回答下列有关基因工程的问题
细菌、真菌等微生物产生的β-葡萄糖苷酶是一种耐热纤维素酶，可分解自然界中的纤维素获得能源。现可通过基因工程将β-葡萄糖苷酶基因（bglB基因）与图28的质粒重组并导入大肠杆菌获得大量有活性的β-葡萄糖苷酶。（质粒中ori为质粒复制所必需的DNA序列，启动子是使转录开始的一段DNA序列，终止子是提供转录终止信号的DNA序列，抗生素抗性基因为标记基因，其余为不同限制酶的酶切位点，切割形成的黏性末端均不相同）
（1）．从高产β-葡萄糖苷酶的黑曲霉品种中提取到相应的RNA，进而获得bglB基因的DNA序列，这种获取目的基因的方法是____________________。
（2）．为避免自身环化并确保bglB基因与图一质粒准确重组，可选用的限制酶是（ ）
A NdeI和XbaI B NdeI和BamHI
C XbaI D PstI E BamHI
（3）．bglB基因通过 酶与质粒结合形成重组质粒。
（4）．图二培养基中含有刚果红和纤维素，可用于筛选纤维素酶产量高的重组菌，原理如图三。
据此分析，图二中的[ ]菌落即为纤维素酶产量最高的菌株。
（5）．在PCR扩增bglB基因的过程中，加入诱变剂可提高基因的突变率。与用诱变剂直接处理微生物相比，上述育种技术获得热稳定性高的bglB基因的效率更高，其原因是在PCR过程中（ ）（多选，2分）
| A．仅针对bglB基因进行诱变 |
| B．bglB基因产生了定向突变 |
| C．bglB基因可快速累积突变 |
| D．bglB基因突变不会导致酶的氨基酸数目改变 |
海洋中的发光细菌具独特的生理特性，可作为环境监测的指标生物。
I.（1）使用 法（答二种），可在固体培养基上获得单菌落，纯化发光菌株。
（2）细菌这类微生物在基因工程中有重要应用，试列举其中一项。
II．现利用发光细菌对海水重金属污染程度进行生物毒性监测，请完善下列实验设计并回答问题：
实验原理：细菌代谢正常时，发光强度稳定；当重金属影响到其代谢时，发光会受到抑制，抑制程度用抑光率（发光被抑制的百分率）表示。
实验材料：发光菌悬液、可能受重金属污染的待测海水水样、3%NaCl溶液、荧光分光光度计（用于测定细菌发光强度）、试管等。
（1）实验步骤：按下表配制待测海水样品稀释液。
| 组 别 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
| 3%NaCl溶（mL） |
|
4.74 |
4.49 |
4.24 |
3.99 |
| 海水样品（mL） |
|
0.25 |
0.50 |
0.75 |
1.00 |
| 发光菌悬液（mL） |
|
0.01 |
0.01 |
0.01 |
0.01 |
| 混合液中海水浓度（%） |
|
0.05 |
0.10 |
0.15 |
0.20 |
请完善实验步骤：
①1号试管中应加入：3％NaCl溶液、海水样品、发光菌悬液分别为 mL。
②各试管静置15min后， 。
（2）计算相对抑光率：按照公式T％= 计算各组相对抑光率。
（3）如果测得上述各组相对抑光率如下：
| 组别 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
| 相对抑光率（%） |
0 |
6 |
13 |
17 |
23 |
①请绘制海水浓度对相对抑光率影响的曲线。
②根据结果可以判断待测海水样品 。
血糖浓度保持平衡对机体生命活动具有重要作用，下图为胰岛素作用机理模式图，请分析回答问题。
（1）胰岛素降低血糖浓度的机理是胰岛素与 结合后，一方面促进 合成，另一方面使 增加，促进葡萄糖进入细胞。除此之外，胰岛素的作用还表现在能促进 ，同时抑制非糖物质（脂肪、蛋白质）转化为葡萄糖。胰岛素作用于靶细胞的过程，体现了细胞膜具有 的功能。
（2）某人因体内含有胰岛素受体的抗体而表现出高血糖症状。给其注射胰岛素仍不能有效调节其血糖水平，原因是 ，这类疾病在免疫学上称为 病。
（3）有人试图通过研磨胰腺的方法获得胰岛素，均未获得成功，原因是
。
果蝇的繁殖能力强、相对性状明显，是常用的遗传实验材料。
（1）果蝇对CO2的耐受性有两个品系:敏感型(甲)和耐受型(乙)，有人做了以下两个实验。
实验一 让甲品系雌蝇与乙品系雄蝇杂交，后代全为敏感型。
实验二 将甲品系的卵细胞去核后，移入来自乙品系雌蝇的体细胞核，由此培育成的雌蝇再与乙品系雄蝇杂交，后代仍全为敏感型。
①依据上述实验结果推测，与CO2耐受性有关的基因位于 （选填“细胞质”或“细胞核”）。
②要验证上述推测，也可另设计一个杂交实验替代实验二，该杂交实验的亲本组合为____
_______________。
（2）果蝇的某一对相对性状由位于X染色体上的一对等位基因(N和n)控制，其中的一个基因在纯合时能使合子致死(XNXN、XnXn是纯合子，XNY、XnY也可视为纯合子)。科学家为了确定致死基因，用一对果蝇做了杂交实验，得到F1代果蝇共185只，其中雄蝇63只。请分析：
①杂交亲本的基因型可能是 ，也可能是 。
②若F1代雌蝇只有一种表现型，则致死基因是__________，F1代雌蝇基因型为____________。
③若F1代雌蝇共有两种表现型，则致死基因是_______________。让F1代果蝇随机交配，理论上，F2代成活个体构成的种群中基因N的频率为_________________（用分数表示）。
夏季某睛朗的一天对一密闭蔬菜大棚中某种气体的含量进行一天24小时的检测，结果如图1，图2是叶肉细胞内两种细胞器间的气体关系图解。请回答下列问题：
（1）图1中所测气体为 ；某同学据图1认为该大棚内的蔬菜一天内有机物增加，其依据是 。
（2）图1中的EC段叶肉细胞内的C3含量的变化趋势是 ，图1中CD段变化的原因可能是 。
（3）对应图1中的DB段，图2中应该进行的气体转移途径有 。
（4）某兴趣小组为了研究光合作用进行的条件和场所进行了如下实验：
选一盆银边天竺葵（叶边缘呈白色），在温度适宜的情况下，预先放在黑暗中48小时，再用黑纸将叶片左侧上下两面夹住，然后把天竺葵放在阳光下照射6小时，剪下此叶片，用打孔器分别在该叶片不同部位取下a、b、c三个圆片，放在酒精溶液中加热脱色，再放入清水中漂洗，取出后加碘液。请依据上述信息及图3回答：
①造成叶片b部位和c部位的细胞结构和功能有差异的根本原因是 ；
②可将叶圆片放在酒精中脱色的原理是 ；
③叶圆片b和c对比，说明 。
薇甘菊为入侵我国的外来植物，田野菟丝子茎缠绕在薇甘菊植株上，茎上即可形成吸器吸收薇甘菊植株中的营养物质。
(1)研究证实外源细胞分裂素能诱导菟丝子形成吸器。其实验过程是用含细胞分裂素的羊毛脂处理未缠绕的菟丝子茎，同时用________处理的未经缠绕的菟丝子茎作为对照。几天后，观察到经____________处理的菟丝子茎形成了吸器。
(2)有学者欲进一步研究细胞分裂素诱导菟丝予形成吸器的机理，通过查阅大量资料发现细胞分裂素可能通过钙调素起作用。已知三氟啦嗪可与钙调素结合，抑制钙调素功能，荧光显微镜可观察到二者形成复合物的荧光。实验过程如下：
①每组取茎切片用__________水溶液浸泡，并设置蒸馏水浸泡的茎切片作为对照。
②根据实验结果可知即将形成吸器的细胞含有丰富的____________。由此推测细胞分裂素通过____________诱导吸器的产生，若用三氟啦嗪与细胞分裂素混合处理未经缠绕的菟丝子茎，会_____________细胞分裂素的诱导作用。
(3)田野菟丝子形成吸器后，自身导管和筛管与薇甘菊的导管和筛管相连，但两者并没有成为一个个体，更不属于一个物种，理由是：自然条件下，它们之间存在着___________。若田野菟丝子专一生长在薇甘菊上，薇甘菊入侵区生长菟丝子后，会降低薇甘菊的种群密度，物种丰富度会______。
(4)薇甘菊生性喜光，善于攀援，生长迅速，致使入侵区许多植物被其覆盖。薇甘菊与被其覆盖的绿色植物之间是____________关系。
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