下表中列出几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点,请回答下列问题
限制酶 |
BamHⅠ |
Hind Ⅲ |
EcoRⅠ |
SmaⅠ |
识别序列及 切割位点 |
G↓GATC C C CTAG↑G |
A↓AGCT T T TCGA↑A |
G↓AATT C C TTAA↑G |
CCC↓GGG GGG↑CCC |
(1)一个图Ⅰ所示的质粒分子经SmaⅠ切割后,含有 个游离的磷酸基因
(2)若对图中质粒进行改造,插入的SmaⅠ酶切位点越多,质粒的热稳定性越
(3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用Sma Ⅰ切割,原因是 .
(4)与只使用EcoRⅠ相比较,使用BmaHⅠ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止 。
(5)为了获取重组质粒,将切割后的质粒与目的基因片段混合,并加入 酶
(6)重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了 。
(7)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因,将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体,然后在 的培养基中培养,以完成目的基因表达的初步检测