下表中甲、乙分别是分离两种土壤中微生物的培养基的配方，图丙所示为相关分离过程，回答下列问题（注：水解酪素，即水解酪蛋白，由酪蛋白水解得到）：
| KH2PO4 |
1.4g |
纤维素粉 |
5.0g |
| Na2HPO4 |
2.1g |
NaNO3 |
1.0g |
| MgSO4·7H2O |
0.2g |
Na2HPO4 |
1.2g |
| 葡萄糖 |
10.0g |
KH2PO4 |
0.9g |
| 尿素 |
1.0g |
MgSO4·7H2O |
0.5g |
| 琼脂 |
15.0g |
KCl |
0.5g |
| |
|
酵母膏 |
0.5g |
| |
|
水解酪素 |
0.5g |
| 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到100mL |
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL |
||
| 甲 |
乙 |
（1）从功能上看，甲培养基属于 。从物理性质上看，甲培养基属于 。其中提供氮源的物质是 。
（2）如果将乙培养基配制成固体培养基，则在该培养基上长出的菌落是否都能分解纤维素? 。如果培养基中加入 可以筛选出具有分解纤维素能力的菌株，同时透明圈越 （大、小），表示该菌分解纤维素的能力越强。
（3）为了计数微生物的数量，图丙采用 法进行接种培养计数，除此之外，还可以采用 法进行计数。其中前一种计数方法所得结果要比后一种计数方法所得结果 （大、小）。
（4）一位同学利用图丙的方法步骤在4个平板培养基上分别接种0.1 mL土壤稀释液④，培养后菌落数分别为180、155、176、129个，则1 mL原土壤样液①中微生物数量约为 。
通过植物组织培养技术，可以快速繁殖、培育无病毒的植物。据图回答问题：
（1）紫草细胞中提取的紫草素是制造治疗烫伤和割伤的药物以及染料和化妆品的原料。若要从大量培养的紫草愈伤组织中提取紫草素，不需要经过图中②________过程，且哪项条件是不需要的__________。
| A．消毒灭菌 | B．适宜温度 | C．充足光照 | D．适宜养料和激素 |
（2）用植物组织培养方法诱导离体的植物组织形成具有生根发芽能力的胚状体结构，若包裹上人造种皮，制成人工种子，则图中的C相当于种子结构中的，主要作用是_____________
圆褐固氮菌是自生固氮菌，为经济有效地提高农作物产量，人们一直在努力研究、寻找固氮基因。对基因的研究常常因研究样品中DNA含量太低而难以进行，PCR技术有效地解决了这个问题。如今对基因的深入研究使人类跨入了蛋白组研究时代，从复杂的细胞混合物中提取、分离高纯度的蛋白质是该研究要做的基本工作之一。
（1）某同学在做微生物实验时，不小心把圆褐固氮菌样品和酵母菌样品混在一起，已知青霉素会影响固氮菌的生长繁殖，但不影响真菌的生长繁殖。请填空完成分离这两种菌的主要实验步骤：
①分别配置的培养基和的培养基，分别分成两份，依次标上A、a、B、b备用；
②分别向A、B培养基接种；
③把接种后的培养基放在恒温箱中3d—4d；
④从A、B培养基上生长的中挑取生长良好的菌株，分别接种到中；
⑤。
（2）用基因工程技术从经过分离、提纯的圆褐固氮菌中获取固氮基因，然后进行PCR扩增。下列表1和表2分别表示用PCR扩增固氮基因的反应体系及反应条件。
| 反应条件 |
||
| 温度 |
时间 |
|
| 变性 |
95℃ |
30s |
| 复性 |
55℃ |
30s |
| 延伸 |
72℃ |
1min |
| 30个循环后 |
适宜 |
5-10min |
| 保温 |
4℃ |
2h |
| PCR反应体系 |
50ul |
| 缓冲液 |
5ul |
| 脱氧核苷酸 |
1ul |
| 引物A |
0.5ul |
| 引物B |
0.5ul |
| DNA聚合酶 |
0.5U |
| 模板DNA |
1-2ul |
| 加去离子水补足至50 ul |
①从上表中可得出，PCR技术与DNA复制相比较，主要区别之一是。
此外，从反应条件看，所使用的DNA聚合酶应具有__________的特点。每次循环都需要2种引物的主要原因是_______________________________。
根据各类微生物的形态结构特点和新陈代谢类型，利用选择性培养基和鉴别培养基，结合显微镜检以及菌落特征，可以把混杂在一起的硝化细菌、乳酸菌、酵母菌、金黄色葡萄球菌、圆褐固氮菌分离开来。下面是分离筛选的方法步骤，请根据各个步骤的条件，填写空格中的内容。首先配制一系列不同性质的固体培养基，然后进行灭菌。再将上述微生物的混合液分别接种到各种培养基上进行培养。
(1)用无氮培养基可筛选出 ；
(2)用不含有机碳源的选择培养基可筛选出 ；
(3)用加了较高浓度NaCl的选择培养基可筛选出 ，或者根据菌落的颜色呈现 色，将其挑取单独培养；
(4)在无氧环境下培养混合菌， 和 可以生长，加入一定浓度的乳酸，使培养基pH充分降低，可抑制 微生物的生长，利用菌落特征，结合显微镜检，选取生长优势菌落，即可分离出 。
下列是有关微生物的培养与应用以及酶的应用等问题，请分析回答。
(1) 下图是利用法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步分散到培养基的表面。
(2) 分析下面培养基的配方：NaNO3、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO4•7H2O、KCl、H2O。若此培养基用于培养分解尿素的细菌，则应除去上述成分，并加入物质，以补充源。若用于培养纤维素分解菌，应加入物质，为检测纤维素分解菌的存在与否，还应加入染料，将呈反应。
(3) 三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中细菌数量。在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下统计结果：
甲同学涂布了两个平板，统计的菌落数是236和260，取平均值248；
乙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是210、240和250，取平均值233；
丙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是21、212和256，取平均值163；
在三位同学的统计中，只有一位同学的统计是正确的，指出另两位同学的统计为什么不正确？
。
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