羊绒素有“软黄金”之称，内蒙古绒山羊和辽宁绒山羊是我国的两大产绒品种。我国生物学家运用现代生物技术培育出了转基因克隆绒山羊，其过程如下图所示：
(1)在辽宁绒山羊细胞中获取的IGF-I基因在导入胚胎干细胞之前须________，这是基因工程操作的核心步骤，该操作过程必需的工具酶是________，将IGF-I基因导入胚胎干细胞最有效的方法是________
(2)转基因胚胎干细胞培养过程常在培养液中加入一定量的________，以防培养过程中的污染；同时在使用合成培养基时，为保证细胞正常生长,在培养基中还要添加________等天然成分。
(3)干细胞经扩大培养诱导分化为早期胚胎，随后即可植入________的代孕母羊体内。为提高胚胎利用率，还可以采用________技术以获得更多的转基因克降绒山羊幼仔。
(4)请列举至少两种转基因克隆绒山羊培育过程中采用的现代生物技术: ________
（每空1分，共8分）请根据下图，回答有关体外受精和早期胚胎培养的问题：
（1）对于小鼠、兔、羊等实验动物，卵母细胞的采集方法是用促性腺激素处理，使其排出更多的卵子，从___________中冲取卵子，_________（可以/不可以）直接与获能的精子在体外受精。
（2）在体外受精前，要对精子进行获能处理。通常采用的方法有培养法和________________。
（3）获能的精子和培养成熟的卵子，一般情况下都可以在________________溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。
（4）受精作用过程中，防止多精子入卵的第一道屏障是________________，它发生在精子触及________________的瞬间；防止多精子入卵的第二道屏障是________________。
（5）精子与卵子在体外受精后，应将受精卵移入________________培养液中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力。
某城市在建设过程中，更加注重生态文明建设。如利用人工建立的湿地公园对生活污水进行净化处理，形成藻菌共生的污水净化
系统，还可以利用藻类蛋白养鱼、养鸭等而获得良好的经济效益。下面是利用人工湿地净化生活污水的原理简图。请据图回答问题
(1)输入人工湿地的能量为 。
(
2)人工湿地中的芦苇属于挺水植物，绿藻属于浮游植物，黑藻属于沉水植物，这一现象体现了群落具有 结构
(3)该人工湿地中的芦苇、藻类等植物生长迅速，其主要原因是
。
(4)细菌、真菌等微生物的分解作用是净化污水的重要途经，为了提高分解的效率，可采取的有效措施是 。
(5)用恰当的箭头和文字完成该人工湿地碳循环图解。
克隆羊的成功轰动世界，它不仅奠定了疾病克隆性治疗的基础又解决了器官移植中供体不足的问
题
，同时也给人类带来了一些尚未遇到的问题。下图为人类对克隆羊技术的拓展图和应用。请据图回答问题
(1)图中所
涉及的现代生物技术有 、 和
等
(2)图中婴儿长大后，外貌、性格和其它特征与原型男人相同，这说明 具有全能性
(3)使用培养基进行胚胎干细胞培养时，通常要加入 等天然成分，除了保证被培养细胞处于无菌、无毒及充足氧气的环境中，还需要保证细胞生活所需的 ；早期胚胎发育在 阶段以前的细胞是全能细胞
(4)图中从“内细胞团到胚胎干细胞”的培养过程中，必须用 处理内细胞团，使之分散成单个细胞。干细胞形成组织、器官必须要进行细胞的 和 。
已知番茄的红果（Y）对黄果（y）为显性，二室（M）对多室（m）为
显性，控制两对相对性状的基因分别位于两对同源染色体上。育种工作者利用不同的方法进行了如下四组实验。请据图回
答问题
(1)图Ⅰ过程由番茄韧皮细胞形成幼苗A的过程要经过脱分化形成
，再分化形成幼苗，该
过程依据的原理是 。
(2)植物组织培养除了需要提供一定的营养、激素、温度和光照外，还必须在 的条件下培养
(3)用红果多室（Yymm）番茄植株的花粉进行Ⅱ、Ⅲ有关实验，则Ⅱ过程中，从花粉形成幼苗B所进行的细胞分裂方式是 。植物体C的基因型有 。
(4)图Ⅲ、Ⅳ过程中需要去除细胞壁，此时要用到的酶是 
。
(5)在图中Ⅳ过程中，通常植物D能表现两个亲本的遗传性状，根本原因是 。
下表中列出几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点，请回答下列问题
| 限制酶 |
BamHⅠ |
Hind Ⅲ |
EcoRⅠ |
SmaⅠ |
识别序列及 切割位点 |
G↓GATC C C CTAG↑G |
A↓AGCT T T TCGA↑A |
G↓AATT C C TTAA↑G |
CCC↓GGG GGG↑CCC |
(1)一个图Ⅰ所示的质粒分子经SmaⅠ切割后，含有 个游离的磷酸基因
(2)若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越
(3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用Sma Ⅰ切割，原因是 .
(4)与只使用EcoRⅠ相比较，使用BmaHⅠ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止 。
(5)为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入 酶
(6)重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了 。
(7)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖
能力的大肠杆菌突变
体，然后在 的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测
粤公网安备 44130202000953号