在某些深海鱼中发现的抗冻蛋白基因A控制合成的抗冻蛋白A有较好的应用价值,通过转基因技术获得抗寒能力提高的植株。回答有关问题:
(1)从深海鱼提取和纯化DNA时,选择NaCl溶液的合适浓度,利用DNA和其它杂质在不同NaCl溶液中 的特性,达到分离目的,加入一定量 可以进一步获得含杂质较少的DNA。
(2)构建基因工程表达载体时,用不同类型的限制酶切割DNA后,可能产生黏性末端,也可能产生 末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接,则应选择能使二者产生 黏性末端的限制酶。
(3)为了检测A基因转录的mRNA是否翻译成抗冻蛋白A,需从转基因生物提取 ,用相应的抗体进行 。
(4)若要用动物细胞工程技术,制备抗A抗体的杂交瘤细胞,需取免疫后小鼠的B淋巴细胞,并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞按一定比例加入试管中,再加入 诱导细胞融合。细胞融合实验完成后,融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外,可能还有 ,体系中出现多种类型细胞的原因是 。
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