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  • 更新 2022-09-03
  • 科目 生物
  • 题型 综合题
  • 难度 较难
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下图是将目的基因导入动物细胞,培育转基因动物的常用操作程序。根据图示过程和所学知识,将下面操作程序补充完整。

(1)构建基因表达载体:在构建基因表达载体时常要用到工具酶。常用的DNA连接酶有__________和___________,后者也可以用于平末端的连接。如果目的基因要在乳腺细胞中表达,基因表达载体构建时要将目的基因与__________、标记基因和终止子等组件重组在一起,载体一般要有一至多个限制酶切割位点便于     _________。
(2)获得足够数量的受精卵:为了获得足够数量的受精卵,先利用___________刺激供体雌性鼠超数排卵,然后从______________冲取______________,再完成体外受精。
(3)将目的基因导入细胞:确定目的基因是否整合到染色体上,一般需用______________做探针,与转基因小鼠细胞中提取的______________进行DNA分子杂交。
(4)早期胚胎培养:早期胚胎培养的培养液成分一般比较复杂,除一些无机盐和有机盐外,还需要添加___________、______________,氨基酸、核苷酸等营养成分,以及动物血清等物质。当胚胎培养到适宜的阶段时,可进行胚胎移植。
(5)胚胎移植:在胚胎移植前要对接受胚胎的受体进行_____________处理。移植后,还要对受体雌鼠进行_____________检查。
(6)胚胎干细胞形态上具有__________________________________________的特性,它在添加______________的培养液中可以维持不分化的状态。

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下图是将目的基因导入动物细胞,培育转基因动物的常用操作程序。