（天津卷.8）纤维素分子不能进入酵母细胞，为了使酵母菌能够利用环境中的纤维素为原料生产酒精，构建了含3种不同基因片段的重组质粒，下面是酵母菌转化及纤维素酶在工程菌内合成与运输的示意图。
据图回答：
（1）本研究构建重组质粒时看选用四种限制酶，其识别序列如下图，为防止酶切片段的自身环接，可选用的限制酶组合是______或__________
| A．①② | B．①③ | C．②④ | D．③④ |
(2)设置菌株Ⅰ为对照，是为了验证__________不携带纤维素酶基因。
(3)纤维素酶基因的表达包括__________和__________过程，与菌株Ⅱ相比，在菌株Ⅲ、Ⅳ中参与纤维素酶合成和分泌的细胞器还有______________________________。
（4）在以纤维素为唯一C源的培养基上分别培养菌株Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ，菌株___________不能存活，原因是_________________________________。
(5)酵母菌生产酒精的细胞部位是___________，产生酒精时细胞的呼吸方式是___________，在利用纤维素生产酒精时，菌株Ⅳ更具有优势，因为导入的中重组质粒含有____________。使分泌的纤维素酶固定于细胞壁，减少因培养液更新二造成的酶的流失，提高酶的利用率。
下图为细胞融合的简略过程（只考虑两个细胞的融合），请据图完成下列问题：
（1）若A、B是基因型分别为rrHH、RRhh两个烟草品种细胞的花粉，且这两对基因位于非同源染色体上，由于一对隐性纯合基因(rr或hh)的作用，在光照强度大于800勒克斯时，都不能生长。
①实验开始时必须用______________除去不利于原生质体融合的物质。
②实验中除获得杂种细胞外，还有基因型为______________的融合细胞。
③设计一方法（不考虑机械方法），从培养液中分离出杂种细胞：__________________________________________。
(2)若该过程是制备治疗“SARS”病毒的单克隆抗体，A为人B淋巴细胞, B为鼠骨髓瘤细胞。
④克隆抗体制成“生物导弹”主要利用了抗体的______________特性。
⑤A细胞来自于______________。
“白菜—甘蓝”是用细胞工程方法培育出来的蔬菜新品种，它具有生长周期短、耐热性能强、易储存等优点。下为“白菜—甘蓝”的培育过程示意图，请据图完成下列问题：
（1）在上述过程中，去除细胞壁的方法是____________________________。
（2）图中的原生质体A和原生质体B能融合成一个杂种细胞，所依据的生物学原理是__________________________________________。
（3）自然状态下，白菜和甘蓝杂交不会成功，原因是____________________________。通过上述方法获得的“白菜—甘蓝“是否可育？____________________________，为什么？______________________________________________________________________。
（4）如果原生质体A为小鼠的效应B细胞，原生质体B为小鼠的骨髓瘤细胞，诱导二者融合时，通常用______________。融合后杂种细胞的特点是________________________________________________________ 。
在植物基因工程中，用土壤农杆菌中的Ti质粒作为运载体，把目的基因重组入Ti质粒上的TDNA片段中，再将重组的TDNA插入植物细胞的染色体DNA中。
（1）科学家在进行上述基因操作时，要用同一种_______分别切割质粒和目的基因，质粒的黏性末端与目的基因DNA片段的黏性末端就可通过_______而黏合。
（2）将携带抗除草剂基因的重组Ti质粒导入二倍体油菜细胞，经培养、筛选获得一株有抗除草剂特性的转基因植株。经分析，该植株含有一个携带目的基因的TDNA片段，因此可以把它看作是杂合子。理论上，在该转基因植株自交F1代中，仍具有抗除草剂特性的植株占总数的_______，原因是
_____________________________________________________________。
（3）种植上述转基因油菜，它所携带的目的基因可以通过花粉传递给近缘物种，造成“基因污染”。如果把目的基因导入叶绿体DNA中，就可以避免“基因污染”，原因是______________。
基因工程自20世纪70年代兴起后，在短短的30年间，得到了飞速的发展，目前已成为生物科学的核心技术。
（1）据报道，至2007年1月29日，全球转基因作物种植面积突破1亿公顷，将目的基因导入农作物的方法有哪些？目的基因能否在农作物中稳定遗传的关键是什么？
（2）将目的基因导入微生物细胞常用的转化方法是：第一步：________________________；第二步：______________________________________________________________________。
（3）弯曲的蚕丝强度低于由蜘蛛拖牵的直丝，我国科研人员首次在世界上通过转基因的方法将“绿色荧光蛋白基因”与“蜘蛛拖牵丝基因”拼接后成功插入蚕丝基因组并获得表达。该操作中目的基因是什么？采用绿色荧光蛋白基因的主要目的是什么？
（4）目的基因能在受体细胞内获得表达的原因是什么？
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