科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄,使番茄植株的耐寒能力大大提高,可以在相对寒冷的环境中生长。质粒上有Pst I 、Sma I 、Hind III 、Alul 等四种限制酶切割位点,下图是转基因抗冻番茄培育过程的示意图(ampr为抗氨苄青霉素基因),其中①—④是转基因抗冻番茄培育过程中的相关步骤,I 、II 表示相关结构或细胞。请据图作答:
(l)基因工程的核心是_______________________________。
(2)构建基因表达载体时,可用一种或多种限制酶进行切割。为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接,在此实例中,应该选用 酶,分别对目的基因和质粒进行切割,切割后产生的DNA 片段分别为 种和 种。
(3)要筛选已导入含鱼的抗冻蛋白基因的番茄细胞,应首先选择含 的培养基中筛选番茄组织细胞。
(4)研究人员通常采用 法将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内.
(5)基因工程操作中的第四步是目的基因的检测与鉴定,在分子水平检测目的基因是否翻译形成了相应的蛋白质通常采用 __________ 技术,。采用 __________ 方法在个体生物学水平上检测目的基因是否表达。
(6)图中③④分别指的是 、 ,欲获得人工种子应培养到___________阶段。将II细胞培养成完整植物体所用技术的理论基础是___________________________。