Ⅰ.土壤农杆菌能将自身Ti质粒的T-DNA整合到植物染色体DNA上,诱发植物形成肿瘤。T-DNA中含有植物生长素合成酶基因(S)和细胞分裂素合成酶基因(R),如图1所示,它们的表达与否能影响相应植物激素的含量,进而调节肿瘤组织的生长与分化。基因工程常用Ti质粒作为运载体,图2表示抗虫棉培育中使用的三种限制酶A、B、C的识别序列以及Ti质粒上限制酶切割位点的分布,抗虫基因内部不含切割位点,两侧标明序列为切割区域。
(1)据图2分析,切取抗虫基因时,使用限制酶 ,切割Ti质粒时,使用限制酶 。
(2)成功建构的重组质粒含有限制酶A的识别位点 个,若用酶C处理该重组质粒,将得到 个DNA片段。
(3)若抗虫基因插入的位置在R基因内部,筛选出 植株即是成功导入抗虫基因的棉花植株。
Ⅱ.单克隆抗体技术在生物工程中占有重要地位。请回答相关问题:
(4)科学家米尔斯坦和柯勒提出单克隆抗体制备技术的实验方案:把一种 细胞与能在体外大量增殖的 细胞进行诱导融合,使融合细胞既能大量增殖,又能产生足够数量的特定抗体。
(5)在技术操作中,需要将融合细胞用 培养基进行筛选,并进行克隆化培养和 检测,以得到足够数量的符合要求的 (填“单”、“双”、“多”)核杂交瘤细胞。
(6)若将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养,可从 中提取出大量的单克隆抗体。
(7)研究人员应用 ,改造了鼠源性抗体分子的结构,降低了鼠源性抗体的人体反应。