内蒙古白绒山羊的血管内皮生长因子基因（VEGF164），若在皮肤毛囊细胞中特异性表达，可促进毛囊发育和毛发生长，显著提高羊毛产量。科学家将该基因导入羊胎儿的成纤维细胞核，成功培育出转基因克隆山羊。技术流程如下图，其中EcoRⅠ、SalⅠ、SphⅠ为限制酶。
请据图回答。
⑴在构建基因表达载体的过程中，应采用______（填限制酶名称）对质粒和含绿色荧光基因的DNA片段进行酶切，再经相应处理形成重组质粒。其中绿色荧光基因的作用是______。
⑵要使VEGF164在皮肤毛囊中表达，须将它与羊绒蛋白基因的______等调控组件重组起来，构建基因表达载体。
⑶图中①将基因表达载体导入胎儿成纤维细胞核的方法是______。将导入成功的细胞核注入到去核的卵母细胞构成重组细胞，培养成早期胚胎，经图中②______技术可培育成转基因克隆山羊。
据报道，英国科学家从人的皮肤细胞中提取出细胞核，植入剔除了细胞核的牛卵细胞中，从而培育出人兽混合胚胎。从遗传学角度来看，这种混合胚胎中有99.9％的遗传物质来自人，只有0.1％来自牛。你认为这0.1％的遗传物质最可能存在于牛卵细胞的
| A．细胞核 | B．线粒体 |
| C．叶绿体 | D．核糖体 |
请回答有关下图的问题:
(1)图甲中①~⑤所示的生物工程为 。
(2)如图乙,一个基因表达载体的组成,除了目的基因外,在基因尾端还必须有[2] ;图中[3] 的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来。
(3)若预期蛋白质欲通过乳腺生物反应器生产,则构建基因表达载体时,图乙中序号[1]代表的是 ;且在图甲中⑨过程之前,要对精子进行筛选,保留含性染色体 的精子。
(4)为获得较多的受精卵进行研究,图甲中⑥过程一般用激素对供体做 处理;若图甲中的卵母细胞来自从屠宰场收集的卵巢,则其在⑧之前需进行体外培养到 期方能受精。
(5)用 技术处理发育到桑椹胚期或囊胚期的早期胚胎,可获得同卵双胎或多胎。
下列有关胚胎移植的叙述中，错误的是（ ）
| A．受孕母畜体内的受精卵和胚胎均能移植 |
| B．受体母畜必须与供体母畜处于同步的发情状态 |
| C．超数排卵技术要使用一定的激素 |
| D．试管婴儿只是受精和早期胚胎发育过程在试管中进行 |
因为猪的基因和人类的基因存在一定相似度,据报道经过特殊处理的猪皮可在人身上存活3周左右,起到保护创面免受感染的作用。移植猪皮后,还要在猪皮上开很多小口,移植患者的自体皮放入其中,自体皮慢慢生长,覆盖裸露的皮肤,而猪皮最终会掉光。为了使移植的猪皮存活更长时间,有人设法导入人的相关基因(用P表示),获得转基因小白猪。其简单流程如下图所示:
(1)过程①中形成重组DNA常用的酶有 和 ;将目的基因导入成纤维细胞常用的方法是 。
(2)过程②中,常用 酶处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养成纤维细胞时需要满足的条件是无菌、无毒的环境、 、温度和pH、 。
(3)过程③中所用的胚胎工程技术是 ,然后将早期胚胎移入另一头与供体 ,但未经配种的代孕母猪的相应部位。
(4)图中的卵母细胞应在体外培养到 期。
下图为培育“试管山羊”的基本过程示意图，下列有关叙述正确的是（ ）
| A．甲过程中可通过给母山羊注射促性腺激素使其超数排卵 |
| B．乙过程必须在专用的受精溶液中完成 |
| C．丙过程与乙过程中应采用相同成分的培养液 |
| D．丁过程中必须将早期胚胎移植到与供体性状相同的代孕母羊子宫内 |
下列关于胚胎发育和胚胎工程的叙述,正确的是( )
| A．胚胎干细胞具有发育全能性,它一般都能分化出成体动物 |
| B．滋养层细胞发育成胚胎的附属结构或胚外结构是在囊胚期 |
| C．早期囊胚经酶处理得到的细胞能直接进行胚胎移植 |
| D．人工繁殖获得试管动物的主要技术包括核移植和胚胎移植 |
用于核移植的供体细胞一般都选用（ ）
| A．受精卵 |
| B．传代10代以内的细胞 |
| C．传代10——50代以内的细胞 |
| D．处于减数分裂第二次分裂中期的次级卵母细胞 |
软骨发育不全为常染色体显性遗传病，基因型为HH的个体早期死亡。一对夫妻均为该病患者，希望通过胚胎工程技术辅助生育一个健康的孩子。下列做法错误的是（ ）
| A．首先经超排卵处理后进行体外受精 |
| B．从囊胚中分离细胞，培养后检测基因型 |
| C．根据检测结果筛选基因型为hh的胚胎 |
| D．将胚胎培养至原肠胚期后移植到子宫 |
科学家利用小鼠胚胎干细胞成功制造了直径大小约为3mm的“胃”，这一研究成果对器官移植技术的发展意义重大，该成果说明
| A．胚胎干细胞具有无限增殖的能力 |
| B．胚胎干细胞经诱导可发生定向分化 |
| C．胚胎干细胞的全能性得以表达 |
| D．胚胎干细胞内的所有基因表达都很活跃 |
【现代生物科技专题】人组织纤溶酶原激活物（htPA）是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下：
（1）htPA基因与载体用_________切割后，通过DNA连接酶连接，以构建重组表达载体。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用_________技术。
（2）为获取更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其__________。采集的精子需要经过__________，才具备受精能力。
（3）将重组表达载体导入受精卵常用的方法是__________。为了获得母羊，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行__________。利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体，这体现了早期胚胎细胞的__________。
（4）若在转ht-PA基因母羊的羊乳中检测到__________，说明目的基因成功表达。
随着人们生活水平的提高，乳制品需求越来越大，为了扩大生产，提高产崽率，要进行良种牛的培育。下图为胚胎移植的基本程序及早期胚胎发育过程，请据图回答：
（1）用________激素处理使供，受体母牛同期发情。
（2）冲卵实质上是用特定装置将供体母牛子宫内的________冲洗出来。
（3）从A到E中，适宜于牛的胚胎移植时期有________。
（4）图中标号3为________，它将来发育为胎膜和胎盘。
（5）若一次给受体母牛移入多个胚胎，产生的多个后代基因型相同吗？为什么？_____________________
（6）若对A细胞利用基因工程技术加以改造，将人的血清白蛋白基因导入，在成体的雌牛的乳汁中提取出人血清白蛋白。该基因工程操作的基本步骤是___________________________。
（7）对于植物来说，导入外源基因，容易引起基因污染，科学家就将外源基因导入叶绿体或线粒体内，原因是________________________________________________________________________。
下图为人体某早期胚胎细胞所经历的生长发育阶段示意图，图中①～⑥为各个时期的细胞，a、b、c表示细胞所进行的生理过程。据图分析，下列叙述中不正确的是
| A．医学家们正尝试利用①治疗某些顽疾，是因为①具有再生各种组织、器官的潜能 |
| B．与①相比，②的表面积/体积的值下降，与外界环境进行物质交换的能力也减弱 |
| C．③④分别演变成⑤⑥的过程中，它们的细胞核遗传物质相同，表达的基因也相同 |
| D．⑤⑥是高度分化的细胞，它们的细胞核体和增大、染色质收缩时，细胞进入衰老阶段 |
Ⅰ、长期以来优良种畜的繁殖速度始终是限制畜牧养殖业发展的瓶颈，近年来发展起来的细胞工程技术和胚胎工程技术为优良种畜的快速繁殖带来了无限生机。下面是科学家快速繁殖良种奶牛的两种方法，请据图回答：
（1）在试管牛E和克隆牛G的培育过程中都必须用到的两项技术是________和 ______________。
（2）__________作用激活次级卵母细胞完成减数第二次分裂。
（3）科学家将人的α—抗胰蛋白酶基因转入上图的重构卵中，发现克隆牛G的乳汁中含人的α—抗胰蛋白酶，说明 __________________________得到表达。
（4）培育中要对母牛D注射________激素，其目的是______________________ ，以便将胚胎移至母牛D的子宫内。
Ⅱ、供体器官的短缺和排斥反应是制约器官移植的两个重要问题。而治疗性克隆能最终解决这两个问题。下图是治疗性克隆的过程图解：
(1)请在上图中横线上填上适当的术语：①_____________；②____________。
(2)上图中③、④表示的生理过程是_____________________。
有关哺乳动物胚胎干细胞的叙述，错误的是
| A．可由早期胚胎中分离出来 |
| B．只能分化为成年动物体内某种特定的组织细胞 |
| C．可由原始性腺中分离出来 |
| D．可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞 |
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