下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性基因，BamHI、HindIII、Sma I直线所示为三种限制酶的酶切位点。据图回答：
（1）图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用__________限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含____________的培养基上进行。能驱动人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控因子是图中的____________。过程①采用的操作方法通常是_____________。
（2）过程②代表的生物技术是_____________。对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体。目前最常见的是经分割产生的同卵______胎。
（3）为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用____________技术。
（4）对代孕牛的要求是_________________。
克隆羊的成功轰动世界，它不仅奠定了疾病克隆性治疗的基础又解决了器官移植中供体不足的问题，同时也给人类带来了一些过去尚未遇到的问题。下图为人类对克隆羊技术的拓展图和应用。请据图回答问题。
（1）图中所涉及的现代生物技术有________、__________和________________等。
（2）图中婴儿长大后，外貌、性别和其他特征与原型男人相同，这说明________具有全能性。
（3）使用培养基进行胚胎干细胞培养时，通常要加入____________等天然成分，除了保证被培养细胞处于无菌、无毒及充足氧气的环境中，还需要保证细胞生活所需的________；早期胚胎发育在________阶段以前的细胞是全能细胞。
（4）图中从“内细胞团到胚胎干细胞”的培养过程中，必须用________处理内细胞团，使之分散成单个细胞。干细胞形成组织、器官必须要进行________和________。
【生物—选修模块3：现代生物科技专题】
根据以下材料回答相关问题：
材料一：经过一个世纪的发展，植物细胞工程技术解决了人类生存的关键问题（如粮食问题、花卉苗木生产等），为人类创造了巨大的财富。
（1）用植物花药进行离体培养时，要经过_____________过程才能培育成单倍体幼苗。要获得正常植株还需要用____________对幼苗进行处理。
（2）枣庄的优质石榴、长红枣等植物的生产都可以通过微型繁殖技术来提供试管苗，其优点是不仅可以__________,还可以高效快速的实现无病毒种苗的大量繁殖。
材料二：中科院动物所和福州大熊猫研究中心合作，通过将大熊猫的细胞核植入去核的兔子的卵母细胞中，在世界上最早克隆出一批大熊猫早期胚胎，这表明我国的大熊猫繁殖研究再次走在世界前列。
（3）克隆大熊猫过程中使用的生物技术手段有_______________（至少写三种）。
（4）实验中选取兔子的卵母细胞实际是处于______________期的卵母细胞。如果的多个供体细胞来着同一只大熊猫，培育的这些大熊猫在性状上也不完全相同，分析其原因，下列叙述中不正确的是（ ）
| A．性状变异可由环境条件引起 |
| B．基因可能会发生突变 |
| C．受体细胞的细胞质基因不同 |
| D．细胞核基因发生了重组 |
（5）用于核移植的供体细胞一般选用传代10代以内的细胞，是因为这些细胞 。
目前，精子载体法逐渐成为最具诱惑力的制备转基因动物方法之一，该方法以精子作为外源基因的载体，使精子携带外源基因进入卵细胞受精。下图表示利用该方法制备转基因鼠的基本流程。请据图回答：
（1）获取外源基因用到的工具酶是 ，为了提高实验成功率，通常利用 技术获得大量标记的外源基因。
（2）外源基因能够整合到精子的 上是提高转化率的关键，因为受精时只有精子的 才能进入卵细胞中。
（3）过程②采用的是 技术，该过程中应对已经导入外源基因的精子进行 处理。
（4）过程③需要在 (请写出4点)等条件下进行。由于人们对动物细胞所需营养物质还没有完全搞清楚，因此在培养细胞时需在培养基中加入 。
精子内的顶体由溶酶体特化而来。精卵识别后，顶体膜与精子细胞膜融合，释放溶酶体酶使卵子外层形成孔洞，以利于精卵融合形成受精卵。下列叙述正确的是（ ）
| A．精子游向卵子所需的能量来自线粒体和细胞质基质 |
| B．顶体内储存的溶酶体酶是在精子的溶酶体中合成的 |
| C．顶体膜和精子细胞膜融合体现生物膜的选择透过性 |
| D．受精卵中的遗传物质一半来自父方另一半来自母方 |
高等哺乳动物受精后不久，受精卵开始进行细胞分裂。经桑椹胚、囊胚、原肠胚和组织器官的分化，最后发育成一个完整的幼体，完成胚胎发
育的全过程，有关叙述错误的是（ ）
| A．图是胚胎发育过程中囊胚期示意图，①②③依次称之为透明带、滋养层、内细胞团 |
| B．高等哺乳动物早期胚胎发育经历的时期是受精卵→桑椹胚→囊胚期→原肠胚期 |
| C．高等哺乳动物胚胎发育中的细胞分化开始于囊胚期，终止于生命结束 |
| D．进行胚胎分割时，只能选择桑椹胚期的胚胎进行 |
【选修—3：现代生物科技专题】
试管婴儿技术为不孕夫妇带来了福音。试管婴儿技术首先要做的是体外受精和早期胚胎培养。请回答下列问题：
（1）当获能后的精子和卵子相遇时，首先发生 反应，释放出有关的酶直接溶解 之间的物质，形成精子穿越放射冠的通路。防止多精入卵的生理反应有 、 。
（2）在体外培养受精卵时，除了给予一定量的 以维持细胞呼吸外，还需要提供
气体以维持培养液的正常pH。母体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生 ，这为胚胎在母体内存活提供了可能。
（3）某女性患有输卵管阻塞，结婚后借助试管婴儿技术，一次生出两个孩子，如图所示。
①进行过程X时，来自母方的卵子要培养至 期。
②若要借助胚胎分割技术获得这样两个胎儿，可以选用囊胚期的胚胎进行分割，操作过程需要特别注意的问题是 。
根据所学知识回答问题：
（1）基因工程中基因表达载体除包括目的基因外，还必须有__________及标记基因等。
（2）若要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的_________中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的___________中。植物组织培养的主要原理是植物细胞具有____________，具体过程是在____________和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞培养在人工配制的培养基上，给予适宜的条件，诱导其经过____________产生愈伤组织，最终形成完整的植株。
（3）在哺乳动物的核移植实验中，通过一定的措施将受体细胞激活，使其进行细胞分裂和发育，当胚胎发育到____________阶段时，将胚胎移入受体（代孕）动物体内。
（4）生态工程是实现循环经济最重要的手段之一，请写出它遵循的基本原理（至少答两项） 。
关于“克隆羊”、“试管羊”、“转基因羊”的说法合理的是（ ）
| A．它们在形成过程中，一般都有卵（母）细胞的参与 |
| B．它们的遗传物质都只来自于一个亲本 |
| C．它们是通过相同的生殖方式获得的 |
| D．在培育过程中，都用到了动物细胞培养技术、核移植技术和胚胎移植技术 |
试管牛、组培紫罗兰苗和克隆羊均属于现代生物科技的成果，三者共性为（ ）
| A．都用到细胞工程技术 | B．都用到胚胎移植技术 |
| C．都属于无性生殖范畴 | D．都体现了体细胞的全能性 |
科学家培育克隆羊时，使用了三种细胞核的供体细胞，分别将这些细胞核移入去核卵细胞的细胞质中，形成重组细胞，发育成重组胚胎，这些重组胚胎的发育情况如下。
| 细胞核的供体细胞类型 |
妊娠数/受体母羊数 |
| 乳腺上皮细胞 |
1/13 |
| 胚胎成纤维细胞 |
4/10 |
| 早期胚胎细胞 |
14/27 |
据此分析不正确的是（ ）
A．早期胚胎细胞作为细胞核的供体细胞妊娠成功率最高
B．克隆羊的遗传信息与细胞核的供体细胞完全相同
C．体细胞核移植难度高于胚胎细胞核移植
D．重组细胞发育与去核卵细胞的细胞质有关
下图是转基因绿色荧光鼠的培育过程，据图回答相关问题：
（1）现有GFP基因转录得到的mRNA，获取GFP基因通常采用 法。
（2）过程①是转基因技术的核心步骤，为使GFP基因在小鼠细胞中高效表达，需要构建重组表达载体，重组表达载体包括复制原点、 等。
（3）③过程在使用合成培养基进行培养时，除了水、无机盐、氨基酸，葡萄糖、还要加入 等天然成分。
（4）②过程的受体细胞为 ，在转录水平上检测GFP基因是否表达的方法是 。
（5）④过程通过胚胎移植技术实现。移植前需要对代孕母鼠进行 处理，科学家欲获得多个相同性状的绿色荧光小鼠，则应该选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚，将其移人盛有操作液的培养皿中，然后用 技术处理。
阅读如下材料：
资料甲：传统哺乳动物的胚胎干细胞是经由核移植构建成重组胚胎过程中获得的。
资料乙：现代在哺乳动物的体细胞中导入4个多能性相关的基因、2种特殊组蛋白的基因，在添加特殊化合物的培养基中培养，能快速获得诱导性多能干细胞（iPS）。但是，这种方法诱导的多能干细胞必须应用逆转录病毒才能进行基因组整合。
资料丙：应用iPS已经成功培养和分化出心肌、神经、胰腺、骨等多种体细胞和不同的组织，多能干细胞的研究在器官再生、修复和疾病治疗方面极具应用价值。
回答下列问题：
（1）胚胎干细胞是从动物胚胎发育至_________期的内细胞团或胎儿的_________中分离得到的一类细胞。
（2）iPS建立的过程需将病毒介导后的细胞种植于___________细胞上，并于ES细胞专用培养体系中培养，以维持不分化状态；所用逆转录病毒相当于基因工程中的__________工具，且病毒应对生物体_________。
（3）在体外培养条件下，培养液中加入 因子，可诱导iPS向不同类型的组织细胞分化，分化的实质是细胞中基因___________的结果。
（4）用上述两种方法获得的自体干细胞诱导分化形成的相应组织、器官进行移植，比传统器官移植的优点是可避免发生___________反应。
动物乳腺生物反应器是一项利用转基因动物的乳腺代替传统的生物发酵，进行大规模生产可供治疗人类疾病或用于保健的活性蛋白质的现代生物技术．目前科学家已在牛和羊等动物的乳腺生物反应器中表达出了抗凝血酶、血清白蛋白、生长激素等重要药品．大致过程如图所示：
（1）在过程③中需要用到的工具酶有 ．要使人的药用蛋白基因在奶牛乳腺细胞中特异性表达，完整的基因表达载体要包括目的基因、 、标记基因等部分．
（2）要实现超数排卵，应在性成熟雌牛发情周期的某一阶段用 处理．通过①采集的精子不能直接使成熟的卵子受精，原因是 ．
（3）将获得的重组细胞培养成早期胚胎后，移植到经过 处理的受体母牛子宫内．因为我们对细胞所需的营养条件还没有完全搞清楚，所以，在早期胚胎的培养基中，往往还需要添加 ．
（4）若要一次获得多只完全相同的转基因牛，应采用胚胎分割移植技术．在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，应注意将 均等分割．胚胎分割移植后发育成小牛，这些小牛的基因型 （填“相同”或“不同”）．
如图表示改造哺乳动物遗传特性的三种途径。相关叙述错误的是（ ）
| A．获得动物1的受体细胞通常是受精卵 |
| B．动物2体内各体细胞的基因种类相同 |
| C．获得动物3的重组细胞具有全能性 |
| D．上述动物的获得均需运用胚胎移植 |
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