根据所学微生物的实验室培养和应用知识，完成下列问题。
（1）通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有___________________ 、________和高压蒸汽灭菌。
（2）锥形瓶接种过程应在酒精灯火焰附近进行，防止________污染培养基。对无菌操作时用到的玻璃器皿要用________的方法彻底消灭其中的微生物，用酒精擦拭不能达到目的。
（3）稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的________稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到________的表面，进行培养。
（4）平板划线操作（如右图所示）时要做到以下几点：
①第一次划线及每次划线之前都需要对接种环进行 ________，待接种环冷却后才能伸入菌液，以免 ____________。
②划线时最后一区不要与第一区 。
③划线用力大小要适当，防止用力过大将____划破。
（5）土壤中细菌之所以能分解尿素，是由于它们体内能合成________，这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起到徨化作用。统计样品中的分解尿素的活菌一般用________法，具体的操作流程是土壤取样→______→微生物的培养与观察 细菌的计数。
（6）统计的菌落往往比活菌的实际数目低，这是因为________________________________。
下图是某细胞进行有丝分裂的简图，据图回答：（“[ ]”内填序号，“ ”上按要求填数字、文字或字母）（除特殊说明之外，每空1分，共13分）
（1）该图是 细胞有丝分裂简图，其分裂顺序依次是 （用字母表示）。
（2）图示作为一个细胞周期还缺少处于 期的细胞简图。
（3）图示的细胞分裂结束后，子细胞内含 条染色体。
（4）染色体数目加倍发生在[ ] 期细胞中。
（5）图B表示细胞分裂 期。
（6）DNA与染色体和染色单体三者之比为2:1:2的图示是 。
（7）A图中染色体的数目为 ，染色单体数为 。
（8）在图（一）和图（二）处分别绘出该细胞有丝分裂过程中DNA分子数和染色体数
的变化曲线（一个细胞周期）。
试管苗光合作用能力较弱，需逐步适应外界环境才能往大田移栽。研究人员进行了“改变植物组织培养条件缩短试管苗适应过程”的实验，实验在适宜温度下进行，图甲和图乙表示其中的两个实验结果。（每空2分，共14分）请回答：
（1）图甲的实验是在大气CO2浓度下进行的。据图分析，试管苗在不加蔗糖的培养中
________和___________更高。
（2）图乙是试管苗在密闭、无糖培养基条件下测得的24h内CO2浓度变化曲线。图中b－c段CO2浓度升高缓慢是因为_______________，c－d段CO2浓度急剧下降是因为试管苗_____________。若d点时打开培养瓶塞，试管苗的光合速率
（3）根据上述实验结果推知，采用无糖培养基、___________和___________可缩短试
管苗的适应过程。
在植物组织培养过程中，愈伤组织的成功诱导是至关重要的步骤。科学家以食用稗的成熟胚作为外植体，在基本培养基上研究植物生长调节剂对食用稗愈伤组织诱导的影响。实验结果如下表。请回答相关问题：
注：愈伤组织诱导率（%）＝产生愈伤组织的外植体数/接种外植体总数×100%
（1）从上表可以知道，在基本培养基中添加较高浓度的 有利于食
用稗胚形成愈伤组织，而添加 则不利于食用稗胚愈伤组织的形成。
（2）已分化的稗成熟胚产生愈伤组织的过程称为_______。
（3）影响愈伤组织成功诱导的因素除植物生长调节剂外，培养的环境条件也是重要的因素。现给你提供200个已经消毒过的食用稗的成熟胚，在上述研究的基础上，探究光照对愈伤组织形成的影响。
实验步骤：
①将200个已经消毒过的食用稗的成熟胚平均分为甲、乙两组，分别接种到上表中的 培养基上；
② 
；
③ 。
预期实验结果和结论：
①如
，则光照有利于愈伤组织的形成；②如 ，则
黑暗有利于愈伤组织的形成；③如 ，则光照、黑暗对愈伤组织的形成没有影响
去除细胞壁的植物细胞称为原生质体
。酶解法制备原生质体的原理是利用酶溶液对细胞壁成分的降解作用。蜗牛酶液从蜗牛（以植物为食）消化腺中提取；果胶酶、纤维素酶从微生物中提取。为了研究不同酶液的酶解效果，某实验小组取无菌烟草幼叶，切成相同大小的小片，等量放入6支试管中，试剂用量和实验结果列于下表。请回答有关问题。
| 试管编号 项目 |
I |
Ⅱ |
Ⅲ |
Ⅳ |
V |
Ⅵ |
| 蒸馏水（mL） |
2 |
O |
1 |
1 |
1 |
1 |
| 缓冲液（mL） |
0 |
2 |
1 |
0.5 |
0.5 |
0.5 |
| 果胶酶液（mL） |
O |
0 |
O |
0.5 |
O |
0 |
| 蜗牛酶液（mL） |
O |
0 |
O |
O |
0.5 |
0 |
| 纤维素酶液（mL） |
0 |
O |
0 |
O |
0 |
0.5 |
| 实验结果（绿色深浅程度） |
－ |
－ |
－ |
+++ |
++++ |
++ |
（注：“+”越多表示绿色越深，“一”表示颜色无显著变化）
（1）实验过程中，需要轻摇试管，其目的是 ，使原生质体从叶小片中游离出来，以便观察悬浮液绿色的深浅。
（2）从绿色的深浅可推测：蜗牛酶液酶解效果最好，原因是蜗牛酶液含有 等多种酶。该实验中 是空白对照组，其设置意义是 。
（3）用网筛过滤原生质体到离心管内，离心后收集沉淀物，并用 洗涤。
某实验小组欲从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌，设计实验步骤如下，请给予合理的补充。
（1）采样与培养：将采集的土样混匀后称取1g，置于经过 法灭菌处理的 （填“固体”或“液体”）培养基中，28℃振荡培养。
（2）接种与选择：为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进
行 处理。之后，将菌液涂布接种于以 为唯一碳源的固体培养基上，30℃条件下培养。为避免污染，需将培养皿呈 状态放置。此外，为排除其他因素的影响，提高实验可信度，本步骤需设计 作为空白对照。
（3）筛选与纯化：将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围，如果菌落周围的现象是 ，则说明此种菌能够 。从平板中挑取实验效果明显的目的菌株，采
用 法接种于新的培养基平板，可对菌株进行进一步的纯化。
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