高中生物动物细胞工程的常用技术综合题

野生马铃薯品种的植株具有较强的抗病、抗虫、抗盐碱、抗寒能力，但块茎不能食用。俄、德、芬兰专家共同做实验研究，用野生马铃薯与马铃薯的体细胞进行杂交，培育出了生活能力强的杂交系马铃薯。据图分析回答问题：

(1)②过程常用的促融剂是___________，此过程依据的原理是_____________。
(2)一般在培养基上培养24～28小时后，大部分原生质体已再生出细胞壁。可以取样，通过___________________________实验来鉴别细胞壁是否已经再生。
(3)请用文字和箭头表示出④、⑤过程的实验流程______________________________。在此过程中需要加入生长素类和细胞分裂素类激素，前者的作用主要是用于__________________。
(4)若想制备人工种子，则需培养至___________________阶段，取出包裹上人工种皮。利用人工种子繁殖后代属于_________。
（5）无菌技术也是成功诱导出再生植株的重要因素，请说明下列各项需要消毒，还是需要灭菌_________________________________________________。
①培养基 ②培养皿 ③接种环 ④实验操作者的双手 ⑤三角锥形瓶 ⑥植物材料

下图为不同种植物体细胞杂交过程示意图。据图回答：

（1）步骤①是                    ，最常用的方法是                 。
（2）步骤②一般常用的化学试剂是　               　。
（3）在利用杂种细胞培育成为杂种植株的过程中，运用的技术手段是             ，
其中步骤④是             ，步骤⑤是　           　。
（4）从理论上讲，杂种植株的育性为　　     　 （填可育或不育）。
若运用传统有性杂交方法能否实现？　　  ，原因是                               。       
这项研究对于培养作物新品种方面的重大意义在于                              。

下面是以小鼠为对象进行的各项研究工作，请分析回答问题。
(1) 在小鼠细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的             。此时，瓶壁上形成细胞层数是______。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入培养瓶中这样可以          ，增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需耍用酶处理，可用的酶是          。
(2) 如果体外受精后，在精核与卵核融合之前，用微型吸管除雄核，再用细胞松弛素B处理（作用类似于用秋水仙素处理植物细胞），处理后的受精卵可发育成小鼠。这种方法在动物新品种选育中的显著优点是                      
(3)在细胞培养过程中要求的环境是　　　　　　  ，通常在细胞培养液中添加一定的抗生素，防止_______，此外还要定期_____，以便清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害
(4) 在细胞培养过程中，通常在             条件下保存细胞，因为在这种条件下，细胞中             的活性降低，细胞的代谢速率降低。

下图表示单克隆抗体制备的部分过程。据图解答下列问题。

（1）①表示的操作过程是向小鼠注射      ；②表示的过程除了可用植物细胞工程中用到的操作方法外，还可用      作为诱导因素。经过②过程可得到两两融合的       种细胞，与其他两种细胞相比d代表的细胞具有            的特征。③过程包括两次以上筛选，其中第一次要筛选出d所指的                          ；最后还要筛选出e所指的               。
（2）a、b、f所指的细胞或物质依次是
    　   、        、            。
（3）应用f治疗时，可将其制成“生物导弹”用“生物导弹”治疗癌症，具有：          的特点。

人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，且疾苗生产和抗体制备的流程之一如下图：

请回答：
（1）过程①代表的是        。
（2）过程②要大量扩增A基因,通常可采用            技术。
（3）过程③需要多次对经单一抗体检测呈      性的细胞克隆化培养，才能筛选出X细胞。
（4）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的             所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可以疑问患者体内分离病毒，与已知病毒进行                     比较；或用图中的                进行特异性结合检测。

如图所示为动物细胞培养过程中,动物细胞增殖情况的变化曲线（图中B、D两点表示经筛选后继续培养）,据图回答问题。

（1）OA段的培养称为            培养，AB段可能发生了           现象，需要用
           酶处理使组织细胞分散开来。
（2）动物细胞培养和植物组织培养过程中，就细胞增殖、分化来说，动植物细胞都要进行            ，不同的是植物细胞还要进行             。
（3）为制备单克隆抗体，需将          注射到小鼠体内，以此获取          细胞，同时可选取图中      点以后的细胞与该细胞融合形成杂交细胞，所选取的细胞，其细胞膜上的        比正常细胞显著减少。
（4）在制备单克隆抗体的过程中，需要经过两次筛选，第一次是诱导融合之后筛选出             细胞，第二次是筛选出                        细胞。

右图是制备抗X抗体的过程，请据图解回答问题：

（1）制备单克隆抗体的步骤：
① 将      注入小鼠体内，从小鼠脾脏中获得淋巴细胞。
② 将步骤①获得的B淋巴细胞与步骤②培养的骨髓瘤细胞诱导融合。
③ 将诱导产生的多种细胞，放在    培养基上培养，筛选，获得的杂交瘤具有
                             特点。
④ 用多孔培养板检测和分离能分泌抗X抗体的阳性细胞。
⑤ 将阳性细胞进行           ，从而制备出抗X的单克隆抗体。
（2）与一般的血清抗体相比，单克隆抗体的优点是                      。

(20分，每空2分)下图可表示细胞融合技术的一些过程，请据图回答：

（1）若A、B细胞为动物细胞，从A和B细胞到C细胞的过程中，常用                   ____________作为诱导剂来诱导融合。A、B融合为C的过程说明了细胞膜具有        
的特性。
（2）若A、B细胞为植物细胞，那么这样的细胞已经用酶降解脱掉了细胞壁。这种酶可能是_____________酶，由此生成的A和B细胞称为          。A、B到C细胞的过程中，常用的物理方法是                   ；融合完成的标志是                ；形成的D细胞还要应用_______________技术把D培养成植株.
（3）若A细胞为骨髓瘤细胞，B细胞为B淋巴细胞，那么D细胞称为 ___   细胞。由D细胞连续分裂产生大量细胞的过程，称为_________________过程。
（4）若该过程是制备单克隆抗体的过程，在A、B到C的过程中，所形成的C有     种。    

下图为细胞融合的简略过程，请据图回答：

（1）若A、B是植物细胞，在细胞融合前可用纤维素酶除去细胞壁得到           ；D杂种细胞能培育成杂种植株，说明植物细胞具有                   。
（2）不同种植物之间由于存在          而不能进行有性杂交，但植物体细胞杂交技术的成功为培育种间或属间 杂种植株提供了新的思路。
（3）动物细胞工程的重要目的之一是制备单克隆抗体。若A细胞为瘤细胞、B细胞为B淋巴细胞，则促融后能形成         种融合细胞（只考虑细胞两两融合），还应从中筛选出既能          又能产生           的杂交瘤细胞。与传统从血清提取的抗体相比，单克隆抗体的优点是                       。
（4）制备单克隆抗体的过程中涉及到的细胞工程技术有                 。

科学家利用细胞工程培育了“白菜甘蓝”杂种植株，如下图所示，请根据图回答下列问题：

（1）图C表示____    ；由D形成E的过程称为    。
（2）图中A、B的制备，需要去除细胞壁，此时要用到           酶；从本质上讲，“白菜甘蓝”杂种植株具有的性状是        的结果。
（3）若“白菜甘蓝”杂种植株为四倍体，则该植株的花粉经离体培养得到的植株是  倍体。

在植物组织培养过程中，愈伤组织的成功诱导是至关重要的步骤。科学家以食用稗的成熟胚作为外植体，在基本培养基上研究植物生长调节剂对食用稗愈伤组织诱导的影响。实验结果如下表。请回答相关问题：

注：愈伤组织诱导率（%）＝产生愈伤组织的外植体数/接种外植体总数×100%
（1）从上表可以知道，在基本培养基中添加较高浓度的          有利于食用稗胚形成愈伤组织，而添加          则不利于食用稗胚愈伤组织的形成。
（3）影响愈伤组织成功诱导的因素除植物生长调节剂外，培养的环境条件也是重要的因素。现给你提供200个已经消毒过的食用稗的成熟胚，在上述研究的基础上，探究光照对愈伤组织形成的影响。
实验步骤：
①将200个已经消毒过的食用稗的成熟胚平均分为甲、乙两组，分别接种到     培养基上；
②                                                                     ；
③                                                                     。
预期实验结果和结论：                                                        。

下图是基因型为AaBb的菊花茎尖离体培养示意图，据图回答下列问题：

(1)图中A是__________，B是__________。菊花茎尖培养成植物体的根本原因是________________________________________________________________________
(2)菊花的组织培养过程中，细胞增殖通过__________分裂来完成。试管苗形成过程中要给予一定光照，其目的是________________。
(3)脱分化和再分化这两个过程的进行还需要维持一定的外界条件，一是要有适宜________，二是要__________。否则植物组织培养就不能成功。
(4)这样培养成的试管苗的繁殖方式是__________。

试管苗的光合作用能力较弱，需要逐步适应外界环境才能往大田移栽。研究人员进行了“改变植物组织培养条件缩短试管苗适应过程”的实验，实验在适宜温度下进行，图甲和图乙表示其中的两个实验结果。 请回答：

（1）图甲的实验是在大气CO₂浓度下进行的。据图分析，试管苗在不加蔗糖的培养基中__________________更高。
（2）图乙是试管苗在密闭.无糖培养基条件下测得的24h内CO₂浓度变化曲线。图中b-c段CO₂浓度升高缓慢是因为________________________________________，c-d段CO₂浓度急剧下降是因为试管苗________________________________________。若d点时打开培养瓶，试管苗的光合速率____________。
（3）根据上述实验结果推知，采用无糖培养基.__________和___________可缩短试管苗的适应过程。

请回答下列有关月季花药培养过程中的有关问题：
（1）月季花药组织培养的操作程序是①制备      培养基；②       ；③接种；④培养；⑤移栽；⑥栽培。移栽时应将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间进行        ，目的是使试管苗适应自然环境、提高抵抗力和生活力。
（2）愈伤组织分化生成根和芽，再由芽发育成叶和茎，这一过程称为          ，此过程      （需要、不需要）光照，组织培养要求无菌操作的目的是                      。

“白菜——甘蓝”是用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种，它具有生长期短和耐储藏等优点。下图是“白菜——甘蓝”的培育过程示意图，请回答下列问题：

⑴在上述过程中，实现①②过程常用的物质为　　　　　　　　　　。
⑵ A、B表示______________；杂种细胞D生成的标志是形成________________；由D形成E的过程所依据的原理是__________________________，
⑶过程③叫做_____     __技术，该过程的诱导方法有物理法和化学法两大类过程。若用化学法，所用化学试剂名称　　　      。
⑷过程④是细胞壁的再生过程，与此过程密切相关的细胞器是____   _____。
⑸已知白菜细胞中含2M条染色体，甘蓝细胞中含有2N条染色体，则杂种植株体细胞染色体数为　     。通常情况下，白菜和甘蓝有性杂交是不能成功的，原因是　　　  　   　  。
⑹植物体细胞杂交方法的优点是                                              。