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  • 更新 2022-09-03
  • 科目 生物
  • 题型 综合题
  • 难度 较难
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图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有Msp Ⅰ、BamH Ⅰ、Mbo Ⅰ、Sma Ⅰ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。请回答下列问题:

(1)若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段,产生的末端是      末端,其产物长度为                                          
(2)若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换,那么基因D就突变为基因d。从杂合子分离出图1及其对应的DNA片段,用限制酶Sma Ⅰ完全切割,产物中共有      种不同DNA片段。
(3)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行,形成重组质粒,那么应选用的限制酶是        。在导入重组质粒后,为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌,一般需要用添加          的培养基进行培养。经检测,部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达,其最可能的原因是                                                             

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图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分