【生物——选修3：现代生物科技专题】下图为利用相关基因（用P表示）获得转基因小白猪的简单流程图，请据图回答下列相关问题：
（1）过程①中形成重组DNA常用的酶有＿＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿＿；将目的基因导入成纤维细胞常用的方法是＿＿＿＿＿＿。
（2）过程②中，常用＿＿＿＿＿＿酶处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养成纤维细胞时需要满足的条件是无菌、无毒的环境、＿＿＿、适合的温度和pH、＿＿＿＿。
（3）在构成重组细胞时，将导入目的基因的细胞转入去核的卵母细胞中，该技术称为＿＿＿＿＿＿，其利用的原理是＿＿＿＿＿＿。图中的卵母细胞应在体外培养到＿＿＿＿＿＿期，原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（4）过程③中所用的胚胎工程技术是＿＿＿＿＿＿，然后将早期胚胎移入另一头与供体＿＿＿＿＿＿、但未经配种的代孕母猪的相应部位。
【生物——选修3：现代生物科技专题】2013年7月，中国试管婴儿之母——卢光琇教授与研究伙伴共同宣布全球首批经全基因组测序的PGD/PGS试管婴儿在长沙诞生。新技术的突破意味着通过设计试管婴儿解决部分不孕不育问题的同时，部分肿瘤疾病、遗传性疾病的家族性遗传也将有望避免。
（1）设计试管婴儿时为了提高受孕率，胚胎移植时多采用多胚胎移植，因此需要用 处理促进母亲排出更多的卵子。
（2）胚胎发育的卵裂期在 （填“透明带”或“放射冠”）内进行。受精卵经72小时体外培养发育成由32细胞左右的胚胎，叫做 ，可用于胚胎移植。
（3）为了某些需要，需对胚胎的性别进行鉴定。目前最有效最准确的方法是SRY－PCR法，操作的基本程序是：从被测的囊胚中取出几个 （填“滋养层”或“内细胞团”）细胞，提取DNA；然后用位于Y染色体上的性别决定基因(即SRY基因)的一段碱基作 ，以 为模板进行PCR扩增；最后与SRY特异性探针出现阳性反应者，胚胎为 性。
（4）设计试管婴儿、克隆人等都是引起人们广泛争论的问题。我国不反对治疗性克隆，即可利用人体细胞核移植等技术治疗人类疾病，在去除卵母细胞的细胞核时，可用微型吸管把位于 和 之间的第一极体一并吸出。
[生物—选修3：现代生物科技专题]胚胎工程和基因工程目前在生物技术中发展较快，回答下列问题：
(1)在哺乳动物的核移植实验中，一般通过 （物理方法）将受体细胞激活，使其进行细胞分裂并发育，当胚胎发育到 阶段时，将胚胎植入另一雌性（代孕）动物体内。
(2)在“试管牛”的培育过程中，要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行 处理。另外，培养的卵母细胞需要发育至 ，该时期在显微镜下可观察到次级卵母细胞和第一极体。
(3)利用体细胞进行核移植技术的难度明显高于利用胚胎细胞进行核移植的原因是 .
(4)若要使获得的转基因牛分泌的乳汁中含有人干扰素，则所构建的基因表达载体必须包括：某种牛乳腺分泌蛋白基因及其启动子、 、终止子、标记基因和复制原点等。目前常用的措施是将该基因表达载体导入牛的 （填“受精卵”或“乳腺细胞”），导入方法是 。
《科 学》杂志8月9日刊登了北大生科院教授邓宏魁研究团队的研究成果——使用4个小分子化合物的组合，把成年鼠表皮细胞逆转为“全能干细胞”。它为未来应用再生医学治疗重大疾病带来了新的可能。但是这种诱导是否会引发肿瘤或其它安全性问题还没有解决，机理也还没有研究清楚。
（1）小分子化合物如果是4种氨基酸，可以 为模板在 上合成多肽。
（2）该研究中4个小分子化合物如果均为核糖核苷酸，其中腺嘌呤核糖核苷酸可作为合成直接能源物质 的原料；若采用32P对尿嘧啶核糖核苷酸进行标记，可检测到放射性的具膜细胞器为 ；观察该细胞器可以使用 ____ __染色。
（3）癌细胞的特征包括 。
| A．细胞膜上的糖蛋白减少 | B．甲胎蛋白减少 |
| C．无限增殖 | D．线粒体活动旺盛 |
（4）表皮细胞逆转为全能细胞相当于植物组织培养的 步骤。
（5）下图细胞是经HAT培养基筛选出的能产生单克隆抗体m的杂交瘤细胞，标出的三个基因中处于可表达状态的是 。
【生物——现代生物科技专题】Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图：
（1）步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的_________，此技术属于________工程范畴。
（2）步骤②中，重组胚胎培养到 期时，可从其__________中分离出ES细胞。培养ES细胞时，为满足细胞代谢的需要，可在培养基中加入的天然成分是_______________。
（3）步骤③中，在构建含有Rag2基因的表达载体时，可以根据Rag2基因的 设计引物，利用__________技术扩增Rag2基因片段。并且同时用HindIII和PstI限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段，这样做的目的是： 。为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有_________酶的酶切位点。
（4）为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后的小鼠骨髓细胞的蛋白质，用 进行杂交实验。
(13分)下图是单克隆抗体制备流程示意图。
（1） 技术是单克隆抗体技术的基础。
（2）单克隆抗体的制备过程中需要两次筛选，第一次你筛选的目的是：_______________。所用的HAT培养基在功能上被称为：_________________；第二次筛选的目的是：___________________。
（3）单克隆抗体与常规的血清抗体相比,最大的优越性是 。
（4）动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用诱导剂外，还可以采用 _________。
（5）选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的 特点，又具备淋巴细胞的___________特点。
（6）B淋巴细胞是由动物体 中的 细胞分化、发育而来。
（7）杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是 。
（8）获得的符合要求的细胞既可以_____________又可以注射到小鼠的_________进行培养。
（朝阳期中）下图表示应用现代生物技术制备H7N9病毒单克隆抗体的流程。请回答下列问题：
（1）①过程表示 过程；②过程用到的工具酶是 ，其作用部位是下图中的 （填字母）。
（2）对于转基因成功的细胞I还要进行培养和 检测，经多次筛选从而得到细胞Ⅱ。细胞Ⅱ的特点是 。
本题由两个小题组成：
I．为研究细胞分裂周期所经历的时间，科学家应用3H-TdR（氚标记胸苷）短期饲养植物愈伤组织细胞（10个细胞），数分钟到半小时后，将3H-TdR洗脱，置换新鲜培养液继续培养。随后，每隔半小时定期测定带标记的细胞数（见图l。假定洗脱后的细胞分裂中，如果两条姐妹染色单体中只有一条染色单体带有标记时，则姐妹染色单体分开后总是带有标记的染色体移向同一极）。统计带标记细胞数占总细胞数的比例，结果如下图2所示。
(1)从图可知，培养的10个细胞是____ （填同步或非同步）进入细胞分裂周期的；一个细胞周期所经历的时间约是___ _h。
(2) 3H-TdR开始掺入DNA分子的区段是____(填AB或BC或CD)；着丝点分裂姐妹染色单体分开分别向两极移动过程，发生两次的区段是____（填BC或CD或FG）。
Ⅱ．玉米、高粱等C4植物含有与CO2亲和力高约60倍的磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶，因而比水稻、小麦等C3植物光合作用能力强。科学家应用PCR方法从C。植物高梁的基因组中分离出磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因，构建重组的表达载体后，利用农杆菌介导的方法转入小麦体内。这种转基因小麦光合作用强度明显提高，千粒干重明显增加。
(1)应用PCR方法从C4植物高粱的基因组中分离出磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因，需要知道磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因两端的一部分核苷酸序列，以便根据这一序列合成两种 _______ 。
(2)植物光合作用的强度，简单地说是指植物______________的数量。植物光合作用的暗反应阶段，二氧化碳中碳原子的转移途径是_________________________。
(3)下图表示转基因小麦（导入磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因的小麦）和非转基因小麦（未导入磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因的同品种小麦）在不同C02浓度和光照强度条件下C02的同化量。
①从图甲可知，转基因小麦能利用___________，这是因为转基因小麦体内含有__________________。
②如果是干旱地区，适合栽种_______________小麦；多施有机肥更能提高______________小麦的产量。
(11分).生物技术就像一把双刃剑，它既可以造福人类，也可能在使用不当时给人类带来灾难。例如，用克隆技术制造出克隆人，用转基因技术制造生物武器等。面对生物技术可能产生的负面影响，公众不可避免地产生了疑虑。近年来，生物技术引发的社会争论涉及面越来越广。
(1)目前我国是种植转基因作物较多的国家之一，关于转基因生物的安全性的争论也越来越多，转基因生物的安全性主要涉及 、 、 等方面。
(2)“试管婴儿”技术诞生后，继而出现了“设计试管婴儿技术”，二者在对人类作用上的区别是 。
(3)现在大多数人反对设计婴儿性别，其原因是 。
(4)如果对流感病毒进行改造做成生物武器，其危害性与一般生物武器相比怎样？ 。原因 。
(15分)运用动物体细胞杂交技术可实现基因定位。研究发现：用人体细胞与小鼠体细胞进行杂交得到的杂种细胞含有双方的染色体。杂种细胞在持续分裂过程中仅保留鼠的染色体而人类染色体则逐渐丢失，只剩一条或几条。下图是人的缺乏 HGPRT 酶突变细胞株（ HGPRT -）和小鼠的缺乏 TK 酶细胞株（ TK -）融合后并在 HAT 培养液中培养的过程，结果表明最终人的染色体在融合细胞中仅存有 3 号染色体或17 号染色体或两者都有。已知只有同时具有 HGPRT 酶和 TK 酶的融合细胞才可在 HAT 培养液中长期存活与繁殖。
（1）体细胞杂交克服了 ，过程①常使用的方法是 。细胞融合完成的标志是 。
（2）过程②中，为了防止细菌的污染，所用培养液应该添加一定量的 ，此外还要定期用 处理细胞，使贴壁生长的细胞脱落形成细胞悬液。
（3）从实验中所起的作用可以判断HAT培养基是一种 培养基。
（4）从图示结果看，可以确定人的基因TK 酶位于17号染色体；该方法是否可以对鼠基因定位，为什么？ 。
下列图1表示利用生物技术制备抗X的单克隆抗体的过程；图2表示体外受精培育优质奶牛的过程；图3表示番茄和马铃薯植物体细胞杂交和再生植株的过程，请据图回答：
（1）图1中注射到小鼠体内的物质是 。融合后的细胞经过多次筛选才能获得理想的细胞，这种细胞的特点是 。该过程所用的生物技术有 。
（2）图2中参与体外受精的精子需要经过成熟和 的过程，才能与卵细胞受精。 若要获得多头与此优质奶牛相同的小牛，可对图2囊胚中的 均等分割后进行胚胎移植，暂不移入的胚胎可使用 方法保存。
（3）图3中过程①是获得 的过程，该过程所用的酶是 。
下图所示为人类“治疗性克隆”的大概过程，请据图作答。
（1）上图A、B过程用到的生物技术分别是 ，甲称作 。
（2）乙是具有 和 的胚胎干细胞。
（3）相同的胚胎干细胞，通过C过程“克隆”的结果各种各样，如有的是胰岛细胞，有的是血细胞，有的是心肌细胞，究其本质原因是 的结果。上述“克隆”过程是胚胎干细胞 和的结果。
（4）按上述方法克隆的器官在移植方面的主要优点是 。
【生物：选修三现代生物科技专题】某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题：
（1）将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其它培养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量__________。
（2）在动物细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的主要作用是___________。
（3）在两种细胞生长过程中，当甲细胞铺满瓶壁时，会出现____________现象，若甲细胞传代培养10-50代左右，发现增殖逐渐缓慢，以至于完全停止，这时部分细胞的________可能会发生变化。药物试验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细胞相比，可以传代的次数更多的是_______细胞。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用___________消化处理。
（4）理论上，甲细胞可与某种B淋巴细胞合成_____________细胞，从而来制备__________，使患者获得特异性免疫。
.下图为利用生物技术生产单克隆抗体和经体外受精培育优质奶牛的过程。请回答下列问题： 
(1) 细胞A的形成过程中最常用的诱导因素是 。
(2)在I图制备单克隆抗体的过程中，包括 两个过程。经选择性培养的杂交瘤细胞，还需进行 ，经多次筛选就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞，进行体内或体外培养。
(3)单克隆抗体与常规的血清抗体相比，其最大的优越性是 。
(4)Ⅱ过程优质奶牛的培育过程需要进行体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植，体外受精前，需要对奶牛的精子进行 处理。受精时，往往一个卵母细胞只能和一个精子结合，受精过程中防止多精入卵的的生理反应包括透明带反应和 反应。进行早期胚胎的体外培养和进行胚胎移植，胚胎培养液中除了含有各种有机盐类、维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外，还要添加 和动物血清。胚胎移植后的胚胎能在受体子宫中存活，其生理基础是 。
(5) 一般情况下，良种奶牛所产生的能用于体外受精的卵母细胞往往数量不足，请举出一种可以获得更多卵母细胞的方法 。若要同时获得多头与此优质奶牛相同的小牛，可对Ⅱ中囊胚进行 ，操作过程需要特别注意的问题是 。
(15分)某研究小组进行药物试验时,以动物细胞为材料,测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种,甲为骨髓瘤细胞,乙为经免疫过的正常浆细胞。请答题:
（1）将数量相等的甲和乙分别置于培养瓶中培养,培养液及其它培养条件均相同且适宜。一段时间后,观察到的现象是 。
（2）动物细胞培养需要满足一定的条件，下列有关表述正确的有
（选择填写下列条件前的序号）。
①对培养液和培养用具进行无菌处理，在细胞培养液中添加一定量的抗生素，定期更换培养液，这些做法都有利于提供一个无菌无毒的培养环境
②在使用合成培养基时，通常需加入血浆等天然成分
③所有动物细胞培养的适宜温度均为36.5±0.5℃，多数哺乳动物细胞生存的适宜pH为7.0左右
④动物细胞培养所需的气体只是O2，因为O2是细胞代谢所必需
⑤培养液中需添加一定浓度和比例的生长素与细胞分裂素，以诱导细胞脱分化和再分化
（3）药物试验需要大量细胞，甲乙看来都不适合用于试药，理由是： 。
（4）令甲乙细胞融合，所获杂交细胞在体外培养条件下，具有 的特点。
（5）已知癌细胞中X基因过量表达与骨髓瘤的发生密切相关。要试验一种抗肿瘤药物Y对甲生长的影响，可将甲分为A、B两组，A组细胞培养液中加入 ，B组细胞培养液中加入无菌生理盐水，在相同且适宜条件下培养一定时间后，从A、B两组收集等量细胞，通过分别检测X基因在A、B两组细胞中的 合成 水平的差异,以确定Y的药效。
粤公网安备 44130202000953号
