下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图,请据图回答。

(1)在基因工程操作程序中,图中①②表示,⑦表示,⑧表示,⑩表示目的基因的检测与鉴定。不能利用人的唾液腺细胞来完成①过程的原因是。
(2)过程②必需的酶是酶。过程③是DNA受热
后解链为单链,③④⑤表示的PCR技术需要的条件有:模板DNA、四种脱氧核苷酸、、、稳定的缓冲液和严格的温度控制设备。
(3)在利用A和B获得C的过程中,必须用切割A和B,使它们产生,再加入,才可以形成C。
(4)基因工程是否成功可以在不同水平层次上进行检测。在DNA水平上检测的方法是。在蛋白质水平上进行检测的方法是从大肠杆菌中提取蛋白质,进行,观察是否产生杂交带。
(5)为使过程⑧更易进行,可用Ca2+处理D,使其成为细胞。