下图为牛胚胎性别鉴定和分割示意图，请据图完成下列问题：
(1)填出图中字母所代表的结构名称：A________；C________；D________；
(2)写出甲、乙、丙过程的技术名称：甲________；乙________；丙________；进行乙过程时，所取的样本是________。
(3)进行甲过程时，所使用的基本仪器是________，本过程的技术关键是________。
(4)尽管胚胎分割技术在多种动物中取得成功，但仍然存在一些问题，如________
__________等，同时很难取得同卵多胎，成功率较高的是________。
【生物—选修3：现代生物科技专题】
动物细胞培养是动物细胞工程的基础，如图所示，a,b,c 代表动物细胞工程的几项技术①②③依次表示其结果。据图回答
（1）若a是核移植技术，①的产生反映了
（2）若b是体外受精技术，则必须对精子用一定浓度的化学药物进行 处理；所用的化学药品是 或钙离子载体A23187溶液。并且b获得的受精卵 （填可或不可）直接用于胚胎移植；如果选择牛的含X染色体 的精子进行人工授精，生产②牛的目的是 。
（3）若c是胚胎分割技术，为了提高胚胎的利用率进行胚胎分割时要平均分割的是 .否则会影响 ， 一般情况下③中个体的基因型和表现型 。
（4）按照a是核移植技术，b是体外受精技术，c是胚胎分割技术，则①②③属于
无性生殖的是 。
(1)科学家将外源基因导入绵羊的受精卵中，常用的方法是____________。由于外源基因可能随机插入到受精卵的DNA中，因而有时会导致早期胚胎死亡，最可能原因是
______________________________________________________________________。
(2)从早期胚胎或原始性腺分离出来的一类体积小、核大具有发育的全能性的细胞是__________。
(3)若要获得遗传物质完全相同的两个新个体，可对发育到桑椹期或囊胚期阶段的早期胚胎进行______________处理，经过“最后一道工序”________________，植入到受体母绵羊体内。
(4)我国在“863”计划资助下开展Bt抗虫棉、抗虫水稻等研究，可以减少农药、杀虫剂的使用，这将对____________________起到重要作用。生态工程所遵循的基本原理有物质循环再生、整体性、________________、________________及系统学和工程学原理等原理。
继哺乳动物乳腺发生器研发成功后，膀胱生物发生器的研究也取得了一定进展。最近，科学家培养出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。请回答：
（1）将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞，常用方法是___________。
（2）进行基因转移时，通常要将外源基因转入___________中，原因是_____________
_____________________________________。
（3）通常采用_____________技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组。
（4）在研制膀胱生物反应器时，应使外源基因在小鼠的__________细胞中特异表达，所以一般在基因表达载体中插入特异性表达的启动子，另外该基因表达载体中还应含有________________、______________、________________。
下图是培养生产药物的乳腺生物反应器转基因动物的过程，请完成下列各题。
（1）①是含有人凝血因子Ⅸ基因的质粒,为了使凝血因子Ⅸ基因在羊恰当的细胞中表达，a片段应为羊 启动子，其是 识别和结合的位点。②中是根据 基因表达的性状筛选出的细胞。
（2）从白脸羊体内分离出的细胞要经过胰蛋白酶或 酶处理再进行培养，培养时要考虑 的环境；营养；温度、pH和 环境等外部条件。
（3）③表示 细胞，⑥表示的胚胎是 。
（4）⑥在受体母羊子宫内正常发育的生理基础是：第一，受体为胚胎提供正常发育的生理环境；第二，受体对移入子宫的胚胎基本不发生 反应；第三，供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系。
图1和图2分别表示两种获取胚胎干细胞的途径。图1表示的是科学家把4个与胚胎发育相关的特异性基因导入成年小鼠细胞，培养出了诱导多潜能干细胞，称为iPS细胞，类似于胚胎干细胞样细胞，再将iPS细胞转入小鼠乙体内培养，结果如图所示。图2表示研究人员利用小鼠（2N="40)" 获取单倍体胚胎干细胞的一种方法，哺乳动物单倍体胚胎干细胞技术是遗传学研究的新手段。请分析并回答下列问题：
（1）图1过程中，通常选择传代培养 代以内的成纤维细胞导入特异性基因；成纤维细胞转变为iPS细胞，类似于植物组织培养中的 过程。
（2）克隆培养iPS细胞时，需要加入一定量的 ，以防止杂菌污染。早期研究发现在 iPS 细胞诱导培养的过程中会出现大量不具备干细胞功能的细胞，若用维生素C处理，能显著提高iPS细胞的诱导成功率，推测其原因是 。
（3）研究人员将iPS细胞团注射入缺乏T细胞的小鼠体内，细胞团能继续生长。由此可推测图1中iPS细胞团逐渐退化的原因是 。
（4）图2中，研究人员需要对实验小鼠丙注射促性腺激素使其 ，从而获得更多的卵母细胞，再利用SrC12溶液处理、激活卵母细胞，并在体外培养至［④］ 期，再利用流式细胞仪筛选出单倍体细胞。
（5）研究发现，单倍体胚胎干细胞也能分化，形成不同功能的细胞、组织和器官，该技术培育的单倍体动物可成为研究 （填“显性”或“隐性”）基因功能的理想细胞模型。
为治疗某种遗传性糖尿病，研究人员完成如下工作。
（1）图1中①是取自患者体细胞的________，过程②表示________技术。
（2）图1中过程③表示________技术，此过程需要用到的工具是________________。
（3）为检测胰岛样细胞是否具有胰岛B细胞的正常生理功能，研究人员分别控制甲、乙两组培养液中__________的浓度，将胰岛样细胞先后放在甲、乙两组培养液中，保温相同时间后检测胰岛素的分泌量。若诱导成功，则图2中甲组应为______________情况下测得的胰岛素分泌量，理由是_______________。
1981年Evans和Kaufman首次成功分离出小鼠胚胎干细胞(ES细胞)，医学界对其的研究虽颇有争议但也如火如荼。2008年1月17日《干细胞》杂志报道，美国加州的科学家使用了进行试管受精的年轻女性捐献的卵子去核，以及2名志愿者的皮肤成纤维细胞的细胞核，成功克隆出了5个人体胚胎，进而可以开发出有研究价值的干细胞。请回答下列问题。
(1)胚胎干细胞是从动物胚胎发育至囊胚期的________或胎儿的________中分离得到的一类细胞。
(2)上述过程中主要应用的动物细胞工程技术有____________、________。
(3)胚胎干细胞可诱导分化为皮肤干细胞，进而分化成皮肤细胞的根本原因是_____________________。
(4)某患者不能产生正常的白细胞，通过骨髓移植可以达到治疗的目的，骨髓移植治疗的实质是将________移植到患者体内。
(5)在培养胚胎干细胞时，培养基中通常需要加入______等天然成分，培养过程中所需气体主要有________。
(6)胚胎干细胞也可作为基因工程的受体细胞，将目的基因导入胚胎干细胞最常用的方法是________，将获得的目的基因转入胚胎干细胞前需构建基因表达载体，其目的是______________________。
某正常夫妻生下的一个血友病男孩，不幸在一次意外中大量失血死亡。该夫妻想借助试管婴儿技术再生一个健康孩子。请结合你所学的知识帮他们解决有关问题：
（1）人类精子的形成是从 期开始，直到生殖机能减退；而女性卵泡的形成和在卵巢内的储备，是在 （时期）完成的，这是精子和卵子发生上的重要区别。
（2）在体外受精时，精子首先要进行 处理，精子与卵子在体外受精后，应移入发育培养液中继续培养，以便检查受精状况和受精卵的发育能力。
（3）人的体外受精胚胎，在8-16个细胞阶段可以移植，而牛、羊一般要培养到 阶段才能移植。
（4）你建议这对夫妇选择 性胎儿，这需要在胚胎移植前，取1-2个细胞观察 或做DNA分析来做性别鉴定。
2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白（GFP）方面做出突出贡献的科学家。绿色荧光蛋白能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光，这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能。下图为我国首例绿色荧光蛋白（GFP）转基因克隆猪的培育过程示意图，据图回答：
注：图中通过过程①、②形成重组质粒，限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。
（1）在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接 ，理由是： 。
（2）如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因，其作用是 。可以利用转基因克隆猪技术解决的医学难题是，在器官移植中可以避免 。
（3）上述图中转基因克隆猪运用了基因工程、 、 等生物技术。
（4）目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白，黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是： （用数字表示）。①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列③蓝色荧光蛋白基因的修饰（合成）④表达出蓝色荧光蛋白。
请回答有关胚胎工程相关的问题：
（1）试管动物技术是指通过人工操作使 ，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植产生后代的技术。
（2）自然条件下哺乳动物刚刚排出的精子不具有受精能力，必须在 （场所）获能后才具有受精能力。
（3）胚胎移植是指将雌性动物体内的早期胚胎，或者通过 及其它方式得到的胚胎，移植到 相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。
（4）哺乳动物的胚胎干细胞是从早期胚胎或原始性腺中分离出来的，它在形态上，表现为体积小、 。
(12分)【生物——现代生物科技专题】
牛结核病是一种慢性传染病，在世界范围内广泛传播，来自于小鼠的SP110基因能够抑制牛结核分枝杆菌的增殖。下图是培育抗结核病转基因克隆牛的流程图。请据图回答：
(1)培育过程中涉及到的细胞工程技术有_________________、_____________。
(2)重组质粒由目的基因、____________、____________、标记基因等组成，过程I最常用的方法是_____________________。
(3)过程Ⅱ的胚胎培养液中除无机盐、有机盐和营养成分外，还需要添加_________等天然成分。
(4)过程III表示诱导成纤维细胞与处于____________期的去核卵母细胞融合。重组胚胎通过_________技术移入受体母牛子宫内，暂时不移入的可使用__________方法保存。
(5)若要提高重组胚胎的利用率，可对__________期的胚胎进行分割。
[生物──选修3：现代生物科技专题] （除标注外，每空2分，共15分）
科学家利用细胞工程培育了“白菜—甘蓝”杂种植株，如图所示，请据图回答下列问题：
（1）由D形成F过程所依据的原理是________________，从本质上讲，“白菜—甘蓝”杂种植株具有的性状是________________________的结果。
（2）图中D细胞形成的标志是________________，若“白菜—甘蓝”杂种植株为四倍体，则该植株的花粉经离体培养得到的植株是________倍体。
（3）“白菜—甘蓝”杂种植株的食用部分是叶，但叶又易受昆虫危害而影响产量，科学家又利用基因工程培育出带有抗虫基因的“白菜—甘蓝”植株，请你设计实验，检测此植株的抗虫基因是否表达。
① 取昆虫幼虫放到带有抗虫基因的“白菜—甘蓝”植株甲上，再取等量生活状态基本一致的昆虫幼虫放在________________________________植株乙上。
② 适宜条件下培养一段时间后，分别观察__________________________________的生活情况。
③ 若___________________，说明甲植株的抗虫基因未得到表达；若______________，说明甲植株的抗虫基因得到表达。
Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图：
(1)步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的________。
(2)步骤②中，重组胚胎培养到________期时，可从其内细胞团分离出ES细胞。
(3)步骤③中，需要构建含有Rag2基因的表达载体。可以根据Rag2基因的________设计引物，利用PCR技术扩增Rag2基因片段。用Hind Ⅲ和Pst Ⅰ限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段。为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有________________酶的酶切位点。
(4)为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的________，用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验。
请回答下列有关胚胎工程和生态工程的相关问题：
（1）雌性排卵时，减数第一次分裂尚未完成，此时卵子处于 卵母细胞阶段。当该细胞发育至减数第二次分裂 期时，才具备受精能力。若在卵细胞膜和透明带之间看到两个极体，则表明 过程已发生。
（2）若某对夫妇结婚后发现妻子双侧输卵管堵塞，无奈需进行试管婴儿技术，该技术
括____________和____________。
（3）2015年3月，柴静的纪录片《穹顶之下》引发全国人民对雾霾的关注和讨论，而山西作为产煤大省，生态环境破坏严重，请问矿区废弃地的生态恢复工程的关键在于____________，具体措施有_________________，（举例说明，任答两种）利用了的生态工程原理是_________________。
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