如图为某种单基因常染色体隐性遗传病的系谱图（深色代表的个体是该遗传病患者，其余为表现型正常个体）．近亲结婚时该遗传病发病率较高，假定图中第Ⅳ代的两个个体婚配生出一个患有该遗传病子代的概率是1/48，那么，得出此概率值需要的限定条件是（ ）

A．Ⅰ-2和Ⅰ-4必须是纯合子

B．Ⅱ-1、Ⅲ-1和Ⅲ-4必须是纯合子

C．Ⅱ-2、Ⅱ-3、Ⅲ-2和Ⅲ-3必须是杂合子

D．Ⅱ-4、Ⅱ-5、Ⅳ-1和Ⅳ-2必须是杂合子