微生物吸附是重金属废水的处理方法之一。金属硫蛋白（MT）是一类广泛存在于动植物中的金属结合蛋白，具有吸附重金属的作用。科研人员将枣树的MT基因导入大肠杆菌构建工程菌。回答下列问题：
（1）根据枣树的MTcDNA的核苷酸序列设计了相应的引物（图1甲），通过PCR扩增MT基因。已知A位点和B位点分别是起始密码子和终止密码子对应的基因位置。选用的引物组合应为___________。
（2）本实验中，PCR所用的DNA聚合酶扩增出的MT基因的末端为平末端。由于载体E只有能产生黏性末端的酶切位点，需借助中间载体P将MT基因接入载体E。载体P和载体E的酶切位点及相应的酶切序列如图1乙所示。
①选用___________酶将载体P切开，再用___________（填"T 4DNA或"E·coli81DNA"）连接酶将MT基因与载体P相连，构成重组载体P′。
②载体P′不具有表达MT基因的___________和___________。选用___________酶组合对载体P′和载体E进行酶切，将切下的MT基因和载体E用DA连接酶进行连接，将得到的混合物导入到用___________离子处理的大肠杆菌，筛出MT工程菌。
（3）MT基因在工程菌的表达量如图2所示。结果仍无法说明已经成功构建能较强吸附废水中重金属的MT工程菌，理由是___________。
研究显示，糖尿病患者由于大脑海马神经元中蛋白 过度磷酸化，导致记忆力减退。细胞自噬能促进过度磷酸化的蛋白 降解，该过程受蛋白激酶cPKCγ的调控。
为探究相关机理，以小鼠等为材料进行了以下实验。
实验Ⅰ：探究高糖环境和蛋白激酶 对离体小鼠海马神经元自噬的影响。配制含有 葡萄糖的培养液模拟正常小鼠的体液环境。将各组细胞分别置于等量培养液中，A组培养液不处理，B组培养液中加入 的 试剂 ，C组培养液中加入 葡萄糖溶液 。实验结果见图甲。
实验Ⅱ：通过水迷宫实验检测小鼠的记忆能力，连续 天测量 组小鼠的逃避潜伏期，结果见图乙。逃避潜伏期与记忆能力呈负相关，实验中的糖尿病记忆力减退模型小鼠（ 小鼠）通过注射药物STZ制备。
（1）人体中血糖的来源有＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿（答出2个方面的来源即可）。已知 是通过破坏某种细胞引起了小鼠血糖升高，据此推测，这种细胞是＿＿＿＿＿＿。
（2）实验Ⅰ的C组中，在含 葡萄糖的培养液中加入 葡萄糖溶液后，细胞吸水、体积变大，说明加入该浓度葡萄糖溶液后培养液的渗透压＿＿＿＿＿＿（填“升高”或“降低”），B组实验结果可说明渗透压的变化对C组结果＿＿＿＿＿＿（填“有”或“没有”）干扰。图甲中，A组和C组的实验结果说明蛋白激酶 对海马神经元自噬水平的影响是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（3）图乙中a、b两条曲线所对应的实验动物分别是＿＿＿＿＿＿（填标号）。
①正常小鼠
②敲除 基因的小鼠
③ 小鼠
④敲除 基因的 小鼠
（4）对 小鼠进行干预后，小鼠的记忆能力得到显著提高。基于本研究，写出2种可能的干预思路：＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
当植物吸收的光能过多时，过剩的光能会对光反应阶段的 复合体（ ）造成损伤，使 活性降低，进而导致光合作用强度减弱。细胞可通过非光化学淬灭（ ）将过剩的光能耗散，减少多余光能对 的损伤。已知拟南芥的 蛋白有 个功能：①修复损伤的 ；②参与 的调节。科研人员以拟南芥的野生型和H基因缺失突变体为材料进行了相关实验，结果如图所示。实验中强光照射时对野生型和突变体光照的强度相同，且强光对二者的 均造成了损伤。
（1）该实验的自变量为＿＿＿＿＿＿。该实验的无关变量中，影响光合作用强度的主要环境因素有＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿（答出2个因素即可）。
（2）根据本实验，＿＿＿＿＿＿（填“能”或“不能”）比较出强光照射下突变体与野生型的 活性强弱，理由是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（3）据图分析，与野生型相比，强光照射下突变体中流向光合作用的能量＿＿＿＿＿＿（填“多”或“少”）。若测得突变体的暗反应强度高于野生型，根据本实验推测，原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
为了将某纳米抗体和绿色荧光蛋白基因融合表达，运用重组酶技术构建质粒，如图1所示。请回答下列问题：
（1）分别进行 扩增片段 与片段 时，配制的两个反应体系中不同的有＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，扩增程序中最主要的不同是＿＿＿＿＿＿。
（2）有关基因序列如图2。引物 应在下列选项中选用＿＿＿＿＿＿。
| A． |
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| B． |
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| C． |
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| D． |
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（3）将 产物片段与线性质粒载体混合后，在重组酶作用下可形成环化质粒，直接用于转化细菌。这一过程与传统重组质粒构建过程相比，无需使用的酶主要有＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（4）转化后的大肠杆菌需采用含有抗生素的培养基筛选，下列叙述错误的有＿＿＿＿＿＿。
| A． |
稀释涂布平板需控制每个平板 个菌落 |
| B． |
抗性平板上未长出菌落的原因一般是培养基温度太高 |
| C． |
抗性平板上常常会出现大量杂菌形成的菌落 |
| D． |
抗性平板上长出的单菌落无需进一步划线纯化 |
（5）为了验证平板上菌落中的质粒是否符合设计，用不同菌落的质粒为模板，用引物 和 进行了 扩增，质粒 的扩增产物电泳结果如图3。根据图中结果判断，可以舍弃的质粒有＿＿＿＿＿＿。
（6）对于 产物电泳结果符合预期的质粒，通常需进一步通过基因测序确认，原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
糖尿病显著增加认知障碍发生的风险。研究团队发现在胰岛素抵抗（ ）状态下脂肪组织释放的外必囊泡（ ）中有高含量的 （一种 ），使神经细胞结构功能改变，导致认知水平降低。图1示 鼠脂肪组织与大脑信息交流机制。
请回答下列问题：
（1）当神经冲动传导至①时，轴突末梢内的＿＿＿＿＿＿移至突触前膜处释放神经递质，与突触后膜的受体结合，使＿＿＿＿＿＿打开，突触后膜电位升高。若突触间隙 浓度升高，则突触后膜静息电位绝对值＿＿＿＿＿＿。
（2）脂肪组织参与体内血糖调节，在胰岛素调控作用下可以通过＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿降低血糖浓度， 状态下由于脂肪细胞的胰岛素受体＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，降血糖作用被削弱。图1中由②释放的③经体液运输至脑部， 进入神经细胞，抑制细胞内＿＿＿＿＿＿。
（3）为研究 对突触的影响，采集正常鼠和 鼠的 置于缓冲液中，分别注入 组实验鼠， 组的处理是＿＿＿＿＿＿。 周后检测实验鼠海马突触数量，结果如图2。分析图中数据并给出结论：＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（4）为研究抑制 可否改善 引起的认知障碍症状，运用腺病毒载体将 抑制剂导入实验鼠。导入该抑制剂后，需测定对照和实验组 含量，还需通过实验检测＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
帕金森综合征是一种神经退行性疾病，神经元中 蛋白聚积是主要致病因素。研究发现患者普遍存在溶酶体膜蛋白 变异，如图所示。为探究 蛋白在该病发生中的作用，进行了一系列研究。请回答下列问题：
（1）帕金森综合征患者 蛋白的第 位氨基酸由天冬氨酸突变为丙氨酸，说明 基因发生＿＿＿＿＿＿而突变，神经元中发生的这种突变＿＿＿＿＿＿（从“能”“不能”“不一定”中选填）遗传。
（2）突变的 基因在细胞核中以＿＿＿＿＿＿为原料，由 聚合酶催化形成＿＿＿＿＿＿键，不断延伸合成 。
（3） 转移到细胞质中，与＿＿＿＿＿＿结合，合成一段肽链后转移到粗面内质网上继续合成，再由囊泡包裹沿着细胞质中的＿＿＿＿＿＿由内质网到达高尔基体。突变的 基因合成的肽链由于氨基酸之间作用的变化使肽链的＿＿＿＿＿＿改变，从而影响 蛋白的功能。
（4）基因敲除等实验发现 蛋白参与溶酶体内酸碱稳态调节。如图1所示，溶酶体膜的＿＿＿＿＿＿对 具有屏障作用，膜上的 转运蛋白将 以＿＿＿＿＿＿的方式运入溶酶体，使溶酶体内 小于细胞质基质。 蛋白可将 运出，维持溶酶体内 约为 。据图2分析， 蛋白变异将影响溶酶体的功能，原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（5）综上推测， 蛋白变异是引起 蛋白聚积致病的原因，理由是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
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