使用DNA重组技术,把天然或人工合成的遗传物质定向插入细菌、酵母菌或哺乳动物细胞中,使之充分表达,经纯化后而制得的疫苗称为基因工程疫苗。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒,该病毒表面A蛋白为主要抗原,其基因工程疫苗生产流程如下图。请回答:
(1)过程①表示 。
(2)可能利用 技术扩增获得A基因。使用该技术的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列来合成 。还需要有耐热的 酶。扩增时DNA解链的温度应控制在 ℃。而互补链延伸时的温度应控制在 ℃。
(3)过程③构建A基因重组载体时,除了A基因外,还必须有 、 和 基因等。这一过程需要使用 和 这两种工具酶。
(4)过程④中选用火肠杆菌作为受体细胞,最常见的转化方法是:用 处理,得到 细胞,再将经过处理的细胞与溶有A基因重组表达载体的缓冲溶液混合,并控制在一定的温度使之完成转化。
(5)可用 技术检测受体细胞菌的DNA上是否插入了A基因,要检测A基因是否成功表达还需检测受体细菌 。