我国基因工程药物的研制和生产发展迅猛，下图是利用基因工程方法生产重组人生长激素的示意图。图中质粒表示基因工程中经常选用的载体—pBR322质粒，Ampr表示青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因。根据上图回答下列问题（限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ切割形成的末端均不相同）：
（1）过程②必需的酶是 ，过程④必需的酶是 。⑤过程中为提高成功率，常用 溶液处理大肠杆菌。
（2）如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ对质粒pBR322进行切割，用一种酶、两种酶和三种酶分别切割时，则形成的DNA片段共 种，其中含有完整四环素抗性基因的DNA片段的比例是 。
（3）如果只用限制酶PstI切割目的基因和质粒pBR322，完成过程④、⑤后，将三角瓶内的大肠杆菌（不含Ampr、Tetr抗性质粒）先接种到甲培养基上，形成菌落后用无菌牙签挑取甲上的单个菌落，分别接种到乙和丙两个培养基的相同位置上，一段时间后，菌落的生长状况如图所示。接种到甲培养基上的目的是筛选 的大肠杆菌，含有目的基因的大肠杆菌在乙、丙培养基上的存活状态分别是 ， 。
植物叶肉细胞原生质体的分离和培养的主要过程可用下图所示图解简单表示：
(1)原生质体的结构包括___________、___________、______________三部分构成。
(2)培育胚状体利用了________________这一项生物技术，培养基中除了含有一定的营养外，还必须含有细胞分裂素、生长素等植物激素，还需要对培养基进行严格的________。
(3)获得原生质体后，需要对其活力进行检查，下列哪些实验最合适（ ）
A．观察原生质体的结构是否完整 B．观察细胞质的流动
C．观察细胞有丝分裂 D．观察叶绿体数目的多少
(4)一般在培养基上培养24～48小时后，大部分原生质体已再分生出细胞壁。可以取样，利用25％的蔗糖溶液以及其他用具，通过______________________实验来鉴别细胞壁是否已经再生。
(5)愈伤组织再分化形成的胚状体再继续培养，则可培育出完整的植株，这体现了____ __。
(6)从叶片的叶肉细胞到获得胚状体的过程中，需要经过（ ）
①无丝分裂 ②有丝分裂 ③减数分裂 ④原代培养 ⑤传代培养 ⑥植物体细胞杂交 ⑦细胞融合 ⑧脱分化 ⑨再分化
A．①④⑤⑦⑧ B. ②④⑤⑥⑧⑨ C．②⑧⑨ D．③⑥⑧⑨ 
(7)从图解可知，可在避光条件下进行的是_______ (用字母a～e回答)阶段，若为了获得三七的细胞产物，则只需培养到________。若为了获得三七的人工种子，则需要培养到___________。
已知玉米宽叶（A）对窄叶（a）为显性，且在玉米苗期便能识别。根据生产实践获知，杂交种（Aa）表现为高产，分别比显性
品种和隐性品种的产量高l2%、20%。某农场在培育玉米杂交种
时，将宽叶玉米和窄叶玉米进行了间行均匀种植，但由于错过了人工授粉的时机，结果导致大面积地块自然授粉[设同株异花授粉（自交）与品种间异株异花授粉（杂交）几率相同]。根据上述信息回答下列问题：
（1）假若用上述自然授粉收获的种子用于次年种植，希望次年不减产，则在先一年进行了自然授粉的地块只在 （宽叶／窄叶）植株上采种，次年播种后只留 （宽叶／窄叶）苗可达到目的。
（2）玉米高茎对矮茎是显性，矮茎玉米幼苗经适宜浓度的生长素类似物处理，可以长成高茎植
株。为了探究该变异性状是否能遗传，生物科技小组设计实验方案如下。请你预期最可能的结果并作出解释。
实验步骤：
①在变异高茎玉米雌花、雄花成熟之前，分别用纸袋将雌穗、雄穗套住，防止异株之间传粉。
②雌花、雄花成熟后，人工授粉，使其自交。
③雌穗上种子成熟后，收藏保管，第二年播种观察。
i预期最可能的结果是 。
ii对上述预期结果的解释是____ 。
某生物兴趣小组的同学从资料上获知：二氯二乙胺能够阻止参与DNA复制的酶与DNA相互作用。他们推测：二氯二乙胺能抑制癌细胞的增殖，能作为一种癌症的化疗药物，并就此问题设计实验进行了探究。
实验材料：肝部长有肿瘤的小鼠，二氯二乙胺溶液，蒸馏水，生理盐水，含有全部营养物质的细胞培养液，显微镜，血球计
数板，试管，吸管等。
I．其中某位同学实验操作如下：（请将实验内容补充完整）
（1）取洁净的培养皿一个，加入适量的培养液，从小鼠肝部切取肿瘤组织，剪碎，并用
处理，使其分散开来，置于培养皿中培养。
（2）取洁净的试管5支，加入等量的培养液，编号1、2、3、4、5， 并在1-4号试管中加入 ，
5号试管中加入 。
（3）从培养皿中吸取等量的培养液置于1-5号试管中，振荡后，将试管放置在冰箱中培养一段时间。
（4）直接从静置的5支试管中吸取适量培养液置于血球计数板上，在显微镜下计数，记录数据。
请你纠正上面这位同学操作上在（3）和（4）步骤中存在的错误
； 
。
II．根据纠正后的正确方法进行实验，结果如下：
| 试管编号 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
| 二氯二乙胺浓度(mg/mL) |
0.1 |
0.2 |
0.3 |
0.4 |
0 |
| 步骤II记录的细胞数目（个/mL） |
350 |
363 |
342 |
335 |
336 |
| 步骤V记录的细胞数目（个/mL） |
320 |
275 |
186 |
96 |
560 |
A.在该实验中，遵循了实验设计的 
原则。
B.根据实验结果,你能得出的结论:
第一 ； 第二 
有两种植物，一种在强光下生长，一种阴生生长。从这两种植物上各取一片彼此相似的叶片，分别放在两个透明盒子中。在适宜温度条件下，逐渐增加光照强度，测定放氧速率的数据如下，请回答有关问题
(1)由表中数据可以推测，取自强光下的叶片是_______；光照强度直接影响光合作用的
__________过程，该过程可将光能转化为______________中的化学能。
(2)如果在某光强下，叶片放氧速率为零，其生理学含义是____________。如果用此光强照射大田作物，则作物很难正常生长，分析原因是__________________________
________________。
(3)光照强度>600 μmol光子/m2·s时，叶片A放氧速率主要被____________限制，叶肉细胞呼吸作用产生的CO2转移途经是__________________。
(4)若绘制A、B两叶片放氧速率曲线图，则大约在175 μmol光子/m2·s时两条曲线相交，此点的生物学含义是____ _______。
实验探究：
（1）提出问题：除植物种子外，植物的其他部分，如根尖细胞中是否也含有脂肪？
（2）作出假设：____________________________________________ 。
（3）实验原理：①__________________________________________；
②苏丹III可溶于质量分数为50%的酒精溶液。
（4）实验材料：新鲜洋葱根尖，苏丹III染液、质量分数为10%盐酸溶液，质量分数为50%的酒精溶液，蒸馏水，载玻片，盖玻片，_________，刀片，培养皿，镊子，吸水纸，滴管。
（5）主要实验步骤：
①取一培养皿，向其中加入适量的质量分数为10%盐酸溶液，再将洋葱根尖浸泡于其中，5min后取出，并用清水漂洗。
②用经过处理的洋葱根尖，制作成临时装片，再在装片的盖玻片上再加一块载玻片，用手指轻压，使根组织细胞分散。
③揭去盖玻片，在洋葱根尖上滴加2~3滴_____________，染色3min。
④用吸水纸吸去染料，再滴加1—2滴质量分数为50%的酒精溶液，作用是____________；用吸水纸吸去根尖周围的酒精，滴一滴蒸馏水，盖上盖玻片，制成临时装片。
⑤显微镜观察
（6）最可能的结果：____________________________________。
（7）该实验试剂若改为苏丹Ⅳ染液，洋葱根尖临时装片改为花生子叶临时切片，那么，可以在显微镜视野中观察到____________________________________
粤公网安备 44130202000953号