酶E为人体消化道中的某种酶，现用固化蛋白质作底物来研究酶E的催化实验：在5支试管内分别加入含有等量酶E但pH值各不相同的缓冲液，每支试管加1块1．5cm3的长方体固化蛋白块。将5支试管都置于温度控制在20℃的温水中。实验从加入固化蛋白块时开始计时。每2分钟测量固化蛋白块的长度一次，计算已被消化的固化蛋白块的百分率，所得结果见下表：
| 实验开始后的时间 （min） |
固化蛋白块被消化的% |
||||
| PH=2 |
PH=4 |
PH=6 |
PH=8 |
PH=10 |
|
| 2 |
11 |
8 |
0 |
0 |
0 |
| 4 |
29 |
13 |
0 |
0 |
0 |
| 6 |
40 |
21 |
0 |
0 |
0 |
| 8 |
55 |
30 |
0 |
0 |
0 |
| 10 |
70 |
40 |
3 |
0 |
0 |
| 12 |
95 |
51 |
11 |
4 |
0 |
（1）实验过程中用水浴的目的是为了控制 变量。
（2）根据该实验结果能否确定酶E的最适PH值？理由是什么？ 。
（3）酶E最可能是 酶。假设再用唾液代替酶E做上述实验，结合本实验，可以说明酶具有 特性。
（4）从“影响酶的活性”的角度，请提出一种方法改进实验，使实验在最短的时间内完成 。
(9分)国家863计划项目“利用崂山奶山羊乳腺生物反应器制备药用蛋白”取得重大进震目前，已
经成功获得经纯化的抗凝血酶III蛋白，达到国际先进水平。下面是制作崂山奶山羊乳腺生物反应器的流程图：
(1)根据流程图分析，动物乳腺生物反应器主要利用了 技术(至少写2种)。
(2)要实现①超数排卵，应在崂山奶出羊A发情期的某一阶段用 处理，然后收集卵子。通过②采集的精子不能直接使成熟的卵子受精，原因是 。
(3)过程④需将抗凝血酶III基因注入受精卵内，在显微镜下判断是否受精作用的标志是 。
(4)要使人的抗凝血酶III基因在山羊乳腺细胞中特异性表达，在⑤之前要提取囊胚期的 细胞，采
用检测 技术对其 和 进行检测。
(5)若要一次获得多只完全相同的转基因崂山奶山羊D，⑤应采用 技术。
卡罗林斯卡医学院2012年10月8日宣布，将2012年诺贝尔生理学或医学奖授予约翰·格登和山中伸弥，以表彰他们在“体细胞重编程技术”领域做出的革命性贡献。请回答下列问题：
（1）约翰·格登于1962年通过实验把蝌蚪已分化体细胞的细胞核移植进入卵母细胞质中，并成功培育出“克隆青蛙”。由于动物细胞的全能性会随着动物细胞 程度的提高而逐渐受到限制，分化潜能逐渐变弱，直到今天也还不能用类似 （植物细胞工程的技术手段）的方法获得完整的动物个体。因此，约翰·格登培育“克隆青蛙”，实际是通过 （动物细胞工程的技术手段）来实现的。
（2）山中伸弥于2006年把4个关键基因通过逆转录病毒转入小鼠的成纤维细胞，使其变成多功能干细胞。在该技术中，逆转录病毒是这4个关键基因进入成纤维细胞的 （基因工程工具），它能够携带外源基因进入受体细胞，并整合到其染色体 上。
（3）所谓“体细胞重编程技术”即将成年体细胞重新诱导回早期干细胞状态，即获得iPS细胞。iPS细胞与胚胎干细胞一样，具有发育的 ，即可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞。
（4）目前获得iPS细胞的方法除上述两种之外，常见的还有以下两种：一是诱导成年体细胞与胚胎干细胞
产生四倍体细胞；二是应用 技术（动物细胞工程的技术手段）将生殖细胞置于特定条件下进行培养。
【生物一现代生物科技专题】下图为单克隆抗体制备流程示意图。
(1)图中①过程是 。对动物细胞来说，②过程独有的方法是 。③过程的目的是 。④过程的目的是获得 。
(2)在培养过程中为防止杂菌感染，应向培养液中添加 ；其体外培养需用CO2培养箱，其中CO2的主要作用是 。
(3)若要大量制备抗该蛋白的单克隆抗体，可将该杂交瘤细胞注射到小鼠的 中使其增殖。
(4)单克隆抗体与传统抗体相比，其优点是 。
(10分)【生物一生物技术实践】
利用微生物由纤维素生产乙醇可以采用下面的基本流程进行，请回答相关问题：
(1)将采集的土样混匀后称取lg，置于经过___________法灭菌处理的培养基中。自然界中①环节需要的微生物大多分布在______________的环境中。将从土壤中获得的微生物培养在以____________为碳源的培养基上，再用____________从培养基上鉴定并选出所需菌种。
(2)为确定①环节得到的是不是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验，其发酵方法有液体发酵和_______________发酵。对纤维酶的测定方法是采用这种酶分解滤纸等纤维素后产生的____________进行定量测量。确定了所需要的微生物后，就可进行图中_________________环节，以获得进行酒精发酵的原料。
(3)生产中可以满足④环节的常用菌种是______________，为了确保获得较纯净的乙醇，发酵过程需保持______________________________环境。
回答下列问题：
I．甲图为某植物成熟的叶肉细胞的亚显微结构模式图；乙图为甲中的两种膜结构，以及发生的生化反应；丙图为某高等动物分泌细胞。请据图分析回答：
（1）假设甲图细胞为菠菜根尖分生区细胞，不应该有的结构有____________(填图中标号)；
（2）请写出两种鉴定甲细胞是否为活细胞的实验方法：
① ；② 。
（3）图乙中的两种生物膜分别存在于图甲的 (填标号)中。
（4）若已知丙细胞的分泌物是蛋白质类物质，除酶外，还可能是 等。(写出两种可能的分泌物的名称)
II．下图（一）为某细胞模式图的一部分，图（二）a—h为细胞器或细胞的某一结构（图（二）中各结构放大比例不同）。请据图回答有关问题（括号中填序号或字母，横线上填文字）：
（1）图（二）中 是图（一）中①表示的细胞器的放大图；
（2）图（二）的a—h中控制物质进出的细胞结构是 。
（3）若图（一）是浆细胞，与其他没有分泌功能的细胞相比较，浆细胞的a—h中数目一定较多的细胞器是[ ] （除c以外）。
（4）如果图（一）细胞具有明显的b结构，则该细胞是否会出现g的现象？__________，原因是__________________________。
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