植酸酶，是酶的品种之一，在动物饲料加工中发挥重要作用。植酸酶能分离出植酸分子中的磷，将植酸（盐）降解为肌醇和无机磷，同时释放出与植酸（盐）结合的其它营养物质。
（1）饲料加工过程温度较高，要求植酸酶具有较好的高温稳定性。利用蛋白质工程技术对其进行改造时，首先必须了解植酸酶的 ，最终通过改变植酸酶的 ，再通过基因工程得到新的植酸酶。
（2）培育转植酸酶基因的大豆，可提高其作为饲料原料磷的利用率。将植酸酶基因导入大豆细胞最常用的方法是 。
（3）为了提高猪对饲料中磷的利用率，科学家将带有植酸酶基因的重组质粒通过 方法转入猪的 中。将早期胚胎培养至一定时期通过 方法，从而一次得到多个转基因猪个体。
（4）若这些转基因植物被推广种植，可能会对生态环境产生怎样的影响？ 。
【生物——现代生物科技专题】Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图：
（1）步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的_________，此技术属于________工程范畴。
（2）步骤②中，重组胚胎培养到 期时，可从其__________中分离出ES细胞。培养ES细胞时，为满足细胞代谢的需要，可在培养基中加入的天然成分是_______________。
（3）步骤③中，在构建含有Rag2基因的表达载体时，可以根据Rag2基因的 设计引物，利用__________技术扩增Rag2基因片段。并且同时用HindIII和PstI限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段，这样做的目的是： 。为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有_________酶的酶切位点。
（4）为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后的小鼠骨髓细胞的蛋白质，用 进行杂交实验。
图4表示以某种农作物①和②两个品种分别培育出不同品种的过程。请回答:
图4
（1）用①和②经过程Ⅰ、Ⅱ培育成⑤，属于 育种，其原理是 。
（2）用③和④培育成⑤的过程属于 育种，过程Ⅲ常用的方法是 ，这种育种方法的最大优点是 。
（3）过程Ⅳ常用的方法是 ，品种⑥是 倍体。
（4）③导入外源基因C后培育成⑦，应用的原理是 ，该过程需用到 、 和 三种工具。
科学家通过基因工程,成功培育出能抗棉铃虫的棉花植株——抗虫棉,其过程大致如图所示。下列是有关基因工程和细胞工程的问题,请据图分析回答:
(1)细菌的基因之所以能“嫁接”到棉花细胞内,原因是 。
(2)上述过程中,将目的基因导入棉花细胞内使用了 法,这种导入方法较经济、有效。目的基因能否在棉株体内稳定维持和表达其遗传特性的关键是 ,还需要通过检测才能知道,检测采用的方法是 。
(3)利用基因工程技术培育抗虫棉,相比诱变育种和传统的杂交育种方法,具有 和 等突出的优点,但是目前基因工程仍不能取代传统的杂交育种和诱变育种。与基因工程技术相比,杂交育种和诱变育种方法主要具有 的优点。
(4)某棉农在食用该抗虫棉种子压榨的棉籽油炒芹菜后,出现鼻塞流涕,皮肤骚痒难忍症状。停用一段时间后这些症状会自然消失,该症状很可能是 。
在1990年医生对一位因缺乏腺苷脱氨酶基因而患先天性体液免疫缺陷病的美国女孩进行治疗。采用的方法是首先将患者的白细胞取出作体外培养，然后用某种病毒将正常腺苷脱氨酶基因转入人工培养的白细胞中，再将这些转基因白细胞回输到患者的体内，经过多次治疗，患者的免疫功能趋于正常。
（1）该病治疗运用了基因工程技术，在这个实例中运载体是_______，目的基因是________，目的基因的受体细胞是__________。
（2）将转基因白细胞多次回输到患者体内后，免疫能力趋于正常是由于产生了腺苷脱氨酶，产生这种物质的两个基本步骤是________和_________。
（3）人的腺苷脱氨酶基因与胰岛素基因相比，其主要差别是____________________。
（4）写出基因工程操作的基本程序:__________→____________→_______________→______________。
猪的基因和人类的基因存在一定的相似度，据报道经特殊处理的猪皮可在人身上存活3周左右，起保护创面免受感染作用，移植猪皮后，还要在猪皮上开很多小口，在小口处移植人患者的自体皮肤组织，自体皮肤慢慢生长，逐渐覆盖原先创面，而猪皮最终会掉光，为了使移植的猪皮存活更长时间，有人设法导入人的相关基因（用P表示），获得转基因小白猪，其简要流程如图所示：
据图中信息并结合课本知识回答：
（1）过程①中形成重组基因常用的酶有限制性核酸内切酶和 ；将目的基因导入成纤维细胞常用的方法是 。
（2）过程②中，常用 酶处理，将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养成纤维细胞时需要满足的条件是无菌、无毒、通气、适宜的温度、pH以及 。
（3）图中的卵母细胞应在体外培养到 ，并作除去细胞核的处理；过程③中所用的技术是 ；能代替图中卵母细胞的还可以是 。
（4）移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是 。
【生物—选修3：现代生物技术】下图是利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病的过程图解。请据图回答下列问题。
（1）图中①所示的结构名称是 。
（2）图中③④所示的生物技术名称分别是 、 。
（3）过程④通常用②作为受体细胞的原因是 。
（4）图示方法与一般的异体核移植相比最大的优点是 ，该种基因治疗所属类型是 。
为增加油菜种子的含油量，研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连，导人油菜细胞并获得了转基因油菜品种。
（1）研究人员依据基因的已知序列设计引物，采用________法从陆地棉基因文库中获取酶D基因．从拟南芥基因文库中获取转运肽基因．所含三种限制酶（Cla I、Sac I、Xba I）的切点如下图所示。则用_________和_________酶处理两个基因后，可得到___________（填图中字母）端相连的融合基因。
（2）将上述融合基因插入右上图所示质粒的T-DNA中．构建_________并导入农杆菌中．将获得的农杆菌接种在含____________的固体平板上培养得到含融合基因的单菌落，再利用培养基震荡培养，可以得到用于转化的浸染液．
（3）剪取油菜的叶片放入染液中一段时间后筛选获得转获因油菜细胞．该细胞通过__________技术．可培育成转基因油菜植株。
（4）提取上述转基因油菜的mRNA．在逆转录酶的作用下获得cDNA．再依据______的DNA片段设计引物进行扩增．对扩增结果进行检侧．可判断融合基因是否完成_____。
绞股蓝细胞中含有抗烟草花叶病毒（TMV）基因，可以合成一种抗TMV蛋白，叶片对TMV具有抗感染性。烟草是重要的经济作物，由于TMV的感染会导致大幅度减产。研究人员利用转基因技术培育出了抗TMV的烟草，主要流程如下图所示。
（1）科学家首先从绞股蓝细胞中提取抗TMV基因转录的RNA，然后合成目的基因。图中①过程表示_________。
（2）由图分析，在过程③构建的重组Ti质粒上应该含有的标记基因是________基因，重组Ti质粒导入烟草体细胞的方法是_________。
（3）在过程⑤培养基中除含有卡那霉素及植物必需的各种营养成分外，还必须添加_________，以保证受体细胞能培养成再生植株。
（4）过程⑥可采取____________的方法，检测植株是否合成了抗TMV蛋白。在个体水平的鉴定过程中，可通过_________的方法来确定植株是否具有抗性。
［生物——选修3：现代生物科技专题］（15分，除注明外，每空2分）
根据所学知识回答问题：
（1）基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤，其中的核心步骤是 。
（2）若要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的 中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的 中，植物组织培养的主要原理是植物细胞具有 ，具体过程是在 和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞培养在人工配制的培养基上，给予适宜的条件，诱导其经过 产生愈伤组织，最终形成完整的植株。
（3）在哺乳动物的核移植实验中，通过一定的措施将受体细胞激活，使其进行细胞分裂和发育，当胚胎发育到 阶段时，将胚胎移入受体（代孕）动物体内。
（4）生态工程是实现循环经济最重要的手段之一，请写出它遵循的基本原理（至少答两项） 。
【生物——选修3：现代生物科技专题】下图是将目的基因导入动物细胞，培育转基因动物的常用操作程序。根据图示过程和所学知识，将下面操作程序补充完整。
（1）构建基因表达载体：在构建基因表达载体时常要用到 两种工具酶。如果目的基因要在乳腺细胞中表达，基因表达载体构建时要将目的基因与 的启动子、标记基因和终止子等组件重组在一起，其中标记基因的作用是 。
（2）获得足够数量的受精卵：为了获得足够数量的受精卵，先利用 刺激数排卵。雌鼠经过交配，将受精卵从输卵管中取出。
（3）将目的基因导入细胞：通常采用 技术将目的基因导入受精卵。
（4）早期胚胎培养：早期胚胎培养的培养液成分一般比较复杂，除一些无机盐和有机盐外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及 等物质。当胚胎培养到适宜的阶段时，可进行胚胎移植。
（5）胚胎移植：在胚胎移植前要对接受胚胎的受体进行 处理。移植后，还要对受体雌鼠进行妊娠检查。
（6）转基因鼠的检测：经过一段时间妊娠后，产下一群小鼠，为了检测哪些是转基因鼠，可以用 作探针，进行DNA分子杂交检测。
加拿大科学家通过转基因山羊已经生产出重组的人类丁酰胆碱酯酶，该酶可用于对抗生化武器。下图是转基因山羊的培育过程示意图，请据图回答问题（山羊为二倍体）：
（1）在上述操作中，目的基因是__________基因，将该基因导入受体细胞常用的方法是______________法。
（2）胚胎工程是指对动物的早期胚胎或所进行的多种显微操作和处理技术。图中过程⑦所涉及的胚胎工程技术是________。
（3）从雌性山羊卵巢内获取的卵母细胞需要培养到________期才能完成受精作用，为了获得更多的卵母细胞，往往需要向雌性山羊体内注入________激素。受精过程中防止多精入卵的两道屏障是透明带反应和________。
（4）要同时获得多只与此转基因山羊遗传物质相同的小羊，可对囊胚进行________。
小鼠体色由位于两对常染色体上的两对等位基因控制。其中，A基因控制黄色，R基因控制黑色，A、R同时存在则皮毛呈灰色，无A、R则呈白色。一灰鼠和一黄鼠交配，F1出现黄、灰、黑、白四种体色。请回答
（1）亲本中灰色鼠的基因型为 。体色的遗传符合孟德尔的 定律。
（2）F1中，灰色鼠所占比例为 ，基因型是 。若F1中的灰色雌、雄小鼠自由交配，F2中基因型为aa的小鼠占 。
（3）若基因型为AaRr的灰色雌鼠，产生了一个AaR的卵细胞，最可能的原因是 。
（4）若白鼠无法生存到繁殖年龄，请判断该种群是否在进化并说明理由？ 。
（5）用PCR技术扩增基因R时，需要 酶的参与。
组织型纤溶酶原激活剂（tPA）在人体纤溶和凝血的平衡调节中发挥着关键性的作用，如图是利用奶牛乳汁生产组织型纤溶酶原激活剂（tPA）的图解，据图回答下列问题：
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（1）过程①在构建的基因表达载体中，应将tPA基因首端与 基因的启动子等调控组件结合，③过程常用的方法是 。
（2）要获得单个成纤维细胞，过程②需用 处理奶牛胎儿皮肤组织块。在单个组织细胞的培养过程中，为了防止杂菌污染，通常还要在细胞培养液中添加一定量的 。阅读如下材料：
材料甲：科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵在，得到了体型巨大的“超级小鼠”；科学家采用农杆菌转化法培育出转基因烟草。
材料乙：T4溶菌酶在温度较高时易失去活性，科学家对编码T4溶菌酶的基因进行改造，使其表达的T4溶菌酶的第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸，在该半胱氨酸与第97为的半胱氨酸之间形成了一个二硫键，提高了T4溶菌酶的耐热性。
材料丙：兔甲和兔乙是同一物种的两个雌性个体，科学家将兔甲受精卵发育成的胚胎移植到兔乙的体内，成功产出兔甲的后代，证实了同一物种的胚胎可在不同个体的体内发育。
回答下列问题：
（1）材料甲属于基因工程的范畴。将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用 法。构建基因表达载体常用的工具酶有 和 。在培育转基因植物是，常用农杆菌转化发，农杆菌的作用是 。
（2）材料乙属于 工程范畴。该工程是指以分子生物学相关理论为基础，通过基因修饰或基因合成，对 进行改造，或制造制造一种 的技术。在该实例中，引起T4溶菌酶空间结构改变的原因是组成该酶肽链的 序列发生了改变。
（3）材料丙属于胚胎工程的范畴。胚胎移植是指将获得的早期胚胎移植到 种的、生理状况相同的另一个雌性动物体内，使之继续发育成新个体的技术。在资料丙的实例中，兔甲称为 体，兔乙称为 体。
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