专题15：生物技术实践

（江苏卷.11）下列关于固定化酶和固定化细胞的叙述,错误的是（  ）

（江苏卷.13）血细胞计数板是对细胞进行计数的重要工具,下列叙述正确的是（  ）

（江苏卷.24）右图为苹果酒的发酵装置示意图,下列叙述错误的是（  ）

（江苏卷.25） 图1、2 分别为“DNA 的粗提取与鉴定”的实验中部分操作步骤示意图,下列叙述正确的是（  ）

（江苏卷.19）做“微生物的分离与培养”实验时,下列叙述正确的是（  ）

（江苏卷.20）下图为制备人工种子部分流程示意图,下列叙述正确的是（  ）

（江苏卷.17）关于“腐乳的制作”实验,下列叙述错误的是（  ）

（广东卷.3）关于DNA的实验，叙述正确的是（  ）
A 用兔的成熟红细胞可提取DNA
B PCR的每个循环一般依次经过变性-延伸-复性三步
C DNA溶液与二苯胺试剂混合，沸水浴后生成蓝色产物
D 用甲基绿对人的口腔上皮细胞染色，细胞核呈绿色，细胞质呈红色

（江苏卷.31）(8 分)人工瘤胃模仿了牛羊等反刍动物的胃,可用来发酵处理秸秆,提高秸秆的营养价值。
为了增强发酵效果,研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株,并对其降解纤维素能力进行了研究。 请回答下列问题:
(1)在样品稀释和涂布平板步骤中,下列选项不需要的是    (填序号)。
①酒精灯 ②培养皿 ③显微镜 ④无菌水
(2)在涂布平板时,滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多的原因是    。
(3)向试管内分装含琼脂的培养基时,若试管口粘附有培养基,需要用酒精棉球擦净的原因是    。
(4)刚果红可以与纤维素形成红色复合物,但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。 研究人员在刚果红培养基平板上,筛到了几株有透明降解圈的菌落(见下图)。 图中降解圈大小与纤维素酶的    有关。 图中降解纤维素能力最强的菌株是     (填图中序号)。

(5)研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株 J1 和 J4,在不同温度和 pH 条件下进行发测得发酵液中酶活性的结果见下图,推测菌株    更适合用于人工瘤胃发酵,理是    。

（海南卷.30）【生物－选修1：生物技术实践】生产果汁时，用果胶酶处理果泥可提高果汁的出汁率。回答下列相关问题：
（1）某同学用三种不同的果胶酶进行三组实验，各组实验除酶的来源不同外，其他条件都相同，测定各组的出汁量，据此计算各组果胶的活性的平均值并进行比较。这一实验的目的是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（2）现有一种新分离出来的果胶酶，为探究其最适温度，某同学设计了如下实验：取试管16支，分别加入等量的果泥、果胶酶、缓冲液，混匀，平均分为4组，分别置于0℃、5℃、10℃、40℃下保温相同时间，然后，测定各试管中的出汁量并计算各组出汁量平均值。该实验温度设置的不足之处有＿＿＿和＿＿＿＿。
（3）某同学取5组试管（A～E）分别加入等量的同种果泥，在A、B、C、D4个实验组的试管中分别加入等量的缓冲液和不同量的同种果胶酶，然后，补充蒸馏水使4组试管内液体体积相同；E组加入蒸馏水使试管中液体体积与实验组相同。将5组试管置于适宜温度下保温一定时间后，测定各组的出汁量。通过A～D组实验可比较不同实验组出汁量的差异。本实验中，若要检测加入酶的量等于0而其他条件均与实验组相同时的出汁量，E组设计＿＿＿（填“能”或“不能”）达到目的，其原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

（天津卷.7）DHA对脑神经发育至关重要。以A、B两种单细胞真核藻为亲本，利用细胞融合技术选育高产DHA融合藻。两种藻特性如下表。

据表回答：
（1）选育的融合藻应具有A藻               与B藻                的优点。
（2）诱导融合前需用纤维素酶处理两种藻，其目的是获得                   。
（3）通过以下三步筛选融合藻，步骤       可淘汰B藻，步骤       可淘汰生长速成率较慢的藻落，再通过步骤       获取生产所需的融合藻。
步骤a：观察藻落的大小
步骤b:用不含有机碳源（碳源——生物生长的碳素来源）的培养基进行光照培养
步骤c：测定DHA含量
（4）以获得的融合藻为材料进行甲、乙、丙三组试验，结果如下图。

①甲组条件下，融合藻产生[H]的细胞器是      ；丙组条件下产生ATP的细胞器是      。
②与甲、丙两组相比，乙组融合藻生长速率较快，原因是在该培养条件下            。甲、乙两组DHA产量均较高，但实际生产中往往采用甲组的培养条件，其原因是      。

(12分)【生物—生物技术实践】
乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖，具有重要应用价值。乳糖酶的制备及固定化步骤如下：

(1)筛选产乳糖酶的微生物L时，宜用__________作为培养基中的唯一碳源。培养基中琼脂的作用是___________。从功能上讲，这种培养基属于___________。
(2)培养微生物L前，宜采用__________方法对接种环进行灭菌。
(3)纯化后的乳糖酶可用电泳法检测其分子量大小。在相同条件下，带电荷相同的蛋白质电泳速度越快，说明其分子量越___________.
(4)乳糖酶宜采用化学结合法（共价键结合法）进行固定化，可通过检测固定化乳糖酶的___________确定其应用价值。除化学结合法外，酶的固定化方法还包括___________、_____________、离子吸附法及交联法等。

(课标I卷.39) [生物——选修1：生物技术实践]
已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题：
（1）显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用于        染色。微生物A产生的油脂不易挥发，可选用        （填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”）从菌体中提取。
（2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以        为碳源的固体培养基进行培养。
（3）若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用        直接计数；若要测定其活菌数量，可选用        法进行计数。
（4）为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则上述三个温度中，        ℃条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕        ℃设计后续实验。

(课标II卷.39)【生物——选修1：生物技术实践】
回答与胡萝卜有关的问题：
（1）胡罗卜含有的胡罗卜素中，最主要的是       （填“α—胡罗卜素”或“β—胡罗卜素”或“γ—胡罗卜素”），该胡罗卜素在人体内可以转变成两分子             ，后者缺乏会引起人在弱光下视物不清的病症，该疾病称为        ，胡罗卜素是             （填“挥发性”或“非挥发性”）物质。
（2）工业生产上，用养殖的岩藻作为原料提取胡罗卜素时，        （填“需要”或“不需要”）将新鲜的岩藻干燥。
（3）现有乙醇和乙酸乙酯两种溶剂，应选用其中的      作为胡罗卜素的萃取剂，不选用另外一种的理由是                    。

泡菜是我国的传统食品之一，但制作过程中产生的亚硝酸盐对人体健康有潜在危害。某兴趣小组准备参加“科技创新大赛”，查阅资料得到图11。
（1）制作泡菜时，泡菜坛一般用水密封，目的是__________________。乳酸发酵第一阶段的产物是___________。

（2）据图11，与第3天相比，第8天后的泡菜更适于食用，因为后者______________；pH值呈下降趋势，原因是______________。
（3）该小组得到一株“优选”乳酸菌（亚硝酸盐还原酶活力比普通乳酸菌高5倍），拟参照资料的实验方案和食盐浓度（4%-10%），探究与普通乳酸菌相比用“优选”乳酸菌制作泡菜过程中亚硝酸盐含量的高低，并确定其最适条件。请你设计一个实验结果记录表，并推测实验结论。

（上海卷.综合题四）回答下列有关微生物的问题。
霍乱弧菌（图21）经口感染，通过胃到达小肠，在小肠黏膜细胞的表面生长繁殖并产生霍乱肠毒素，后者导致感染人群腹泻甚至死亡。
（1）霍乱弧菌能穿透粘液层（分布于小肠黏膜细胞表面）通常借助于__________。
A．肠道的蠕动    B．消化液的流动      C．细菌鞭毛的运动 D．小肠上皮细胞微绒毛的摆动
用含硫代硫酸钠、柠檬酸钠、胆酸纳、蔗糖的TCBS培养基（pH8.6）能从天然样品中有效地分离出霍乱弧菌。
（2）这种TCBS培养基属于______。
A．酸性通用  B．碱性通用  C．酸性选择  D．碱性选择
研究显示、霍乱肠毒素为蛋白质，其编码基因位于CTX噬菌体基因组中．无毒型霍乱弧菌经CTX噬菌体感染后，会转变为产毒素的菌株，且其子代细菌即便在无噬菌体感染的条件下，同样能稳定维持其产毒素特性。
（3）造成霍乱弧菌这一特点的机制可能是______。
A．霍乱肠毒素在霍乱弧菌细胞分裂时分裂子代细胞
B．霍乱肠毒素能选择性杀死不含毒素编码基因的霍乱弧菌
C．CTX噬菌体感染霍乱弧菌后增殖了大量且稳定的噬菌体
D．CTX噬菌体在感染霍乱弧菌期间将其基因组插入至宿主基因组上
（4）不食不洁生水和生贝壳类海产品是防止霍乱发生措施之一，这属于传染病预防措施中的_________。
（5）下列各图中，能准确反映霍乱弧菌疫苗接种者血清中抗霍乱弧菌抗体的浓度随时间变化趋势的是_____。