PCR技术可用于临床的病原菌检测。为检测病人是否感染了某种病原菌，医生进行了相关操作：①分析PCR扩增结果；②从病人组织样本中提取DNA；③利用PCR扩增DNA片段；④采集病人组织样本。回答下列问题：
（1）若要得到正确的检测结果，正确的操作顺序应该是 （用数字序号表示）。
（2）操作③中使用的酶是 ，PCR 反应中的每次循环可分为变性、复性、 三步，其中复性的结果是 。
（3）为了做出正确的诊断，PCR反应所用的引物应该能与 特异性结合。
（4）PCR（多聚酶链式反应）技术是指 。该技术目前被广泛地应用于疾病诊断等方面。
【生物——选修1:生物技术实践专题】
请分析回答下列有关生物技术实践的问题：
（1）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，倒平板时，需要等待平板冷却 后，将平板倒过来放置。微生物接种的方法，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法,后者是将菌液进行一系列的 ，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。菌落是在固体培养基上由 细胞繁殖而来的形态可见的子细胞群体。
（2）对月季进行组织培养时，适宜花药培养的时期是_______期，为确定花粉是否处于该时期，镜检时最常用的染色方法是_________。
（3）测定亚硝酸盐含量的原理是，在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与 发生重氮化反应后，与N—1—萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。
（4）用萃取法提取胡萝卜素的实验中，要将胡萝卜进行粉碎和干燥的目的是 ；得到的萃取液需要用 方法进行浓缩。
生长素能促进细胞伸长生长，其作用机理为：生长素通过细胞壁，与细胞膜上的受体结合，通过进一步信号传递促进质子泵基因的表达，质子泵是细胞膜上转运H+的载体，可将H+从膜内运到膜外，使细胞壁酸化，酸化后的细胞壁变得松弛从而有利于伸展。
回答下列问题：
（1）在幼嫩的芽、叶和发育的种子中， 经过一系列反应可转变成生长素。
（2）生长素对植物生命活动的影响，根本上是对细胞内的 的影响。
（3）与质子泵的合成与运输直接相关的细胞器有 。据题意分析，生长素通过细胞壁的方式是 。
（4）研究发现用赤霉素处理过的植物根系发育不好，据此分析，在影响植物生根方面，低浓度的生长素和赤霉素表现出相互 。
右图A、B、C及对应面积代表某草原生态系统中的三种生物成分及其在某一年同化的能量。请回答以下问题：
（1）三者之间不能建立简单的加和关系，是由于生态系统中_______ （填字母）所固定的能量在逐级传递过程中大部分_____________________。
（2）A、B、C三种成分构成一个______________，若是一个完整的生态系统，还缺少______________成分。
（3）由于人类过度放牧而导致草原严重退化，破坏了草原生态系统的_______稳定性，这说明人类的活动会改变演替的_____________________。
在转B基因（B基因控制合成毒素蛋白B）抗虫棉商品化的同时，棉虫对毒素蛋白B产生抗性的研究也正成为热点。请分析回答：
（1）棉虫对毒素蛋白B的抗性增强，是在转B基因抗虫棉的选择作用下，棉虫种群中抗B基因___ _的结果。为减缓棉虫种群对毒素蛋白B抗性增强的速度，可以在抗虫棉田区间隔种植 。
（2）豇豆胰蛋白酶抑制剂（由D基因控制合成）可抑制昆虫肠道内蛋白酶活性，使害虫减少进食而死亡。研究者将同时含B基因和D基因的重组DNA分子导入棉花细胞中，获得转基因棉。与只转入B基因的转基因棉相比，棉虫种群对此转基因棉抗性增强的速度减缓，其原因是 。
（3）棉花短纤维由基因A控制，研究者获得了多个基因型为AaBD的短纤维抗虫棉植株。其中B基因和D基因位于同一条染色体上，减数分裂时不发生交叉互换。
①植株I相关基因位置如图1，该植株自交，F1中长纤维不抗虫植株的基因型为 ，
能够稳定遗传的长纤维抗虫植株的比例是 。
②植株II自交，F1性状分离比是短纤维抗虫：长纤维不抗虫3：l，则植株H中B基因和D基因位于 染色体上（填图2中编号）。
③植株III自交，F1性状分离比是短纤维抗虫：短纤维不抗虫：长纤维抗虫-2：1：1，则植株III产生的配子的基因型为 。
（4）某种群陆地棉，基因型为AA、Aa的植株分别为90%、9%，它们能够正常繁殖，但基因型为aa植株不能产生卵细胞，能产生花粉。问该种群自由交配一代后，具有正常繁殖能力的植株占 。
下图为三种质粒和一个含目的基因的片段的示意图。图中Ap为氨苄青霉素抗性基因，Tc为四环素抗性基因，lacZ为蓝色显色基因，EcoR Ⅰ（0.7Kb）、PvuⅠ（0.8 Kb）等为限制酶及其切割的位点与复制原点的距离，1Kb=1000个碱基对长度。请据图回答：
（1）质粒A、C不能作为目的基因运载体的理由分别是 、 。
（2）将图中的目的基因与质粒B进行重组，需要用到 酶和DNA连接酶。
（3）基因工程中检测筛选含有目的基因的重组质粒是一个重要的步骤。现运用 酶切质粒，完全酶切后进行电泳观察，若出现长度为1.1kb和 kb，或者 kb和 kb的片段，则可以判断该质粒已与目的基因重组成功（重组质粒上目的基因的插入位点与EcoRⅠ的识别位点之间的碱基对忽略不计）。
粤公网安备 44130202000953号