下图为DNA分子的切割和连接过程，据图回答下列问题：（每空1分）
（1）EcoRI是一种 酶，其识别序列是 ，切割位点是 与 之间的 键。切割后产生的DNA片段末端称为 。
（2）不同来源的DNA片段“缝合”，需要的酶应是 ，它们根据来源可分为 和 两类。
（3）若切割下的目的基因进行PCR扩增。试回答下列问题：
①扩增的前提，是要一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合
成 。
②扩增的过程是：目的基因DNA受热 后解链为单链，再通过一个称为复性的环节后，新的子链开始合成。新的子链合成过程中需要在 催化作用下才可以不断延伸。如此重复循环多次。
回答下列关于胚胎工程方面的问题。
（1）胚胎工程是指对动物 或 所进行的多种显微操作和处理技术，如体外受精、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术。
（2）精子的顶体内含有 ，能协助精子穿过卵母细胞 。
（3）精子与卵子在体外受精后，应将受精卵移入 中继续培养，以检查 。
（4）从供体母牛子宫内收集胚胎的方法叫 ，其生理学基础是 。
下图所示为培育农作物新品种的过程示意图。请回答：
（1）图中①②分别表示一个已插入外源DNA片段的重组Ti质粒的________和________。
（2）若仅用二倍体植物甲的未成熟花粉培养完整植株，称为________植株，说明未成熟花粉具有________；这些植株只有通过________________才能结实。
（3）若要大量获取紫草素，可从 组织中提取。图示育种方法与传统杂交育种相比，主要优点是 。
(12分)基因工程自20世纪70年代兴起之后，在短短40年间得到了飞速发展，目前成为生物科学核心技术，在农牧业、工业、环境、能源和医药卫生等方面展示出美好的前景，据相关资料回答下列有关问题：
图1 图2
（1）图1是转基因抗冻番茄培育过程的部分示意图(ampr为抗氨苄青霉素基因)，甲、乙表示相关结构或细胞。PstⅠ酶和Sma Ⅰ酶切割基因后将产生不同的黏性末端。图1中甲代表的是________________，乙可代表________，可用PstⅠ酶和SmaⅠ酶提取鱼的抗冻蛋白基因以避免目的基因末端发生任意连接。
（2）重症联合免疫缺陷病(简称SCID)是代表一种体液和细胞免疫严重缺陷的综合征。患者先天腺苷酸脱氨酶(ada)基因缺乏，运用现代生物技术进行治疗，可以使患者的免疫功能得到很大的修复。图2表示治疗SCID的过程，在这个实例中，携带人正常ada基因的细菌相当于________，充当“分子运输车”的是病毒，目的基因是________，受体细胞是 ，该种治疗方法称为________________。
（15分，每空1.5分）凝乳酶是奶酪生产中的关键性酶。直接利用动、植物生产凝乳酶受多种因素限制，培育高酶活力凝乳酶微生物菌种是目前最有前途的发展方向。用紫外线照射芽孢杆菌，分离、培养，并检测各菌株所产生的凝乳酶活力。操作过程如图1所示。请分析回答：
（1）图1所示的b过程的目的是为获得__________，接种方法以为___________________，接种用的培养基________（是/不是）选择培养基。
（2）在一定温度下（35℃），一定时间内（通常为40分钟），凝固1mL10%脱脂奶粉的酶量为一个酶活力单位（U）。凝乳酶活力检测结果如图2所示。
①据图2所示，酶催化能力最强的是_________组。
②A2、A5组酶活力与A0组芽孢杆菌相同，两位同学对此做出了推测：
同学甲：A2、A5组芽孢杆菌未发生基因突变，而其他组发生的变化说明基因突变具有__________的特点。
同学乙：A2、A5组芽孢杆菌发生基因突变，但凝乳酶蛋白未改变，其依据的理由是____________________。为了验证上述2位同学的假设，可采用______________技术检测凝乳酶基因是否发生了突变。
（3）从牛胃液中分离到的凝乳酶以催化能力强而被广泛应用，研究人员运用基因工程技术，将编码该酶的基因转移到了微生物细胞中。
①从牛胃细胞中提取_____________，再逆转录形成cDNA。以此cDNA为模板PCR扩增目的基因。
②构建重组DNA分子（如图3所示）最好选用 _____________________限制酶。
③研究发现，如果将该凝乳酶20位和24位氨基酸改变为半胱氨酸，其催化能力将提高2倍。通过蛋白质工程生产高效凝乳酶，所需步骤有___________。
a. 蛋白质的结构设计
b. 蛋白质的结构和功能分析
c. 蛋白质结构的定向改造
d. 凝乳酶基因的定向改造
e. 将改造后的凝乳酶基因导入受体细胞
f. 将定向改造的凝乳酶导入受体细胞
【生物—选修1：生物技术实践】（15分，每空1.5分）请结合所学知识回答下列问题:
(1)无菌技术不但可以用来防止实验室的培养物被其他微生物污染,还能有效避免_______________被微生物感染。为了实现无菌操作,操作者的双手需要进行__________________________处理。
(2)在用平板划线法纯化大肠杆菌时每次划线均需__________接种环,使得下次划线时接种环上的菌种来源于___________________________。
(3)为了从土壤中获得纤维素分解菌,最好从富含__________________________的土壤中取样。为了“浓缩”所需的微生物,可以进行________________________________。
(4)提取洋葱DNA时,要在切碎的洋葱中加入一定的__________________,并进行充分地________________ ,待过滤后再收集研磨液。
(5)PCR引物是根据扩增的_______________________来设计的。PCR一般要经历三十多次循环,每次循环可以分为__________________________三步。
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