【生物—现代生物科技专题】
科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄,使番茄的耐寒能力大大提高。下图一是转基因抗冻番茄培育过程的示意图,图二为质粒限制酶酶切图谱。鱼的抗冻蛋白基因不含图中限制酶识别序列,Ampr为抗氨苄青霉素基因,其中①—④是转基因抗冻番茄培育过程中的相关步骤,Ⅰ、Ⅱ表示相关结构或细胞。请据图作答:
(1)获取鱼的抗冻蛋白基因途径主要有 。为了在番茄中获得抗冻蛋白必须将抗冻蛋白基因连接在质粒中的 之后 。图中③、④依次表示组织培养过程中番茄组织细胞的 过程。
(2)在构建基因表达载体时,可用一种或者多种限制酶进行切割。该酶的特点 。在此实例中,应该选用限制酶 切割。
(3)要利用培养基筛选出已导入含鱼的抗冻蛋白基因的番茄细胞,应使基因表达载体Ⅰ中含有 作为标记基因。
(4)研究人员通常采用 法将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内。通常采用________技术,在分子水平检测目的基因是否翻译形成了相应的蛋白质。