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  • 更新 2022-09-03
  • 科目 生物
  • 题型 综合题
  • 难度 中等
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甲、注意,此题仅3、4、5、6、7、8班做
大肠杆菌pUC18质粒是基因工程中常用的运载体。某限制酶在此质粒上的唯一酶切位点位于LacZ基因中,如果没有插入外源基因,LacZ基因便可表达出β半乳糖苷酶。当培养基中含有IPTG和Xgal时,Xgal便会被β半乳糖苷酶水解成蓝色,大肠杆菌将形成蓝色菌落。反之,则形成白色菌落。下图表示利用此质粒实施基因工程的主要流程。请分析并回答问题。

(1)对已获得的目的基因可利用________技术进行扩增。
(2)目的基因插入质粒构建重组质粒的过程中,需要DNA连接酶恢复________键。
(3)将试管Ⅰ中的物质和大肠杆菌共同置于试管Ⅱ的目的是________;大肠杆菌需事先用Ca2进行处理,目的是________________。
(4)将试管Ⅱ中的菌液接种于选择培养基上,培养基中加入氨苄青霉素的作用是筛选出________。
(5)若观察到培养基上出现________色菌落,则说明大肠杆菌中已成功导入了重组质粒。如果作为受体细胞的大肠杆菌也含有LacZ基因,则不利于重组质粒的筛选,原因是________________

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甲、注意,此题仅3、4、5、6、7、8班做大肠杆菌pUC18