某种酶的活性与温度的关系如下图所示。请回答一组相关的问题。

（1）可以将                               作为酶活性高低的指标。
（2）在t₁和t₅的温度环境中，该酶的活性都极低。这两种环境中酶结构上的主要区别是温度达到t₅时                 。
（3）已知经过t₂温度处理的该酶，当温度提高到t₃时，其活性随着提高；但不知道经过t₄温度处理的酶，当温度降低到t₃时，其活性是否可以恢复到较高水平。请完成以下实验设计，对后一个问题进行探究。
①取3支试管，编号为A、B、C，各加入适宜浓度的该酶溶液1mL。将A和B设为对照组，分别在温度为t₃、t₄水浴装置中保温10 min；将C作为实验组，其温度处理应是先在                     ，然后再转移到                        。
②另取适宜浓度的反应物溶液各2mL，分别加入a、b、c的三支试管中，           
                               。
③分别将a、b、c中的溶液对应加入A、B、C内，振荡摇匀后依次在各自温度环境中保温10min，检测各试管中产物的量，记录，比较。
④结果预测与分析：
如果                           ，则说明随着温度由t₄降低，该酶的活性可以恢复；
如果                           ，则说明随着温度由t₄降低，该酶的活性不能恢复。
(4)本实验需要控制的无关变量有_____________________。（至少写2点）。