中分离获取上述特定微生物，可采用稀释涂布法或 法进行接种，所用培养基以纤维素为唯一碳源，目的是只允许能产生 的微生物生长，而其他微生物均不能生长。在培养基中加入适量的刚果红染料，若观察到 即可初步筛选到目的菌。
（2）某研究人员经上述培养获得了三种微生物（甲、乙、丙），现通过如下实验比较三种微生物所产生纤维素酶的活性大小。
①将甲、乙、丙三种微生物经离心等方法处理后，制成酶浓度相同的纤维素酶提取液，取等体积的三种提取液分别与等量的纤维素悬浮液混合，在相同且适宜的pH和温度条件下放置一段时间。
②利用 试剂检测产物中的葡萄糖，并通过比较颜色深浅程度判断酶活性的大小。
③实验结果如下：
| |
甲提取液 |
乙提取液 |
丙提取液 |
| 颜色深浅程度 |
＋ |
＋＋＋ |
＋＋ |
注：“+”越多，颜色越深
由表分析，三种微生物产生的纤维素酶活性不同，最可能的原因是 。其中产生酶活性最强的微生物是 。
（3）农作物秸秆除用于生产燃料乙醇外，还可用于培育蘑菇和生产沼气等。下图为某生态农场的部分结构模式图。
水稻、杂草在此生态系统的组成成分中属于 。输入到鸭体内的能量除通过呼吸作用以热能形式散失外，还用于鸭自身的 等生命活动。在农业生产上，将蘑菇房与蔬菜大棚连通可提高蔬菜产量，增产的原因最可能是 。
（4）对农作物秸秆的充分利用可促进生态系统中物质在 之间不断地循环往返，同时合理调整了生态系统中的能量流动关系，有效缓解了燃烧秸秆造成的污染和浪费。
微生物的抗性突变是自发产生的？还是与相应的环境因素有关？有人设计下列实验，以研究探讨该问题。实验选用对链霉素敏感的大肠杆菌K12。培养基3、7、11中含有链霉素，其它培养基中不含链霉素。请据实验回答：
（1）将原始对链霉素敏感大肠杆菌K12菌种涂布在培养皿1的表面培养，接着通过右图“印章”将培养皿1中的菌群“印”在培养皿2、3上培养。“印章”位置保持不变。培养皿2、3根据其功能，分别称为 培养基、 培养基。
（2）培养基3的A点处有菌落生长，将培养基2中相应的A点位置的菌落上挑出少量移入培养基4中。如图反复几次实验。请根据实验现象解释“微生物的突变是自发的还是环境因素导致的”： 。
（3）要分离出单个菌落，除了本实验中的涂布法外，还可以用___________法。
（4）上述不含链霉素培养基通常使用的是 ，下表是另一种培养基配方，该培养基具有 作用。
| 成分 |
KH2PO4 |
Na2 PO4 |
MgSO4·7H2O |
葡萄糖 |
尿素 |
琼脂 |
| 含量 |
1.4g |
2.1g |
0.2g |
0.0g |
1.0g |
15.0g |
（7）现有5种营养缺陷型菌株1、2、3、4、5，它们不能合成生长所必需的物质G，已知A、B、C、D、E都是合成G物质的必需中间产物，但不知这些物质合成的顺序，于是在培养基中分别加入这几种物质并分析了这几种物质对各种营养缺陷型菌株生长的影响，结果如右表所示。根据以上结果，推测这几种物质的合成顺序应是 。
絮凝性细菌分泌的具有絮凝活性的高分子化合物,能与石油污水中的悬浮颗粒和有机物等形成絮状沉淀,起到净化污水的作用。为进一步提高对石油污水的净化效果,将絮凝性细菌和石油降解菌融合,构建目的菌株。其流程图如下。
据图回答:
(1)溶菌酶的作用是 。
(2)PEG的作用是 。
(3)经处理后,在再生培养基上,未融合的A、B难以生长。图中AB融合菌能生长和繁殖的原因是 。
(4)目的菌株的筛选:筛选既能分泌具有絮凝活性的化合物,又能在含有 的培养基上生长的AB融合菌,选择效果最好的作为目的菌株。
(5)为探究目的菌株不同发酵时间发酵液的絮凝效果,将目的菌株进行发酵培养,定时取发酵液,加入石油污水中;同时设置 为对照组。经搅拌、静置各3分钟后,分别测定上层水样的石油浓度和COD值(COD值越高表示有机物污染程度越高),计算石油去除率和COD去除率,结果如下图。
(6)目的菌的种群增长曲线呈 型。在40~44小时,发酵液对石油污水的净化效果最好,其原因是 。
多环芳烃菲在染料、杀虫剂等生产过程中被广泛使用，是土壤、河水中常见的污染物之一。下图表示科研人员从被石油污染的土壤中分离获得能降解多环芳烃菲的菌株Q的主要步骤。请回答：
（1）步骤①→③的培养过程中，培养液中加人多环芳烃菲作为唯一碳源，目的是 。
（2）步骤①→③的培养过程中，需将锥形瓶放在摇床上振荡，一方面使菌株与培养液充分接触，提高营养物质的利用率；另一方面能 。
（3）步骤④用平板划线法纯化菌株Q过程中，在做第二次以及其后的划线操作时，总是从上一次划线的末端开始划线，原因是 。采用固体平板培养细菌时要倒置培养的目的是 。
（4）接种环通过灼烧来灭菌，完成步骤④中划线操作，共需灼烧接种环 次。
（5）为了获得分解多环芳烃菲能力更强的菌株，研究人员又对菌种Q进行了诱变处理，得到突变株K。为了比较两种菌株降解多环芳烃菲的能力，设计了下列实验，请补全实验步骤：
①取9只锥形瓶均分成三组，编号A、B、C。
②向9支锥形瓶中分别加入 为唯一碳源的培养液。
③向A、B、C三组培养液中分别加入 。
④28℃恒温培养3天后，测定锥形瓶中多环芳烃菲的降解率。
分）回答下列有关微生物的培养和利用问题：
（1）在培养基的配制过程中，具有如下步骤：①溶化 ②调pH ③加棉塞 ④包扎 ⑤分装 ⑥称量，正确的顺序为 ；倒平板操作中，平板冷凝后，要将平板倒置，其主要原因是 。
(2)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的________。
(3)食品安全检测时通常采用大肠杆菌作为致病微生物的指示菌，为测定哪些菌落属于大肠杆菌，可选用 培养基对菌落进行鉴定，大肠杆菌的菌落在该培养基上呈现黑色。
(4)生物柴油是一种可再生的清洁能源，可从油料作物中提取植物油与甲醇在脂肪酶的催化下生成生物柴油，从微生物中提取脂肪酶通常需要检测 ，为降低柴油生产成本，可利用 技术使脂肪酶能重复使用。
(5)苹果醋是最受欢迎的饮料之一，其生产过程中利用了______________的发酵作用；喝剩的葡萄酒放置一段时间后变酸的原因是______________________________。
回答下列关于生物技术实践的问题：
（1）传统发酵技术中，利用微生物发酵生产特定的产物，很多都是中华民族的传统食品。请将下列微生物与对应的发酵产物联系起来：
①乳酸菌 ②根瘤菌 ③蓝藻 ④醋酸菌 ⑤毛霉 ⑥酵母菌 ⑦大肠杆菌 ⑧曲霉
制作果酒、果醋、腐乳、泡菜对应的微生物依次是 （填相应序号）；其中泡菜制作的原理是（用反应式表示）： 。
（2）在培养基的配制过程中，具有如下步骤：①溶化 ②调pH ③加棉塞 ④包扎 ⑤分装 ⑥称量正确的顺序为 ；倒平板操作中，平板冷凝后，要将平板倒置，其主要原因是 。
（3）菊花的组织培养中要求无菌操作的目的是 ，在愈伤组织形成过程中常用的培养基是MS培养基，并且需要添加 ；愈伤组织分化成根和芽，再由芽发育成叶和茎，这一过程称为__________，此过程 （填“需要”或“不需要”）光照。
A．纤维素酶对于能否实现乙醇工业化生产、处理服装面料等具有重要的意义，研究者初步筛选到能合成纤维素酶的菌株MC-1，以下是该菌株的鉴定过程。
（1）为了获得能合成纤维素酶的单菌落，可采用 法将初筛菌液接种在固体培养基上，这种培养基属于 培养基。
（2）关于制备固体培养基的叙述，错误的是
A．制作固体培养基时可以加入琼脂。
B．操作的顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌
C．待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板。
D．待平板冷却凝固约5-10min后将平板倒过来放置。
（3）实验过程中如何防止其他微生物的污染？ 。
（4）下表的培养液pH均为4.8，若对MC-1中纤维素酶的活力进行测定，则需选择表中的 培养液。
| 培养液 |
纤维素 |
纤维素酶 |
NaNO3 |
牛肉膏 |
K2HPO4 |
KCl |
MgSO4·7H2O |
FeSO4 |
| A |
25g/L |
— |
— |
— |
1g/L |
0.5g/L |
1g/L |
0.01g/L |
| B |
— |
— |
3g/L |
— |
1g/L |
0.5g/L |
1g/L |
0.01g/L |
| C |
25g/L |
1ug/L |
— |
3g/L |
1g/L |
0.5g/L |
1g/L |
0.01g/L |
| D |
25g/L |
— |
3g/L |
— |
1g/L |
0.5g/L |
1g/L |
0.01g/L |
（5）分离获得了具有较高纤维素酶活性的菌株MC-1，为了在此基础上获得纤维素酶活性更高的菌株，最可行的做法是 。
（6）某同学在培养过程中发现培养基上感染了几种细菌。若在以尿素为唯一氮源的培养基中加入________指示剂培养几种菌后，指示剂变红就可以鉴定其中含有能够分解尿素的菌；若在以纤维素为唯一碳源的培养基中加入________染料，培养后，培养基中出现透明圈，就可以鉴定其中含有纤维素分解菌。
B．下图是用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答。
（1）实验步骤②所代表的反应过程是________。
（2）能否利用人的皮肤细胞来完成①过程？ ，为什么？ 。
（3）为使过程⑧更易进行，可用 处理D的细胞。D细胞一般选用大肠杆菌或枯草杆菌的原因是 。
（4）为了检验步骤⑩是否表达了人的胰岛素，可用_____________技术进行检测。
（5）基因表达载体含有启动子、目的基因、终止子、复制原点和 。
（6）根治糖尿病的最佳方法是 。
Ⅰ．孔雀石绿(C23H25N2Cl)常用作纺织业的染料，也可用作水产养殖业的杀菌驱虫剂。但它具有高毒性、高残留的危害，因此对孔雀石绿废水的处理已成为环境科学领域关注的热点。科研人员从某化工厂污水池中分离获得了能降解孔雀石绿的细菌菌株A。主要步骤如下图所示。
请分析并回答：
(1)从①到③的培养过程中，培养液应加入孔雀石绿作为________，此过程的目的是________________________和________________________。
(2)研究人员进一步研究了不同金属离子对菌株A降解孔雀石绿的影响，实验结果如下图所示。
由上述结果可以看出，多数金属离子对菌株A降解孔雀石绿有________作用，唯有Pb2＋的作用相反。若要排除Pb2＋本身对孔雀石绿有降解作用，则应设置__________________________的培养基样本作为对照。
Ⅱ．玫瑰被誉为“花中皇后”，是最著名的花卉之一；玫瑰精油也是世界上最贵的植物精油，具有“软黄金”之称。下面是与玫瑰相关的实验，请分析回答问题：
（1）如果要用植物组织培养的方法对玫瑰进行大规模种植，在对玫瑰外植体细胞进行接种前，需要进行_______________、________________两项工作。
（2）取长势相同并经过消毒的玫瑰花芽若干，并均分为5份，分别培养在含有不同比例的吲哚乙酸和细胞分裂素的培养基中，花芽的生长状况如下表所示。
①在此过程中能实现脱分化的花芽是____________组。
②根据实验结果在生产中，欲快速、大量获得花芽，可选用__________组的培养基进行大量生产。
（3）玫瑰精油易挥发、化学性质稳定、难溶于水，适合用________蒸馏法提取。蒸馏时收集的蒸馏液中含有的物质是________________，可以向收集的蒸馏液中加入 提高玫瑰精油的纯度。
由于酵母菌利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽抱杆菌的α-淀粉酶基因转入酵母菌中，经筛选得到了可高效利用淀粉的工程菌菌种（过程如图甲所示）。
（1）图甲中，过程①需要的酶有 。为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以 作为唯一碳源。②、③过程需要重复几次，目的是 。
（2）某同学尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是 ；推测该同学接种时可能的操作失误是 。原因是：在 足够高的菌液里， 聚集在一起的酵母菌将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成 的菌落。
（3）以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同且适宜的条件下密闭发酵，接种工程酵母菌的发酵罐需要先排气，其原因是 。
由于酵母菌利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽抱杆菌的α-淀粉酶基因转入酵母菌中，经筛选得到了可高效利用淀粉的工程菌菌种（过程如图甲所示）。
（1）图甲中，过程①需要的酶有 。为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以 作为唯一碳源。②、③过程需要重复几次，目的是 。
（2）某同学尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是 ；推测该同学接种时可能的操作失误是 。原因是：在 足够高的菌液里，聚集在一起的酵母菌将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成 的菌落。
（3）以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同且适宜的条件下密闭发酵，接种工程酵母菌的发酵罐需要先排气，其原因是 。
在含硫热泉或深海火山口中生活的极端嗜热嗜酸菌，作为唯一的碳源进行硫的代谢的是（）
| A．甲烷 | B．二氧化碳 | C．氨基酸 | D．甲醛 |
大肠杆菌的乳糖操纵子含有3个结构基因：
编码：
—半乳糖苷酶基因lacZ
编码：—半乳糖苷透性酶基因lac Y
编码：—半乳糖苷转乙酸基酶基因lac A
乳糖操纵子受Lacl（阻遏物）控制。阻遏物在乳糖存在下被钝化，乳糖是诱导物。有许多乳糖类似物，例如邻位硝基苯——D一半乳糖苷（ONPG），它是—半乳糖苷透性酶的底物，但不是诱导物。这个反应产生邻位硝基苯，对细胞是有毒的。异丙基——D半乳糖苷（IPTG），是诱导物，但不是—半乳糖昔酶的底物。苯基——D半乳糖苷（PG）是—半乳糖苷酶的底物，但不是诱导物。它的水解产物对细胞是没有毒的。
9.1．在培养基加入PG作为唯一的碳源与能源，哪种细胞可以生长？
A．lac I— B．lac Z— C．lac Y— D．lac Z—lac Y—
E．lac I—lac Z—
9.2．在有ONPG的培养基中细胞能否生长？
A．能 B．不能
细菌是可以在不同环境条件下生长的原核生物。
在一个特定的温度条件下，细菌生物情况可以用下图表示，即活细胞数的对数值为纵轴，细菌生长时间为横轴。
|
| 生长期 |
答案（A/B/C/D/E） |
| 1．指数生长期 |
|
| 2．衰亡期 |
|
| 3．转换期 |
|
| 4．静止期 |
|
| 5．延迟期 |
|
蓝藻不属于植物界，因为：
A 它们是原核生物 B 它们的生境不同
C 它的光合色素组成不同 D 它们是地衣中的一类
E 它们是地球上最古老的一类生物
粤公网安备 44130202000953号