[生物——选修3：现代生物科技专题]2013年7月，中国试管婴儿之母——卢光琇教授与研究伙伴共同宣布全球首批经全基因组测序的PGD/PGS试管婴儿在长沙诞生。新技术的突破意味着通过设计试管婴儿解决部分不孕不育问题的同时，部分肿瘤疾病、遗传性疾病的家族性遗传也将有望避免。
（1）设计试管婴儿时为了提高受孕率，胚胎移植时多采用多胚胎移植，因此需要用 处理，促进母亲排出更多的卵子。
（2）胚胎发育的卵裂期在 （填“透明带”或“放射冠”）内进行。受精卵经72小时体外培养发育成由32细胞左右的桑椹胚，可用于胚胎移植，而胚胎移植属于胚胎工程的常用技术之一。胚胎工程是指对动物的早期胚胎或 所进行的多种显微操作和处理技术。还包括体外受精、胚胎分割移植、胚胎干细胞培养等技术。
（3）为了某些需要，需对胚胎的性别进行鉴定。目前最有效最准确的方法是SRY－PCR法，操作的基本程序是：从被测的囊胚中取出几个 (填“部位”)细胞，提取DNA；然后用位于Y染色体上的性别决定基因(即SRY基因)的一段碱基作 ，以 为模板进行PCR扩增；与SRY特异性探针出现阳性反应者，胚胎为 性。
（4）设计试管婴儿、克隆人等都是引起人们广泛争论的问题。我国不反对治疗性克隆，即可利用人体细胞核移植等技术治疗人类疾病，在去除卵母细胞的细胞核时，可用微型吸管把位于 和 之间的第一极体一并吸出。
甘蔗发霉时滋生的节菱孢霉菌能产生三硝基丙酸（3-NP），该物质能抑制胆碱酯酶(能催化乙酰胆碱的分解)的合成。图1表示突触结构，③为乙酰胆碱(兴奋性神经递质)。图2是人体胃酸分泌的部分调节途径，其中幽门粘膜G细胞（一种内分泌细胞）能合成分泌胃泌素，作用于胃粘膜壁细胞，促进其分泌胃酸。请回答下列问题：
⑴图1中结构①的作用是 ，④的化学本质是 。
⑵若人体误食发霉的甘蔗后，图1中物质③的含量会 ，将导致下一个神经元 。
⑶图2通过“①→②→胃粘膜壁细胞”促进胃酸分泌过程中，兴奋在①和②神经元之间传递时，信号发生的变化是 ，作用于胃粘膜壁细胞的信号物质是 。
⑷图2通过“③→④→⑤→胃粘膜壁细胞”促进胃酸分泌的调节方式是 。研究发现，当胃酸分泌增加后会引起胃壁扩张，后者又会加强胃泌素的分泌，胃泌素的这种分泌调节机制称为 。
拟南芥某突变体可用于验证相关基因的功能。野生型拟南芥的种皮为深褐色（TT），某突变体的种皮为黄色（tt）。下图是利用该突变体验证油菜种皮颜色基因(Tn)功能的流程示意图。请据图回答下列问题：
⑴图中①为 ，形成过程中需要 酶；Tn基因能够和质粒连接成①的主要原因是 。
⑵拟南芥t基因的mRNA的末端序列为“－AGCGCGACCUGACUCUAA－”，而油菜Tn基因的mRNA与其相比，只有末端序列中的UGA变为AGA，则Tn比ｔ多编码 个氨基酸（起始密码子位置相同，UGA、UAA为终止密码子）。油菜Tn基因能在油菜突变体中表达的原因是 。
⑶若②不能在含抗生素Ｋan的培养基上生长，则原因是 。若转基因拟南芥的种皮颜色为 ，则说明油菜Tn基因与拟南芥T基因的功能可能相同。
⑷采用PCR技术扩增目的基因时，需在PCR反应体系加入引物等物质，若共用了引物62个，则目的基因扩增了 代。
图1、图2表示某基因型为AaBb的二倍体动物在生殖发育过程中正在分裂的两个细胞，图3表示生殖发育中的染色体组数的变化曲线。请据图回答：
⑴图1所示细胞对应图3中的 时段（填序号），其产生的子细胞为 ；①处染色体上出现ａ基因的原因是 。
⑵图2细胞所处时期的染色体主要行为是 ，②处染色体上出现a基因最可能的原因是 。该细胞完成分裂后能得到子细胞的基因型有 。
⑶图3中没有同源染色体的时段为 （填序号）。
⑷若想在一张装片中同时观察到图1、图2所示细胞图像，应选该动物的 (器官)制作切片。
黑藻是一种常见的沉水植物，其叶肉细胞内有大而清晰的叶绿体，液泡无色。某同学观察黑藻叶肉细胞的质壁分离现象，实验步骤和观察结果如下图。请回答下列问题：
⑴选用黑藻叶片作为质壁分离实验材料的优点除其叶片小而薄外，还有 。在制作黑藻叶片临时装片时，为了防止产生气泡，盖盖玻片的正确方法是 。
⑵步骤①中，要将视野左上方的叶肉细胞移到中央，应将装片向 移动。步骤③中观察到质壁分离现象，这是黑藻细胞 失水的结果。
⑶若步骤②中从盖玻片的一侧滴入的是加有伊红(植物细胞不吸收的红色染料)的0.3g／mL蔗糖溶液，则在显微镜下观察到A、B处颜色分别是 。
⑷若将步骤②中浸润在0.3g／mL蔗糖溶液中的黑藻叶片的装片，放在80℃条件下处理一段时间(装片中的黑藻叶片保持在0.3g／mL蔗糖溶液中)。在显微镜下清晰地观察到细胞结构后，为更准确地辨别B处颜色，应调节显微镜的 、 。如果B处呈绿色，最可能的原因是 。
(9分)小立碗藓是一种苔藓植物，易培养，被广泛应用于生物学实验研究，又因其同源重组的效率很高，已成为研究基因功能的良好材料。请回答下列问题：
(1) 甲同学在使用高倍镜观察小立碗藓的叶绿体时，发现在适宜条件下细胞中的叶绿体长时间静止不动，最可能的原因是__________________________。
(2) 乙同学用小立碗藓进行了如下实验操作：
步骤一：在洁净的载玻片中央加一滴清水，放置一片小立碗藓的小叶，盖上盖玻片。
步骤二：从盖玻片一侧滴入0.3 g/mL的蔗糖溶液，在盖玻片的另一侧________，这样重复几次。
步骤三：在显微镜下观察，若发现叶绿体向细胞中间聚拢，说明____。
(3) 同源重组在细胞中可自然发生，交叉互换的位点必须发生在特定的同源序列中，原理如图1所示。已知由硫酸盐降解酶(K基因编码)催化某种硫酸盐(APS)的降解是高等植物中硫酸盐利用的关键步骤。有人提出，植物体中还存在着该硫酸盐降解的支路(PAPS)，但不能确定其相关酶是否在植物体中存在。科研人员利用小立碗藓进行了以下研究：
图1 
图2
① 测定K基因两侧的碱基序列。若测得在序列“5′…CGACCCGGGAGT…3′”中含有一个6个碱基对的限制酶SmaⅠ的识别序列，可推知该酶的识别序列为________。
② 质粒pcDNA3上有Neo基因(新霉素抗性基因)和限制酶Sma Ⅰ、Tth11 Ⅰ和Bsm Ⅰ的酶切位点，如图2所示。为了使Neo基因能与K基因发生同源重组，应选用限制酶________将Neo基因从质粒上切下来，然后在该基因的两侧增加与K基因两侧相同的________，构建具有Neo基因的表达载体。
③ 制备小立碗藓的原生质体，将其放在________溶液中，利用聚乙二醇介导直接将Neo基因表达载体导入小立碗藓细胞内。
④ 在添加了________的培养基中培养上述小立碗藓细胞，若能够发育成完整的植物体，则表明该植株已没有K基因。若通过此转化途径得到的植株________，说明在小立碗藓中存在PAPS支路。
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