吉林大学农学部奶牛繁育基地成功培育出的一头携带转人赖氨酸基因的克隆牛“织女”，其过程如下，请据图回答问题。
(1)克隆牛“织女”的诞生过程中涉及到的细胞水平的现代生物技术主要有：________________________ (至少答出两项)
(2)实施基因工程包括四个基本操作步骤，其核心步骤是_________________。在这一过程中处理目的基因和载体的限制酶一般是同一种，目的是____________________________。
(3)从④到⑤的过程可获得较多的遗传同质早期胚胎，常采用的方法是进行__________。
把⑤送入⑥孕育形成⑦之前，对⑥的处理方法和目的是___________________。
(4)⑦可通过分泌乳汁来生产人类所需药物，这类转基因动物被形象地称为“_________”。
为取得生产效率，在早期胚胎培养时可以对要移植的胚胎提前进行______________鉴定。
慢性病人常出现白蛋白值偏低的状况（ 比如慢性肝病、慢性肾病、肿瘤等），缺乏白蛋白人就容易出现浮肿。人体的白蛋白正常值在每100ml血液中含有3．8～4．8克，如果比正常值低很多时就需要注射人血白蛋白，所以临床上对白蛋白需求量很大。
右图是利用崂山奶山羊乳腺生物反应器制备药用白蛋白的流程图：
(1)要实现①超数排卵，应在崂山奶山羊A发情周期的某一阶段用 处理，然后在恰当时期采集卵子。
(2)过程④需将重组质粒用 方法注入受精卵的雄原核内，在显微镜下判断是否完成受精作用的标志是 。
(3)为了使胚胎移植能成功，需要对代孕奶山羊C进行 处理，使之与供体的生理状况保持相同
下图表示我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的具体培育过程。
请据图回答下列问题：
(1)上述过程涉及的现代生物工程技术，属于分子水平的是___________，其核心步骤是_______________。
(2)若要获得单个的成纤维细胞进行培养，需用___________处理猪胚胎的部分组织。
(3)E过程中若要获得大量的卵母细胞需用___________激素处理成年母猪。
(4)H过程的名称是______ ___，所选择的胚胎一般处于_______ 期较合适。
(5)经过培养得到早期胚胎后可以用胚胎分割技术以获得更多基因型______ (相同/不相同)的转基因克隆猪胚胎，且在进行H过程之前，需要对代孕母猪进行___________处理，以给早期胚胎移入受体提供相同的生理环境。
现有A和B两个肉牛品种。要获得一头克隆牛，使其细胞主要由A细胞核和B细胞质组成:
（1）获得克隆牛的基本步骤是：从_________牛体内取出体细胞，进行体外培养。然后将供体细胞注入B品种牛的___________________时期去核卵母细胞，经过某种刺激和培养后，可形成重组胚胎胚胎，将该胚胎移入代孕母牛的子宫中，通过培育可达到目的。
（2）一般来说，要想大量获得克隆牛比较难，为解决这一问题，可以用_____________激素处理B品种母牛促使其___________。如果想获得更多相同的克隆牛，可将收集到的胚胎进行______________，一般会选取 时期的胚胎，这样得到的小牛其性别相同。
美英两位科学家因为在胚胎干细胞研究方面的“基因靶向”技术获得2007年度诺贝尔生理学或医学奖。“基因靶向”技术是指利用细胞脱氧核糖核酸（DNA）可与外源性DNA 同源序列发生同源重组的性质，定向改造生物某一基因的技术。有科研小组通过右图所示的“基因靶向”技术将小鼠棕褐色的毛色基因导入黑色纯种小鼠细胞的ES细胞中。请据图回答下列问题：
⑴ ES细胞来自第3.5天小鼠囊胚中的 （填字母）细胞，理论上该细胞具有
性。
⑵ 在胚胎移植过程中，供、受体动物选择好后，要用激素进行
的处理，使供、受体的生理状态相同，以保证移植的胚胎能够继续正常发育。
⑶ 该实验得到的带突变基因的嵌合体小鼠体内至少有 种基因型的体细胞。
⑷ 取患者的淋巴细胞（脐带血细胞）作为 细胞，插入正常的外源基因后，再回输体内，以替代、修复或纠正有缺陷的基因，这种方法称为 ；
⑸ 与该技术相似，将抗虫基因导入棉花细胞中后产生的愈伤组织可通过 培养分散成单细胞，这种细胞称为 细胞，可发育成胚状体，从而获得大量抗虫棉。
⑹ 皮肤细胞是高度分化的细胞，其分化的根本原因是 ，皮肤干细胞经诱导能分化得到多种体细胞，其物质基础是 。
如图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。
据图回答：
(1)图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用________限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含________的培养基上进行。
(2)能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是________ (填字母代号)。
| A．启动子 | B．tetR | C．复制原点 | D．ampR |
(3)过程②可采用的生物技术是________________。
(4)对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体。这利用了细胞的________性。
目前，精子载体法逐渐成为最具诱惑力的制备转基因动物方法之一，该方法以精子作为外源基因的载体，使精子携带外源基因进入卵细胞受精。下图表示利用该方法制备转基因鼠的基本流程。请据图回答：
（1）获取外源基因用到的工具酶是 ，为了提高实验成功率，通常利用 技术获得大量标记的外源基因。
（2）外源基因能够整合到精子的 上是提高转化率的关键，因为受精时只有精子的 才能进入卵细胞中。
（3）过程②采用的是 技术，该过程中应对已经导入外源基因的精子进行 处理。
（4）过程③需要在 (请写出4点)等条件下进行。由于人们对动物细胞所需营养物质还没有完全搞清楚，因此在培养细胞时需在培养基中加入 。
眼虫是一种含有叶绿体的原生动物：据此，某同学认为动物细胞与植物细胞之间在理论上是可以实现杂交的：他设计了一个具体的实验方案如图：
请回答下列有关问题：
（1）实验方案中，步骤A为除去细胞壁得到的 ，常用的除去细胞壁的药品为
（2）步骤B为___ _，受体动物必须接受 处理，以确保其生理状态适合于接受胚胎。
（3）诱导融合可以采用一些物理方法，如 等，也可以使用化学药品 来进行诱导。
（4）进行动物胚胎细胞培养时，需要用 将组织块或贴壁生长的细胞分散成单个细胞。
（5）诱导植物材料形成愈伤组织的两类关键激素是 。
下图为胚胎移植的基本程序及早期胚胎发育过程,请据图分析回答下列问题。
（1）超数排卵技术的处理措施是对供体母牛注射 ：超数排卵的母牛发情后,既可以通过配种或人工授精获得胚胎,也可以通过体外受精的方法获得胚胎。若要通过体外受精获得胚胎,则在体外受精前,要对精子进行 处理。
（2）A到E中,牛胚胎移植的适宜时期是 。
（3）若要通过胚胎移植获得遗传物质完全相同的两个新个体,可对早期胚胎进行 处理,再植入受体内。
（4）利用基因工程可以获得转基因牛,从而改良奶牛的某些性状。若要获得的转基因牛分泌的乳汁中含有人干扰素,则所构建的基因表达载体必须包括:该奶牛乳腺分泌蛋白基因的启动子、终止子、 、 和复制原点等;该过程用到的工具酶有 ：该基因表达载体应导入的受体细胞是 。
［生物——选修3：现代生物科技专题］根据所学知识回答问题：
（1）基因工程中基因表达载体除包括目的基因外，还必须有__________及标记基因等。
（2）若要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的____________中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的___________中。植物组织培养的主要原理是植物细胞具有____________，具体过程是在____________和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞培养在人工配制的培养基上，给予适宜的条件，诱导其经过____________产生愈伤组织，最终形成完整的植株。
（3）在哺乳动物的核移植实验中，通过一定的措施将受体细胞激活，使其进行细胞分裂和发育，当胚胎发育到____________阶段时，将胚胎移入受体（代孕）动物体内。
（4）生态工程是实现循环经济最重要的手段之一，请写出它遵循的基本原理（至少答两项）______。
【生物选修模块三：现代生物科技专题】
现代生物科技与人们的生活息息相关，尤其在动物品种的改良、保护濒危物种等方面得到了越来越广泛的应用。请回答下列相关问题：
（1）利用绵羊的精子和卵子进行体外受精时，所用的精子是经过 处理的。判断卵子是否受精的重要标志是 。
（2）利用早期胚胎培养技术培养大熊猫的早期胚胎时，所用培养液成分除一些无机盐和有机盐类外，还需添加维生素、激素、 、核苷酸等营养成分以及 等物质。欲增加大熊猫早期胚胎的数量，可通过胚胎工程中的 技术来实现，此技术在进行时，应注意 ；将获得的胚胎移入代孕母体内属于 技术，此技术对代孕受体的要求是 。
【生物——选修3：现代生物科技专题】下图是将目的基因导入动物细胞，培育转基因动物的常用操作程序。根据图示过程和所学知识，将下面操作程序补充完整。
（1）构建基因表达载体：在构建基因表达载体时常要用到 两种工具酶。如果目的基因要在乳腺细胞中表达，基因表达载体构建时要将目的基因与 的启动子、标记基因和终止子等组件重组在一起，其中标记基因的作用是 。
（2）获得足够数量的受精卵：为了获得足够数量的受精卵，先利用 刺激数排卵。雌鼠经过交配，将受精卵从输卵管中取出。
（3）将目的基因导入细胞：通常采用 技术将目的基因导入受精卵。
（4）早期胚胎培养：早期胚胎培养的培养液成分一般比较复杂，除一些无机盐和有机盐外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及 等物质。当胚胎培养到适宜的阶段时，可进行胚胎移植。
（5）胚胎移植：在胚胎移植前要对接受胚胎的受体进行 处理。移植后，还要对受体雌鼠进行妊娠检查。
（6）转基因鼠的检测：经过一段时间妊娠后，产下一群小鼠，为了检测哪些是转基因鼠，可以用 作探针，进行DNA分子杂交检测。
【生物——现代生物科技专题】生物工程在医疗卫生方面得到了广泛应用，请回答下列问题。
（1）利用_______技术制备的杂交瘤细胞，可用于制备单克隆抗体。与体内抗体相比，单克隆抗体具有理化性质单一、______、可大量制备等优点。
（2）干扰素、胰岛素等物质可以通过工程菌来大量生产。该技术中目的基因和运载体要用同种_______切割，以产生相同的_____。
（3）在完成体外受精的过程中，对已取得的精子要进行_______处理，为了获取更多的卵细胞，一般要对雌性个体注射______，使其超数排卵。
（4）利用细胞培养技术可以获取自身健康的皮肤，用于皮肤移植。在此过程中通入CO2的目的是________，在培养液中加入_______酶，可防止细胞出现接触抑制现象。
回答下列有关现代生物科技方面的问题：
（1）构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生黏性末端，也可能产生________末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，一般选择能使二者产生___________(相同、不同)黏性末端的限制酶。
（2）在精卵结合过程中，防止多精入卵的第二道屏障称做： 。
（3）生态经济：使一个系统产出的污染物，能够成为本系统或另一个系统的生产原料，从而实现废弃物的资源化。“无废弃物农业”体现了生态工程 原理。
（4）若要获取转基因植物人工种子，需培养到_______________阶段，再进行人工种皮的包裹；如用植物细胞实现目的基因所表达的蛋白质类药物的工厂化生产，培养到_______________阶段即可。
（5）动物克隆技术：目前动物的克隆主要采用__________________技术来实现，我国禁止生殖性克隆，但不反对________________的研究。
毛角蛋白Ⅱ型中间丝（KIFⅡ）基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。
（1）过程①中最常用的运载工具是 ，将KIFⅡ基因导入成纤维细胞的常用方法是____ 。
（2）在过程②中，用 ____处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养过程中，将成纤维细胞置于5% CO2与95%空气的混合气体环境中，CO2的作用是 。
（3）在过程③中，用 处理以获得更多的卵（母）细胞。卵（母）细胞在核移植前需要进行去核处理。
（4）在胚胎移植前，通过 技术可获得较多胚胎。移植后的胚胎能在受体子宫中存活，其生理基础是 。
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