2009年10月,我国自主研发的转基因抗虫水稻“华恢l号”获得农业部颁发的安全证书。下图表示该抗虫水稻主要培育流程,据图回答:
(1)①过程需要 和 酶。
(2)组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造。下图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图(示部分基因及部分限制性内切酶作用位点),据图分析:
①人工改造时,要使抗虫基因表达,还应插入 。
②人工改造时用限制酶Ⅱ处理,其目的是:第一,去除质粒上的 基因,保证T-DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长;第二,使质粒带有单一限制酶作用位点,有利于 。第三,使质粒大小合适,可以提高转化效率等。
③若用限制酶Ⅰ分别切割改造过的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子,并构成重组Ti质粒。分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞,观察到的细胞生长的现象是 。
(3)若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的粘性末端为则该酶识别的核苷酸序列
是 。