实验证明萌发的禾谷类种子中淀粉酶的含量显著增高,主要有α-淀粉酶和β-淀粉酶.其中β-淀粉不耐热,在70℃以上保持15min即失活.而α-淀粉酶耐热。某实验小组进行了“提取小麦种子中α-淀粉酶并测定α-淀粉酶催化淀粉水解的最适温度”等相关实验
实验材料:萌发3天的小麦种子(芽长约1cm).
实验原理:α-淀粉酶和β-淀粉酶都能将淀粉分解为麦芽糖,通过特定方法检测麦芽糖的含量。以5min内每克样品水解产生麦芽糖的毫克数表示酶活性的大小。
实验步骤:
步骤一:制备混合酶液:研磨萌发的小麦种子,获取混合酶液。
步骤二:制备α-淀粉酶保持活性的酶溶液。
步骤三:取 6支干净的、体积相同并具刻度的试管依次编号,按下表要求加入试剂。
试管编号 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
5%的可溶性淀粉溶液(mL) |
8 |
8 |
8 |
8 |
8 |
8 |
恒温水浴5min(℃) |
0 |
20 |
40 |
60 |
80 |
100 |
α-淀粉酶保持活性的酶溶液 (mL) |
1 |
1 |
1 |
1 |
1 |
1 |
恒温水浴5min(℃) |
0 |
20 |
40 |
60 |
80 |
100 |
溶液混合,振荡后恒温水浴5min(℃) |
0 |
20 |
40 |
60 |
80 |
100 |
麦芽糖含量(mg) |
X1 |
X2 |
X3 |
X4 |
X5 |
X6 |
步骤四,保温5min后取出,立即向6支试管中加入4ml0.4mol/L的NaOH溶液,以终止反应。并测定各试管中麦芽糖的含量。
请回答下列问题:
(1)选用萌发的小麦种子提取酶液的主要理由是
(2)步骤二的具体操作是
(3)实验结果发现试管4中麦芽糖含量最高,能否据此推断α-淀粉酶的最适合温度一定
是60℃? 理由是
(4)有人对该实验设计的严密性提出了质疑,认为还必须在每组温度下增加一个对照试验,即加5ml蒸馏水和1ml酶液。你认为这样做的目的是