回答下列有关基因工程的问题。
苏云金杆菌 （Bt）能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。下图是转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图 （
为抗氨苄青霉素基因），①~④表示过程。
（1）由HindⅢ酶切后，得到DNA片段的末端是 （）
（2）将图中①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，产生 种DNA片段，②过程可获得 种重组质粒。如果只用BamHⅠ酶切，目的基因与质粒连接后可获得 种重组质粒。
（3）该过程中Bt毒素蛋白基因插入质粒后，不应影响质粒的 （） （多选）
| A．复制 | B．转录 | C．碱基对的数量 | D．抗性基因的表达 |
（4）此基因工程中大肠杆菌质粒的作用是 ，根瘤农杆菌的作用是 。生产上常将上述转基因作物与非转基因作物混合播种，其目的是降低害虫种群中的 基因的基因频率的增长速率。
用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列步骤中错误的是 （）
| A．将抗原注入小鼠体内，以便获得特定的B淋巴细胞 |
| B．用聚乙二醇作诱导剂，促使B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合 |
| C．B淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合后，无需筛选杂交细胞 |
| D．将能产生特定抗体的杂交瘤细胞，培养后提取单克隆抗体 |
【生物—选修3：现代生物科技专题】治疗性克隆是指把患者体细胞的细胞核移植到去核卵母细胞中，构建形成重组胚胎，体外培养到一定时期分离出ES细胞，获得的ES细胞定向分化为所需的特定类型细胞（如神经细胞、肌肉细胞和血细胞），用于治疗。请回答下列问题：
（1）ES细胞是胚胎干细胞的简称，在形态上，表现为 ：在功能上，具有发育的全能性。将重组胚胎在体外培养到____ 时期，从该时期的___ _中进行分离，从而获得ES细胞。
（2）在培养液中加入 可诱导ES细胞定向分化成所需的各种特定类型细胞或器官，该过程研究的意义在于解决____问题。
（3）科学家将患者的体细胞核植入去核的卵母细胞中，而不是直接用体细胞进行细胞培养的原因是 。
（4）科学家将体外培养的ES细胞进行诱导使其定向分化为胰岛B细胞，并进行了胰岛素释放实验：控制培养液中___ _的浓度，检测细胞分泌的胰岛素的量，如图为实验结果，据此分析确认ES细胞诱导成功，得到此结论的依据是________。
图1表示将人成纤维细胞与小鼠细胞进行融合，获得部分杂种细胞的过程（注：杂种细胞中人类的染色体会随机丢失，各种杂种细胞保留人类染色体的种类和数量是不同的）。表1表示几种杂种细胞中基因的存在与人体染色体间的关系。请回答下列问题：
表1 几种杂种细胞中基因的存在与人体染色体间的关系
| 杂种细胞系 |
||||||
| A |
B |
C |
D |
E |
||
| 人体基因 |
1 |
﹢ |
﹣ |
﹣ |
﹢ |
﹣ |
| 2 |
﹣ |
﹢ |
﹣ |
﹢ |
﹣ |
|
| 3 |
﹢ |
﹣ |
﹣ |
﹢ |
﹣ |
|
| 人体染色体 |
1 |
﹣ |
﹢ |
﹣ |
﹢ |
﹣ |
| 2 |
﹢ |
﹣ |
﹣ |
﹢ |
﹣ |
|
| 3 |
﹣ |
﹣ |
﹣ |
﹢ |
﹢ |
注：“﹢”表示有，“﹣”表示无
（1）图1中诱导动物细胞融合常用的诱导因素有 （至少写出两种），再用特定的 培养基进行筛选，得到杂种细胞。
（2）培养杂种细胞时，根据细胞所需营养物质的种类和数量严格配制培养基，此外经常会在培养基中加入 。培养过程细胞需置于含CO2的混合气体的培养箱中培养，CO2的主要作用是 。
（3）假如每种杂种细胞只保留了人的1条染色体，从染色体组成的角度考虑，杂种细胞可能有 种。
（4）据表1 推测，第2染色体上有第 基因，可进一步证明萨顿的假说即基因在染色体上是正确的。
下列有关生物工程的叙述，不正确的是（）
| A．动物细胞融合过程中可用灭活的病毒、聚乙二醇（PEG）等 |
| B．动物细胞培养过程中，常用幼龄动物为材料 |
| C．植物体细胞杂交育种过程中，需要用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁 |
| D．植物体细胞杂交过程中，需用相同浓度的细胞分裂素和生长素筛选杂种体细胞 |
下列有关叙述不正确的是（）
| A．植物组织培养的再分化过程不需要添加植物生长调节剂 |
| B．原代培养的动物细胞的基因型一般不发生改变 |
| C．转基因植物的培育一般需要借助于植物组织培养技术 |
| D．单克隆抗体制备以细胞融合和细胞培养技术为基础 |
某种极具观赏价值的兰科珍稀花卉很难获得成熟种子。为尽快推广种植，可应用多种技术获得大量优质苗。下列技术中不能选用的是（）
| A．利用茎段扦插诱导生根技术快速育苗 |
| B．采用花粉粒组织培养获得单倍体苗 |
| C．采集幼芽嫁接到合适的其他种类植物体上 |
| D．采用幼叶、茎尖等部位的组织进行组织培养 |
转基因草莓中有能表达乙肝病毒表面抗原的基因，由此可获得用来预防乙肝的一种新型疫苗，其培育过程如图所示（①至④代表过程，A至C代表结构或细胞）：
（1）图中①过程用到的酶是 ，所形成的B叫做 ，B是由 、 、 和 等部分组成。
（2）②过程常用 处理农杆菌，使之成为 细胞，利于完成转化过程。
将目的基因导入受体细胞的方法很多，在该题中涉及到的方法是 。
（3）在分子水平上，可采用 的方法来检测转基因草莓果实提取液中有无相应的抗原。
为获得纯合高蔓抗病番茄植株，采用了如图所示的方法，图中两对相对性状独立遗传．据图分析，不正确的是（）
| A．过程②可以取任一植株的适宜花药作培养材料 |
| B．过程③包括脱分化和再分化两个过程 |
| C．图中筛选过程可改变抗病基因频率 |
| D．过程①的自交代数越少，纯合高蔓抗病植株的比例越高 |
下列关于基因工程技术的叙述，正确的是（）
| A．切割质粒的限制性核酸内切酶均特异性地识别6个核苷酸序列 |
| B．PCR反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应 |
| C．载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因 |
| D．抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达 |
自然条件下，哺乳动物不发生孤雌生殖。科研人员把猪卵母细胞进行孤雌激活处理，使其发育成胚胎，移植到代孕母猪体内，获得成活的孤雌生殖克隆猪。请据图回答：
（1）图中获得孤雌生殖克隆猪的技术流程是 （填序号）；孤雌激活处理其实质是要激活卵母细胞
_，．使其发育成早期胚胎，得到克隆猪。
（2）获得核移植克隆猪的技术流程中的③和④分别代表 技术和 技术。培养图示重组细胞所用的培养基中通常还需要加入适量的 等天然成分。
（3）受体对移入的外来胚胎基本上不发生．反应，这为胚胎在受体内存活捉供可能。
（4）通过反转录得到多种cDNA与基因组DNA相比，cDNA中 （有／无）启动子， （有，无）内含子。
下列关于基因工程的叙述，正确的是
| A．基因工程的第三步是目的基因与运载体的结合 |
| B．只要目的基因进入了受体细胞就能成功的表达 |
| C．常用的运载体有质粒、噬菌体和动、植物病毒 |
| D．DNA连接酶的作用是连接两个黏性末端的碱基 |
现在转基因技术已经相当成熟了，前不久美国批准转基因三文鱼进入市场，旨在利用生物技术提升水产产业，不过这种转基因三文鱼目前只能在加拿大和巴拿马饲养。关于转基因技术下列说法正确的是
| A．转基因技术的原理是DNA分子杂交 |
| B．转基因技术的应用解决了人类史上很多难题，是有利无害的 |
| C．现在很多转基因食品包装都有警示标志，就是提示潜在的安全性 |
| D．转基因食品比传统食品营养更丰富，因此在不久之后转基因食品会替代传统食品 |
目前，精子载体法逐渐成为最具诱惑力的制备转基因动物方法之一，该方法以精子作为外源基因的载体，使精子携带外源基因进入卵细胞受精。下图表示利用该方法制备转基因鼠的基本流程。请据图回答：
（1）获取外源基因用到的工具酶是 ，为了提高实验成功率，通常利用 技术获得大量标记的外源基因。
（2）外源基因能够整合到精子的 上是提高转化率的关键，因为受精时只有精子的 才能进入卵细胞中。
（3）过程②采用的是 技术，该过程中应对已经导入外源基因的精子进行 处理。
（4）过程③需要在 (请写出4点)等条件下进行。由于人们对动物细胞所需营养物质还没有完全搞清楚，因此在培养细胞时需在培养基中加入 。
下图是转基因绿色荧光鼠的培育过程，据图回答相关问题：
（1）现有GFP基因转录得到的mRNA，获取GFP基因通常采用 法。
（2）过程①是转基因技术的核心步骤，为使GFP基因在小鼠细胞中高效表达，需要构建重组表达载体，重组表达载体包括复制原点、 等。
（3）③过程在使用合成培养基进行培养时，除了水、无机盐、氨基酸，葡萄糖、还要加入 等天然成分。
（4）②过程的受体细胞为 ，在转录水平上检测GFP基因是否表达的方法是 。
（5）④过程通过胚胎移植技术实现。移植前需要对代孕母鼠进行 处理，科学家欲获得多个相同性状的绿色荧光小鼠，则应该选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚，将其移人盛有操作液的培养皿中，然后用 技术处理。
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