拟南芥某突变体可用于验证相关基因的功能。野生型拟南芥的种皮为深褐色(TT),某突变体的种皮为黄色(tt)。下图是利用该突变体验证油菜种皮颜色基因(Tn)功能的流程示意图。请据图回答下列问题:
⑴图中①为 ,形成过程中需要 酶;Tn基因能够和质粒连接成①的主要原因是 。
⑵拟南芥t基因的mRNA的末端序列为“-AGCGCGACCUGACUCUAA-”,而油菜Tn基因的mRNA与其相比,只有末端序列中的UGA变为AGA,则Tn比t多编码 个氨基酸(起始密码子位置相同,UGA、UAA为终止密码子)。油菜Tn基因能在油菜突变体中表达的原因是 。
⑶若②不能在含抗生素Kan的培养基上生长,则原因是 。若转基因拟南芥的种皮颜色为 ,则说明油菜Tn基因与拟南芥T基因的功能可能相同。
⑷采用PCR技术扩增目的基因时,需在PCR反应体系加入引物等物质,若共用了引物62个,则目的基因扩增了 代。