（福建卷.33）【生物-现代生物科技专题】
GDNF是一种神经营养因子。对损伤的神经细胞具有营养和保护作用。研究人员构建了含GDNF基因的表达载体（如图1所示），并导入到大鼠神经干细胞中，用于干细胞基因治疗的研究。请回答：
（1）在分离和培养大鼠神经干细胞的过程中，使用胰蛋白酶的目的是 。
（2）构建含GDNF基因的表达载体时，需选择图1中的 限制酶进行酶切。
（3）经酶切后的载体和GDNF基因进行连接，连接产物经筛选得到的载体主要有三种：单个载体自连、GDNF基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接（如图1所示）。为鉴定这3种连接方式，选择HpaI酶和BamHI酶对筛选的载体进行双酶切，并对酶切后的DNA片段进行电泳分析，结果如图2所示。图中第
泳道显示所鉴定的载体是正向连接的。
（4）将正向连接的表达载体导入神经干细胞后，为了检测GDNF基因是否成功表达，可用相应的
与提取的蛋白质杂交。当培养的神经干细胞达到一定的密度时，需进行 培养以得到更多数量的细胞，用于神经干细胞移植治疗实验。
甘蔗发霉时滋生的节菱孢霉菌能产生三硝基丙酸（3-NP），引起神经细胞中毒或凋亡。图甲表示突触结构，③表示兴奋性神经递质。图乙表示注射生理盐水配制的1ml3-NP（300umol/L）后，小鼠纹状体细胞合成的与凋亡蛋白相关的mRNA（P53）的总含量。请回答。
（1）甲中结构①发生的代谢过程是 ，④（受体）的功能是 。
（2）胆碱酯酶能够分解兴奋性神经递质，而3-NP能抑制胆碱酯酶的合成，则图甲中物质③的含量会 ，将导致下一个神经元 。
（3）图乙同期对照组中应加入 。在神经细胞凋亡过程中直接起作用的细胞器是 。
（4）据图乙推测小鼠纹状体细胞凋亡数目可能在 时段内增加的最多，原因是 。
分毛角蛋白Ⅱ型中间丝（KIFⅡ）基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。
(1)过程①中最常用的运载工具是_______，所需要的酶是限制酶和____________。
(2)在过程②中，用________处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养过程中，将成纤维细胞至于5％CO2的气体环境中，CO2的作用是_________。
(3)在过程③中，用_______处理以获取更多的卵（母）细胞。成熟卵（母）细胞在核移植前需要进行________处理。
(4)从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是_________。在胚胎移植前，通过_______技术可获得较多胚胎。
分请回答下列有关胡萝卜素提取的问题：
(1)从植物中提取胡萝卜素常用的方法是萃取，所用溶剂具有__________________特点。
(2)萃取前，要将胡萝卜进行_________和________。萃取液浓缩前需进行 。
(3)萃取时应采用__________加热，原因是________________________。
(4)新鲜的胡萝卜干燥处理时要注意控制______________________，鉴定胡萝卜素粗品的方法是_______________________________。
分）为研究乙烯影响植物根生长的机理，研究者以拟南芥幼苗为材料进行实验
（1）乙烯和生长素都要通过与 结合，将 传递给靶细胞，从而调节植物的生命活动。
（2）实验一：研究者将拟南芥幼苗放在含不同浓度的ACC（乙烯前体，分解后产生乙烯）、IAA（生长素）的培养液中培养，测量并记录幼苗 ，结果如下表。
结果说明乙烯和生长素都能够 根生长，与单独处理相比较，两者共同作用时 。
（3）实验二：将拟南芥幼苗分别放在含有不同浓度 ACC的培养液中培养，12小时后测定幼苗根中生长素的含量，实验结果如图所示。据图分析，乙烯通过促进 来影响根生长。
（4）研究者将拟南芥幼苗放在含NPA（生长素极性运输阻断剂）的培养液中培养，一段时间后，比较实验组和对照组幼苗根伸长区细胞长度，结果无显著差异。由此分析，研究者的目的是探究乙烯是否通过影响 来影响根生长。
分）下图是人体维持内环境稳态的几种调节系统的关系模式图，请据图回答
（1）神经纤维未受刺激时膜外的电位是 。在神经纤维上放置两个电极，连接到一个电表上（如上图），如果在X处给予神经纤维一个适宜的刺激，可观察到电表指针的变化是 ，引起该处膜电位发生改变的原因是 离子内流所致；如果在Y处给予一个相同的刺激，可观察到电表指针的变化是 ，其原因是 。
（2）在Z处给予某种药物后，再刺激轴突X，发现神经冲动的传递被阻断，但检测到Z处神经递质的量与给予药物之前相同，这是由于该药物抑制了突触后膜上 的功能。
（3）如果该图代表人在寒风中瑟瑟发抖时身体内某处的调节示意图，则细胞甲可能是 细胞，分泌物a可代表其分泌的 激素，当血液中的激素b即__ 激素的含量增加到一定程度时，又会反过来抑制细胞甲的活动。该种调节方式也主要体现了细胞膜具有 的功能。
（4）科学研究表明：精神因素（焦虑、紧张等的心理应激）会使T细胞活性下降，对病毒、真菌感染的抵抗能力和对肿瘤细胞的监控能力下降，还间接引起机体生成抗体的能力降低。如果该图中的细胞甲代表T淋巴细胞，则分泌物a是 。该图充分说明 调节网络是机体维持内环境稳态的主要调节机制。
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