科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄,番茄耐寒能力大大提高,可以在相对寒冷的环境中生长。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ等四种限制酶切割位点。下图是转基因抗冻番茄培育过程的示意图(ampr为抗氨苄青霉素基因),其中①~④是转基因抗冻番茄培育过程中的相关步骤,Ⅰ、Ⅱ表示相关结构或细胞,请据图作答。
(1)图中涉及的技术有:_______________________________(答出两点)。
(2)在构建基因表达载体时,可用一种或多种限制酶进行切割。为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接,在此实例中,应该选用_________________,分别对目的基因和质粒进行切割,切割后产生的DNA片段分别为_______、_______种。
(3)图中I ampr基因的目的是________________,除了ampr、鱼的抗冻蛋白基因以外,还应具有的结构是_____________、_______________。
(4)研究人员通常采用_____________法将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内。通常采用_______________技术,在分子水平检测目的基因是否翻译形成了相应的蛋白质。