犬细小病毒（Canine Parvovirus，CPV）主要感染幼犬，传染性极强，死亡率极高。犬细小病毒单克隆抗体（CPV McAb）可抑制病毒对宿主细胞的侵染及病毒的复制,进而杀灭犬体内病毒。请回答：
（1）在单克隆抗体CPV McAb的制备过程中，所用到的细胞工程技术除了动物细胞融合之外还有 技术。
（2）给成年鼠注射CPV ，一段时间后，若鼠血清中抗 的抗体检测呈阳性，说明体内产生了 反应。
（3）将小鼠的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，获得能分泌CPV McAb的杂交细胞的过程中至少要进行两次筛选，一次是通过 培养基筛选出杂交细胞，另一次是通过 筛选出能分泌CPV McAb的杂交细胞。
（4）通过上述方法得到的单克隆抗体可快速准确地识别CPV ，其原因是该抗体具有 的特点。
选取A、B植株的细胞进行如下图操作，请回答问题:
(1)实现图中的①过程最常用的方法是________。
(2)②过程的发生，必须进行____________,其方法有____________法和____________法。
(3)若细胞A内含a个染色体，细胞B内含b个染色体，则“杂种细胞”内含________个染色体；若A、B植株采用常规杂交育种方法成功的话，得到的后代含_____个染色体，必须用_____________来处理幼苗，才能得到可育的杂种植株，其中含有_____个染色体。这两种方法相比，体细胞杂交方法的优点是：________________________________。
(4)如果原生质体A为小鼠的浆细胞，原生质体B为小鼠的骨髓瘤细胞，诱导二者融合时，独特的方法是用 处理。
人的血清白蛋白（HAS）在临床上需求量很大，通常从血液中提取。应用现代生物科学技术，将人的血清白蛋白基因导入奶牛细胞中，那么利用牛的乳汁生产血清白蛋白会安全、高效地满足人类需求。下图是利用牛奶乳汁生产人类血清白蛋白的图解，根据下图回答：
（1）以上过程涉及到的动物细胞工程技术有 。
（2）在此基因工程中，获取血清白蛋白基因的主要方法有 （至少答两种）。在①进入③之前要构建基因表达载体，这是基因工程的核心，除目的基因外，基因表达载体还必须含有 ，将①导入③的常用方法是 。
（3）图中②一般经过 处理可以得到③，从③到④的过程中一般利用
作为受体细胞，但要进行去核处理，一般选择在 时期进行。
（4）将⑤送入⑦的最佳时期是 。
根据所学生物学知识回答：
⑴如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的 中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的 上。
⑵目前临床上使用的红细胞生成素(一种糖蛋白，用于治疗肾衰性贫血)主要来自基因工程技术生产的重组人红细胞生成素(rhEPO)。检测rhEPO的体外活性需用抗rhEPO的单克隆抗体。分泌该单克隆抗体的 细胞，可由rhEPO免疫过的小鼠 细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成。
⑶在“试管牛”的培育过程中，采用激素处理可使良种母牛一次排出多枚卵母细胞，最常用的激素是 。从良种公牛采集的精子需 后才能进行受精作用。在胚胎移植前，通过 技术可获得较多胚胎。
⑷生态系统内即使某个物种由于某种原因而死亡，也会很快有其他物种占据它原来的生态位置，从而避免系统结构或功能失衡。这体现了生态工程的什么原理( )(1分)
| A．协调与平衡原理 | B．物种多样性原理 |
| C．物质循环再生原理 | D．整体性原理 |
[生物——选修3：现代生物科技专题]
油菜的株高由等位基因G和g决定，GG为高杆，Gg为中杆，gg为矮杆。B基因是另一种植物的高杆基因，B基因与G基因在油菜的株高上有相同的效果，并且株高与这两个基因的数量正相关。下图是培育转基因油菜的操作流程。请回答下列问题：
（1）构建表达载体需用的工具酶有
（2）经转化获得的农杆菌能够侵染油菜细胞并将插入了B基因的 整合到受体细胞的 上。可用含 的培养基来筛选含有目的基因的油菜受体细胞。培育转基因油菜主要运用了转基因技术和 技术。
（10 分）请回答下列有关生物工程的问题：
（1）对于基因工程来说，其核心步骤是________，若要培育能从乳汁中分泌人的干扰素的转基因牛，需要选择的受体细胞是____________（受精卵、乳腺细胞），为了让转入的干扰素基因高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的和之间。
（2）植物体细胞杂交过程中，在把植物细胞杂交之前，必须用纤维素酶果胶酶去除细胞壁，杂交过程的另一个环节是__________________；培育出诸如“番茄—马铃薯”这样的杂种植株利用了植物细胞全能性的原理。胚胎干细胞也有类似的特性，并且胚胎干细胞在体外培养的条件下，可以增殖而不发生。
（3）在进行单克隆抗体的生产过程中，要把两种细胞进行融合，这两种细胞一种是在体外能够大量增殖的骨髓瘤细胞，另外一种是_____的B 细胞；体外培养的过程中，贴壁生长的细胞会出现_________现象。
（4）在“试管牛”的培育过程中，要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行处理，使其 。另外，培养的卵母细胞需要发育至 期。
某生物兴趣小组对一种抗癌新药进行实验时，以动物肝癌细胞为材料，测定抗癌药物对体外培养细胞增殖的影响。请回答下列有关动物细胞培养的问题。
(1)在动物细胞培养时，将细胞所需的营养物质按其种类和所需数量严格配制而成的培养基称为________培养基。通常在培养基中还需要加入适量________等一些天然成分。细胞培养应在含5% CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是________________。另外，还应该保证被培养的细胞处于________、________的环境。
(2)若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需要用________处理。
(3)在细胞生长过程中，当细胞贴壁生长到一定程度时，其生长会受到抑制，这种现象称为________。
(4)为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的________。
(5)请你帮助兴趣小组的同学分析本实验，实验的自变量是________，实验组和对照组除了自变量不同外，其他处理均应该相同，这是为了遵循实验设计的________原则。
下图是单克隆抗体制备的过程，请据图回答下列问题。
(1)单克隆抗体制备的技术原理有________和________。
(2)从小鼠体内提取B淋巴细胞之前，需对小鼠______________________________________。
(3)与原生质体诱导融合相比，诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的特有方法是________。
(4)①细胞是________细胞。欲想筛选出①细胞，需向培养基中加入一定的物质以抑制骨髓瘤细胞的________，从而抑制骨髓瘤细胞的分裂。
(5)杂交瘤细胞具有既能________，又能________的特点。
为了探究苦马豆素（SW）对肝癌细胞体外生长的作用，研究员做了以下实验：
材料与用具：小鼠肝癌组织、SW、rpmi-1640培养液（用于培养癌细胞）、生理盐水、活细胞检测仪、培养皿等（说明：对动物细胞的培养过程和检测方法不做具体要求）
（1）完善实验步骤：
①配制细胞悬液：用胰蛋白酶将小鼠肝癌组织消化成单个细胞，加入________________配制成单细胞悬液，随机均分为若干组，并各组测定初始细胞数；
②实验分组： ；
③培养：以上各级置于37oC、5％的二氧化碳培养箱中分别培养；
④检测与处理：分别在24h、48h、72 h时取样检测各组存活的细胞数，求细胞存活率(细胞存活率=实验组/对照组×l00％)。请分析回答：
（2）请你设计一张表格，用以记录和处理实验数据。
（3）下图表示本实验结果的坐标曲线图，据图你能得出结论是___________。
下图是绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程图，请据图回答下列问题。
(1)②过程用到的工具有______________________________________。
(2)③过程常用的具体方法是_____________________________。
(3)重组质粒中除含有目的基因外还要含着________、标记基因。
(4)图示过程中涉及的具体技术手段有________、________、_________。
(5)该重组细胞培养至一定阶段可通过________方法，从而一次获得多个转基因猪。
（15分)玫瑰被誉为“花中皇后”，是最著名的花卉之一；玫瑰精油也是世界上最贵的植物精油，具有“软黄金”之称。下面是与玫瑰相关的实验，请分析回答问题：
（1）如果要用植物组织培养的方法对玫瑰进行大规模种植，在对玫瑰外植体细胞进行接种前，需要进行_______________、________________两项工作。
（2）取长势相同并经过消毒的玫瑰花芽若干，并均分为5份，分别培养在含有不同比例的吲哚乙酸和细胞分裂素的培养基中，花芽的生长状况如下表所示。
①在此过程中能实现脱分化的花芽是____________组。
②根据实验结果在生产中，欲快速、大量获得花芽，可选用____________组的培养基进行大量生产。
（3）植物组织培养基同样需要防止杂菌污染，为检验制备的培养基是否感染杂菌，可采取的方法是 。
（4）玫瑰精油易挥发、化学性质稳定、难溶于水，适合用________蒸馏法提取。蒸馏时收集的蒸馏液中含有的物质是________________，可以向收集的蒸馏液中加入 提高玫瑰精油的纯度。
【生物——选修3：现代生物科技专题】
下图可表示细胞工程技术的过程。
请据图回答：
（1）若A、B为经 酶去除了细胞壁的结构，则A、B到结构C的过程体现了细胞膜的 ，
形成的D细胞还要应用 技术培养成杂种植株。
（2）若A细胞为骨髓瘤细胞，B是能产生抗体的B淋巴细胞，在A、B到C的过程中形成的C有________种（仅限于两个细胞的融合），用来培养的D细胞应为 _细胞，需要在特定的 （填“固体”或“液体”）培养基中筛选出这种细胞。
（3）在上述单克隆抗体制备过程中，还应用了细胞工程的 技术和 技术。
（共9分，每空1分）回答下列有关动物细胞培养的问题：
（1）在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的 。此时，瓶壁上形成单层细胞，这种单层培养法的出现，对细胞培养的发展起了很大的推动作用。
（2）随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，但极少数细胞克服细胞寿命的自然极限，获得 ，朝着等同于癌细胞的方向发展，该种细胞由于细胞膜上 减少，导致细胞间的黏着性 。
（3）在动物细胞体外培养过程中，一般要满足四个方面的条件：无菌、无毒的环境、营养、温度和pH和气体环境，其中在培养液中添加 ，以防培养过程中的污染；由于人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚，故在使用合成培养基时，通常需加入 等天然成分；气体环境主要是提供细胞所需的O2和CO2，其中O2的作用是 ，CO2的作用是 。
（4）动物细胞培养可用于检测某种物质的毒性大小，若用被检测物质培养的细胞与对照组相比，发生变异的细胞数目所占的百分比大，则该物质的毒性大，判断的依据是 。
白菜、甘蓝均为二倍体，体细胞染色体数目分别为20、18.以白菜为母本，甘蓝为父本，经人工授粉后，将雌蕊离体培养，可得到“白菜—甘蓝”杂种幼苗。请回答问题：
（1）白菜和甘蓝是两个不同的物种，存在 隔离。自然条件下，这两个物种间不能通过 的方式产生后代。雌蕊离体培养获得“白菜-甘蓝”杂种幼苗，所依据的理论基础的植物细胞具有 。
（2）为观察“白菜—甘蓝”染色体的数目和形态，通常取幼苗的 做临时装片，用 染料染色。观察、计数染色体的最佳时期是 。
（3）二倍体“白菜—甘蓝”的染色体数为 。这种植株通常不育，原因是减数分裂过程中 。为使其可育，可通过人工诱导产生四倍体“白菜-甘蓝”这种变异属于 。
阅读如下材料，回答下列问题：
资料Ⅰ:马铃薯是世界近两亿人民的主要食物。但病毒侵染后导致产量大幅下降，故而培育脱毒或抗毒的马铃薯品种是提高产量的有效方法。
资料Ⅱ：人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。
(1)马铃薯茎尖病毒极少甚至无病毒，因此可将马铃薯茎尖培养成脱毒苗。此过程说明植物细胞具有________。
(2)为获得抗病毒的马铃薯植株，往往采用 技术，将病毒复制酶基因转移到马铃薯体内，其导入常使用________法，该方法是先将目的基因插入到相应菌Ti质粒的________上，最终进入植物细胞并插入到植物细胞的________上。
（3）制备单克隆抗体过程中要用到_______________技术。
（4）最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是________。
（5）为了更多地生产出人HCG，可将相关的人的基因转入牛受精卵中。有人构思采用胚胎分割技术，获得更多相同的转基因牛，应选择_____________时期的胚胎。
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