酶解法制备原生质体的原理是利用酶溶液对细胞壁成分的降解作用。蜗牛酶液从蜗牛(以植物为食)消化腺中提取;果胶酶、纤维素酶从微生物中提取。为了研究不同酶液的酶解效果,某实验小组取无菌烟草幼叶,切成相同大小的小片,等量放入6支试管中,试剂用量和实验结果列于下表。请回答有关问题:
试管编号
项目
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I
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Ⅱ
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Ⅲ
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Ⅳ
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V
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Ⅵ
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蒸馏水(mL)
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2
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O
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1
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1
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1
|
1
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缓冲液(mL)
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0
|
2
|
1
|
0.5
|
0.5
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0.5
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果胶酶液(mL)
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O
|
0
|
O
|
0.5
|
O
|
0
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蜗牛酶液(mL)
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O
|
0
|
O
|
O
|
0.5
|
0
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纤维素酶液(mL)
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0
|
O
|
0
|
O
|
0
|
0.5
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实验结果(绿色深浅程度)
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-
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-
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- -
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+++
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++++
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++
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(注:“+”越多表示绿色越深,“-”表示颜色无显著变化)
(1)加入酶液后要轻摇试管的目的是__________。
(2)用网筛过滤原生质体到离心管内,离心后收集沉淀物,并用__________洗涤。
(3)从绿色的深浅可推测:蜗牛酶液酶解效果最好,原因是蜗牛酶液含有__________等多种酶。该实验中________是空白对照组,其设置意义是______________________。
(4)收集的原生质体是否符合要求还需进行检验,如何检验?_____________。