萌发的禾谷类种子中淀粉酶活性较强,主要有α-淀粉酶和β-淀粉酶。α-淀粉酶不耐酸、较耐热,在pH为3.6以下迅速失活,而β-淀粉酶不耐热,在70℃下15min后失活。根据它们的这种特性,可分别测定一种酶的催化效率。请协助完成“测定小麦种子中α-淀粉酶的催化效率”的实验。
实验原理:
。
实验材料:萌发3天的小麦种子(芽长约1cm)。
主要试剂及仪器:1mg/mL的标准麦芽糖溶液、5%淀粉溶液、斐林试剂、蒸馏水、石英砂、恒温水浴锅等。
实验步骤:
步骤一:制作麦芽糖标准液。取7支干净的具刻度试管并编号,按表加入试剂,再将试管置于100℃水浴锅加热2min,取出后按试管号顺序排列。
试剂 |
试管号 |
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1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
|
麦芽糖标准液(mL) |
0 |
0.2 |
0.6 |
1.0 |
1.4 |
1.8 |
2.0 |
蒸馏水(mL) |
2.0 |
|
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|
|
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|
麦芽糖含量(mg) |
0 |
0.2 |
0.6 |
1.0 |
1.4 |
1.8 |
2.0 |
斐林试剂(mL) |
2.0 |
2.0 |
2.0 |
2.0 |
2.0 |
2.0 |
2.0 |
步骤二:制备酶液。
步骤三: 。
步骤四:另取4支试管,编号A、B、C、D,向A、B试管中各加入5mL5%淀粉溶液,向C、D试管中分别加入2mL已经处理的酶溶液和蒸馏水,将4支试管置于40℃恒温水浴锅中保温10min,然后将C、D试管中的溶液分别加入到A、B试管中,摇匀后继续在40℃恒温水浴锅中保温10min。
步骤五: 。
实验结果:将A试管中的颜色与步骤一种获得的麦芽糖标准液的颜色进行比较,获得该试管中的麦芽糖浓度,并计算出α-淀粉酶的催化效率。
结果分析:(略)
分析上述步骤回答:
(1)本实验的实验原理是: 。
(2)步骤一的2~7试管中加入蒸馏水的量分别是 (单位mL)。
(3)步骤三的实验操作是: 。
(4)步骤五的实验操作是: 。
(5)实验中B试管所起的具体作用是 。