烟草花叶病毒(TMV)是一种在烟草及蔬菜等经济作物中广泛传播的病毒,对农业生产造成很大的危害。研究者利用植物基因工程的方法将烟草花叶病毒外壳蛋白基因(CP基因)导入烟草并在转化的烟草植株中表达,使其获得对烟草花叶病毒的抗性。下图是转化烟草植株的培育流程,请回答:
(1)含有CP基因的cDNA文库是通过将TMV的RNA进行 获得的。在对cDNA进行PCR扩增时,设计的引物自身不能含有 序列。
(2)将CP基因导入土壤农杆菌质粒的 ,其原因是 。
(3)含重组质粒的土壤农杆菌与烟草叶共培养前,对烟草叶的处理要求是 。
(4)共培养形成愈伤组织时的培养条件是必须 (有光或避光)。
(5)在配置诱导芽、根的培养基时,要注意在不同的培养阶段需调整 的比例。最终检测转基因是否成功,可用 方法进行检测。