在哺乳动物体细胞核中，有的X染色体常浓缩成染色较深的染色质体，此即为巴氏小体。研究者普遍认为，巴氏小体的形成是与XIST基因的特异性表达有关， 大量的XIST顺式作用在其中一条X染色体上，引发了该条染色质的广泛甲基化，从 而导致异染色质的形成。请分析回答下列问题
（1）显微镜下观察巴氏小体时，需用 染色后制片。某些性染色体数目异常的细胞核具有不同数目的巴氏小体，如XXY有1个、XXX有2个、XXX有3个，而XO没有巴氏小体，由此推测X染色体浓缩成巴氏小体的生物学意义是维 持雌性个体与雄性个体的x染色体上 量相同。
（2）为探究胚胎发育早期X染色体上Xist基因的表达与x染色体失活的关系，科研 人员将某种雌鼠的胚胎干细胞（PGK细胞）中两条X染色体分别记为X1和 X2（如图1 ），通过基因工程方法将其中X2的Xist基因敲除，获得XT细胞。对PGK 细胞、XT细胞及由它们分化形成的细胞中E和e基因的表达量进行定童分析，实验结果如图2所示。
①由图2分析，火多数PGK和XT细胞中的X染色体 。PGK分化细胞中E基因和e基因表达量高于 80%的细胞数目接近相等，说明X染色体失活是 的。
②由图2分析，XT分化细胞中 染色体失活，实验结果表明 。
③PGK分化细胞的不同细胞中E、e基因表达的差异，是由于这些细胞的 不同。
（3）据上述实验推测，在胚胎发育过程中，雄性哺乳动物体细胞中Xist基因 （填“会”或“不会”）转录。一般情况下，红绿色盲基因携带者的表现型是 。
科学家用大肠杆菌进行诱变实验，获得两个营养缺陷型菌株，菌株A不能合成甲硫氨酸和生物素，菌株B不能合成苏氨酸和亮氨酸，将这两种菌株混合在缺少这四种营养素的培养基上，出现了能够生长繁殖的大肠杆菌，由此推断这两种菌株间实现了基因交流。现代遗传学研究发现，细菌间的基因交流与F因子有关，F因子是一种质粒，含有F因子的大肠杆菌（F+）是基因的供体，不含F因子的大肠杆菌（F-）是基因受体， F+大肠杆菌表面有一种称为性菌毛的毛状突起，与F-大肠杆菌接触时形成接合管，基因交流过程如下图所示：
请回答下列问题：
（1）科学家获得两个营养缺陷型菌株的原理是 ，两个菌株混合，在缺少相应的四种营养素的培养基上出现能生长繁殖的新菌株，这种变异属于 。
（2）遗传学家将含有F因子的基因供体称为父本，不含有F因子的基因受体称为母本，细菌间的这种基因交流行为称为有性生殖，这种遗传现象是否遵循孟德尔的遗传定律？ ，理由是 。
（3）F因子在细胞中以游离或整合到拟核DNA中两种状态存在，F因子能够整合到拟核DNA中的原因是 。
（4）F因子的单链进入F-细菌，F-细菌变成F+细菌的原因是 。
（5）在基因工程中，作为目的基因载体的质粒DNA分子上有特殊的遗传标记基因，如抗氨苄青霉素基因，鉴定受体细胞是否含有重组DNA的实验思路是 。
2009年10月，我国自主研发的转基因抗虫水稻“华恢1号”获得农业部颁发的安全证书。下图表示该抗虫水稻主要培育流程，据图回答：
（1）④过程应用的主要生物技术是 。
（2）杀虫基因（crylA）是人们根据几种Bt毒蛋白的分子结构，设计并人工合成的，这属于 工程技术范畴。
（3）组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造。下图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图（示部分基因及部分限制性内切酶作用位点），据图分析：
①人工改造时，要使抗虫基因表达，还应插入 。
②人工改造时用限制酶Ⅱ处理，其目的是：第一，去除质粒上的 和 （基因），保证T-DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长；第二，使质粒带有单一限制酶作用位点，有利于 。第三，使质粒大小合适，可以提高转化效率等。
③若用限制酶Ⅰ分别切割改造过的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子，并构成重组Ti质粒。分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞，观察到的细胞生长的现象是 。
（4）若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的粘性末端为
，则该酶识别的核苷酸序列是 。
应用基因工程技术可以获得人们需要的生物新品种或新产品。请根据资料和图解回答下列问题：
资料1：蜘蛛丝(丝蛋白)被称为“生物钢”，有着超强的抗张强度。可制成防弹背心、降落伞绳等。蜘蛛丝还可被制成人造韧带和人造肌腱。科学家研究出集中生产蜘蛛丝的方法——培育转基因蜘蛛羊。
资料2：注射疫苗往往会在儿童和部分成年人身上引起痛苦。将疫苗藏身水果蔬菜中，人们在食用这些转基因植物的同时也获得免疫力，因而无需免疫接种，这一新概念将引起疫苗研究的一场革命。
(1)过程①⑤所需要的工具酶有 和________________，构建的蜘蛛丝蛋白基因表达载体一般由 、 、启动子、终止子等部分组成。
(2)过程②将重组质粒导入山羊受体细胞时，采用最多也最有效的方法是 。
通过①～④过程培育的蜘蛛羊可以作为乳腺生物反应器，从 中提取所需要的蜘蛛丝蛋白。
(3)如果将过程③获得的早期胚胎进行如图分割，则操作正确的是 。
(4)通过⑤⑥⑦培育转基因莴苣，相比诱变育种和杂交育种方法，具有 和 等突出优点。
回答下列关于基因工程的问题。
草甘膦是一种广谱除草剂，其除草机制是抑制植物体内EPSPS酶的合成，最终导致植物死亡。但是，它的使用有时也会影响到植物的正常生长。目前，已发现可以从一种抗草甘膦的大肠杆菌突变株中分离出EPSPS基因，若将该基因转入植物细胞内，从而获得的转基因植物就能耐受高浓度的草甘膦。
下图A-F表示6株植物，其中，植物A和D对草甘膦敏感，B和E对草甘膦天然具有抗性，C和F则经过了转基因处理，但是是否成功还未知。图1和2分别表示两段DNA序列。表格中1-4分别表示4种限制性核酸内切酶的酶切位点。据图回答下列问题：
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（1）若A-C浇清水，D-F浇的水中含有草甘膦，上述植物中，肯定能健康成长的是_________。
（2）若要从大肠杆菌中筛选出含EPSPS基因的突变菌株甲，在大肠杆菌培养基中还必须加入 ___________。
（3）假设位于EPSPS基因两侧的DNA序列均如图I所示，则应选择表中酶__________进行酶切；若位于EPSPS基因两侧的DNA序列分别如图I和II所示，则应选择表中酶__________ 进行酶切。
（4）假设大肠杆菌突变菌株甲中EPSPS基因的右侧序列如图II所示，请在方框内画出经酶切后产生的两个末端的碱基序列。
（5）假设EPSPS基因已被成功转移到植物F中，但植物F仍没有表现出抗性，分析可能的原因_______________________________________________________________。
下图甲是某目的基因（4.0kb，1kb=1000对碱基）与大肠杆菌pUC18质粒（2.7kb）重组的示意图。图中Ap′是抗氨苄青霉素基因，lacZ是显色基因，其上的EcoRI识别位点位于目的基因插入位点的右侧，其控制合成的物质能使菌落呈现蓝色。（图乙中深色圆点即为蓝色菌落）
（6）图乙的培养基中含有氨苄青霉素，请判断图乙中所出现的白色和蓝色两种菌落中，何种会含有重组质粒。___________。
（7）现用EcoRI酶切质粒，酶切后进行电泳观察，若出现长度为_________kb和 kb的片段，则可以判断该质粒已与目的基因重组成功。（重组质粒上目的基因的插入位点与EcoRI的识别位点之间的碱基对忽略不计）
根据有关微生物的知识，分析回答问题。
（1）当水体过于纯净时，硝化细菌会形成休眠体，这种休眠体被称为 。
（2）对于混有硝化细菌、蓝细菌和大肠杆菌的悬浮液，可利用选择性培养基进行微生物筛选。筛选硝化细菌的培养基成份包括 （供选：葡萄糖、纤维素、牛肉膏、（NH4）2SO4、KNO3、无机盐、琼脂、伊红-美蓝染料、H2O），制备培养基时，灭菌与调pH值的先后顺序是 。
（3）如利用上述培养基筛选大肠杆菌菌落，则应另外添加的成份是 ，菌落特征为 。
（4）将采自养殖池中的水样1ml稀释100倍，然后吸取稀释后的水样1ml，接种于上述硝化细菌选择性培养基上培养，接种所使用的工具是 。一段时间后观察菌落并计数，实验重复三次结果如图。该养殖池每毫升水含有硝化细菌 个。
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