赖氨酸是人体必需氨基酸之一,可促进人体发育、增强免疫力。乙图为赖氨酸转基因克隆牛的培育流程,其中字母表示相应的操作过程。请回答:
(1)构建基因表达载体的过程如甲图所示,其中Pst I、Sma I、EcoR I、Apa I为四种限制酶,该过程中所使用的限制酶是 和 ,除限制酶外,该过程还需要的工具酶有 。基因表达载体除图示结构外,还应含有 和 终止子等结构。
(2)为了获得较多的卵母细胞需要对供体注射 ,卵母细胞要培养至 时期,才具备受精能力。
(3)胚胎成纤维细胞在培养过程中会出现 和 现象,分瓶时需用 处理以得到细胞悬液,进而进行 培养使细胞增殖。
(4)图乙中a、b过程利用的主要生物技术有 和 。